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文档简介
1、第第1页共 页细胞液浓度大小:质壁分离实验;细胞是否死亡:质壁分离实验、亚甲基蓝溶液染色;甲状腺激素作用:动物耗氧量、发育速度等;生长激素作用:生长速度(体重变化、身高变化);胰岛素作用:动物活动状态。 实验条件的控制方法增加水中氧气:泵入空气或吹气或放入绿色植物;减少水中氧气:容器密封或油膜覆盖或用凉开水;除去容器中CO2: NaOH溶液或KOH溶液;除去叶片中原有淀粉:置于黑暗环境一昼夜;除去叶片中叶绿素:酒精隔水加热;除去光合作用对呼吸作用的干扰:给植株遮光;如何得到单色光:棱镜色散或彩色薄膜滤光;防止血液凝固:加入柠檬酸钠;DNA半保留复制方式探究:密度梯度离心;各种细胞器的提取:细胞
2、匀浆离心。选修易错点区分DNA连接酶和DNA聚合酶、限制性核酸内切酶和解旋酶DNA连接酶连接两个DNA片段,而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核 苷酸链上。限制性核酸内切酶是切割某种特定的脱氧核苷酸序列,并使两条链在特定的位置断开,而解旋酶是将DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。启动子工起始密码;终止子工终止密码 根据受体种类确定基因工程的受体细胞:植物:植物体细胞或受精卵动物:受精卵或体细胞微生物:细菌。 注:目的基因导入受体细胞不是基因工程成功的标志,基因工程是否成功在于目的基因 是否成功表达。高考必记关键点植物组织培养的关键条件:离体,一定营养物质,激素(生长素、细胞分裂素
3、)等。培养基状态:固体培养基(需脱分化生根培养基及生芽培养基)。体内细胞未表现全能性的原因:基因的表达具有选择性。植物激素的使用 脱分化阶段细胞分裂素比例较高,以促进细胞的分裂;再分化阶段生长素比例较高,以 促进芽与根的形成。光照的使用 脱分化阶段不需要给予光照,再分化阶段需要给予光照,以利于叶绿素的形成。 植物体细胞杂交的关键酶解法 用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。促融剂 聚乙二醇。杂种细胞的形成标志 新细胞壁的形成。培养杂种植株的技术植物组织培养。培养成功的原理 细胞全能性。 动物细胞培养的特殊条件(1)胰蛋白酶的两次使用:首先用胰蛋白酶处理动物的器官或组织,以制备单细胞悬液; 培养过程中发
4、生接触抑制时,同样要用胰蛋白酶使细胞分散开。(2)避免杂菌污染的措施:培养液及培养用具灭菌处理,加入一定量的抗生素,定期更换r 、# 、亠培养液。特殊的营养条件:液体培养基。加入动物血清、血浆等。通入氧气以满足代谢的需要。通入二氧化碳以维持培养液的 pH。 克隆动物的技术手段动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养和胚胎移植。易错警示杂种细胞形成的标志:新的细胞壁的生成。杂种植株遗传物质的变化:杂种植株的变异类型属于染色体变异,杂种植株的染色体 数目通常是两亲本体细胞染色体数目之和,杂种植株属于异源多倍体。动物细胞融合形成杂交细胞,杂交细胞进行细胞培养,获得大量的克隆细胞,但没有 形成生物体,因此动
5、物细胞融合的原理是细胞增殖和细胞膜的流动性,不包含细胞全能 性。动物细胞融合与单克隆抗体制备的归纳(1)制备单克隆抗体时选用一种抗原处理的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合, 产生 杂交瘤细胞,杂交瘤细胞兼有两个亲本细胞的特性 在体外培养条件下能不断增殖, 同时能产生出某种特异性的抗体。进行动物细胞的诱导融合,形成的杂种细胞有三种:AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我们所需要的杂种细胞,所以需要 用选择性培养基进行筛选。单克隆抗体制备过程中的两次筛选第一次筛选:利用特定选择培养基筛选,获得杂交瘤细胞,即 AB型细胞(A为浆细胞,B为骨髓瘤细胞),筛选掉A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选: 利用多孔板法和抗原 抗体杂交法筛选, 获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 胚胎工程区别 2 种标志受精的标志:看到两个极体。受精完成的标志:雌雄原核膜融合。 把握“冲卵”的 2 个不同胚胎移植过程:冲出的是早期胚胎。体外受精过程:冲出的是卵子。 胚胎移植成功的关键(1)供体、受体同期发情处理。(2)供
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