临床检验技士微生物2015讲义

1、床标生 检述考点临床标本微生物学检验（血液、脑脊液、痰、尿液、粪便、性（1）常见病原菌疾病、）（2）标本及运送检验方法临床意义床标本细菌检的 本程序染正常人的血液是无菌的。菌血症是指在血液中可检测到细菌，包括一过性和持续性在血中存在。败血症是指病原菌侵入血流后，在其中大量繁殖并产生毒性产物，引起全身脓毒血症是指化脓性细菌败血症时，细菌通过血流扩散至全身其他组织或灶。（一）常见病原菌症状。，产生新的化脓（二）标本1.采血时间和频率次。发热初期或期，或在未用抗生素前。但怀疑细菌性心内膜炎时，血培养不少于三采血量一般为静脉采血，成人采血量 1020ml，儿童 35ml，婴儿 12ml。床边直接注入血

2、液培养基，否则用 SPS 抗凝剂送检，不得用 EDTA，枸橼酸钠抗凝。阳性菌菌球菌金葡、CNS、A/B 链球菌、链球菌、肠球菌、草绿色链球菌脑膜炎球菌、卡他汉菌杆菌产单核菌、炭疽杆菌、结核分枝杆菌、产气荚膜梭菌大肠杆菌、（副）伤寒沙门菌、菌、沙雷菌、绿脓杆菌、不动杆菌、气单胞菌、流感杆菌、布鲁菌、嗜肺军团菌、类杆菌真菌假丝酵母菌、菌、隐球菌、球孢子菌4.检查内导管有无细菌污染，可无菌操作，剪下导管 5cm 远侧段，置无菌容器内送检。（三）微生物分离培养和鉴定1.培养基的选择用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶，如需氧厌氧，需氧高渗等。2.分离和鉴定 当观察有细菌生长时或血培养仪阳性（1）涂片

3、染色镜检，结果及时与临床联系；时，应及时作如下检验：（2）转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定；（3）同时做药敏试验，结果及告临床作治疗参考。（四）方式结果：7d无细菌生长。疑为亚急性细菌性心内膜炎、布鲁菌病、厌氧菌血症、真菌血症时，血培养至少连续培养 23 周，仍无细菌生长者可阳性结果三级为。方式：第一级第二级是第三级告知标本已出现阳性并直接细菌涂片结果，同时做初步药敏试验；初步药敏结果，同时做正式鉴定和药敏试验；正式鉴定和药敏试验结果。（五）临床意义葡萄球菌菌血症疖、痈、脓肿及烧伤创面等灶继发，也可由呼吸道引起。G-菌主要危及机体免疫功能低下的，耐药菌

4、株不断增加。厌氧菌的菌血症常合并需氧菌，临床症状较重而复杂。L 型菌的菌血症主要由于使用抑制细菌细胞壁免疫低下者常出现真菌菌血症。的抗生素后，由缺损细胞壁的细菌所致。院内菌血症不断上升。三、中枢神经系统（一）常见病原微生物（二）标本用药前，无菌操作腰穿方法天冷时保温，不可冰箱保存。23ml，无菌试管常温下立即送检。用于检测时应冷藏送检。（三）检验方法1.涂片镜检 离心 3000rpm，15 分钟。染色（一般细菌）、抗酸染色（分支杆菌）、墨汁染色（隐球菌）、电镜检查（颗粒）。阳性菌菌真菌及其他葡萄球菌链球菌 草绿色链球菌 A、B 群链球菌结核分枝杆菌产单核菌消化链球菌脑膜炎 菌卡他 菌流感 杆菌

5、肠杆菌科细菌非发酵菌类杆菌乙型脑炎 脊髓灰质炎新肠道68-71 型狂犬病新生隐球菌假丝酵母菌钩端螺旋体2.分离培养 5g/L 葡萄糖增菌肉汤、血平板、中国蓝琼脂平板或琼脂平板、巧克力平板。结核菌接种罗-琴培养基或米氏 7H10 培养基。真菌培养接种沙氏培养基。胚接种、细胞培养。培养常用动物接种、鸡3.学检测可直接检测抗原。（四）临床意义细菌性脑膜炎是中枢神经系统的常见类型。真菌性脑膜炎最常见于隐球菌脑膜炎，其他的真菌性脑膜炎如多，特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易发。流行性乙型脑炎可获得持久免疫力，再次发病者极少见。酵母、球孢子性脑膜炎日渐增肠道对中枢神经系统的危害性逐渐引起人们的关注和重视。

6、四、呼吸道呼吸道按解剖结构分为上呼吸道和下呼吸道。上呼吸道下呼吸道主要指喉及喉以上的呼吸道主要指气管、支气管和肺的。（一）上呼吸道的正常菌群1.球菌 凝固酶葡萄球菌，链球菌，微球菌，菌，厌氧球菌。2.杆菌 棒状杆菌，杆菌，类杆菌，梭杆菌。（二）常见病原微生物（三）标本1.方法（1）上呼吸道：常采用鼻咽拭子；在扁桃体部位、咽后壁及口腔内炎症、溃疡或渗出部位采样时，应先用清水漱口，再标本。（2）下呼吸道：常采用自然咳痰法、支气管镜、胃内、咽拭子。清晨第一口痰为宜，最好在用抗菌药物前，必须先用清水漱口，避免唾液混入。2.立即送检。（四）检验方法1.涂片：检查细菌常用染色、抗酸染色；检查隐球菌采用墨汁

7、染色；军团菌、支原体、合格的痰标本：等可用免疫荧光抗体染色。白细胞25 个/低倍视野，鳞状上皮细胞10 个/低倍视野。2.分离培养阳性菌菌球菌杆菌真菌葡萄球菌，链球菌，化脓性链球菌，肠球菌白喉棒状杆菌，结核分枝杆菌，炭疽芽胞杆菌酵母菌，隐球菌，（副）流感，呼吸道合胞，腺病毒，麻疹，巨细胞脑膜炎 菌，卡他 菌流感 杆菌，大肠 ， 菌，铜绿假单胞菌， 支原体，军团菌，百日咳杆菌（1）痰标本的前处理一般是用无菌生理盐水将痰洗净，再加入胰酶溶液使痰均质化。（2）普通细菌培养采用血平板、中国蓝琼脂平板或（五）临床意义琼脂平板、巧克力平板。注意合格的下呼吸道标本，以提高检出率和阳性的正确率。一些条件致病菌

8、和耐药菌成为医院内的主要致病菌。真菌性多为条件致病性真菌，常见的以酵母菌为主。五、上下：主要有肾盂肾炎：主要有炎和炎（一）常见病原微生物（二）标本1.2.时间 一般为晨起第 1 次尿送检。方法清洁中段尿：常采用，标本前要用肥皂水或碘附（女性）或头（）。肾盂尿法；穿刺法；导尿法：最好，防止逆行3.注意事项染。严格进行无菌操作，尽量避免污染菌，立即送检，不超过 1h，尿中不得加任何防腐剂和（三）分离培养1.培养基的选择剂。普通细菌选用血平板、中国蓝琼脂平板或2.尿细菌定量培养。（四）结果琼脂平板。特殊细菌使用特殊、选择培养基。1.一般 48h 无细菌生长。2.阳性 菌落计数、鉴定及药敏结果。G-杆

9、菌105cfu/ml； G+球菌104cfu/ml，有意义。G+球菌104cfu/ml，多为污染；G+球菌 104105cfu/ml，可疑阳性。的细菌数少于 105CFUml 时多见于以下几种情况：3.应用抗菌药物，尿中细菌发育受到抑制；使用低敏感性药物，大多数细菌停留在 104CFUml；尿浓度变化大时及尿频时；在 5.0 以下 8.5 以上，则发育受阻；病原菌发育要求条件高时；采尿时部剂混入尿中。阳性菌菌球菌杆菌其他葡萄球菌，化脓性链球菌，肠球菌结核分枝杆菌真菌，厌氧菌菌大肠，肠杆菌，非发酵菌，变形杆菌沙门菌，沙雷菌，菌，布鲁菌，菌六、消化道（一）常见病原菌肠毒素为主的病原菌：金葡，霍乱弧

10、菌，志贺菌，ETEC/EHEC/EAggEC，产气荚膜梭菌，艰难梭菌侵袭性为主的病原菌：沙门菌，志贺菌，EPEC/EIEC，小肠结肠炎菌，副溶血弧菌，结核分枝杆菌，酵母菌：轮状，埃克，Norwalk，腺（二）标本与运送急性期、尽量在用药前1.2.时间方法。自然排便标本不法、直肠拭子。接种时，应在标本中加保护剂或用相应的培养基。（三）分离培养培养基的选择：普通致病菌如沙门菌、志贺菌等可选用 SS 琼脂平板、中国蓝琼脂平板或特殊细菌如弯曲菌、弧菌、厌氧菌等选择相应的选择性培养基。琼脂平板。可用细胞培养。（四）临床意义性腹泻由多种病原体所致。引起。消化性溃疡由幽门螺杆菌轮状常引起幼儿腹泻，腺是引起儿

11、童腹泻的主要病原，还可引起成人腹泻，埃可常引起婴幼儿腹泻，Norwalk常成人和大龄儿童。七、性疾病性疾病（STD）：以性行为为主要途径的-组传染病。（一）常见性疾病及其病原体（二）标本拭子取脓性物（）或宫颈物（女性），供培养及镜检；取皮肤渗出液和淋巴穿刺液涂片；疱疹抽取疱内液体，或刺破小疱后，用无菌拭子采样。性疾病病原体螺旋体菌软下疳杆菌淋巴肉芽肿沙眼衣原体淋巴肉芽肿生物亚种细菌性病菌和类杆菌等厌氧菌非性炎沙眼衣原体沙眼生物亚种、支原体人瘤疱疹人类单纯疱疹2 型八、和外科（一）常见病原菌（二）标本组织用拭子标本；施行清创术时，可选择合适部位标本送检；骨髓炎应取骨髓活检标本，如损害部位已形成窦

12、道，可采取窦道液；脓肿时取脓汁及脓肿壁标本。（三）临床意义由、手术、侵入械操作等外科治疗引起的最为常见。以化脓性炎症改变为主。外伤性以葡萄球菌和链球菌多见。深部易引起破伤风和气性坏疽。烧伤创面以急性化脓性骨关节炎杆菌最常见，次为阳性球菌。金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、链球菌、菌所致。慢性化脓性骨关节炎、慢性骨髓炎结核分枝杆菌引起，葡萄球菌、链球菌也常见。【例题】引起肺部A.金黄色葡萄球菌的病原菌中，能从痰标本检出的有B.C.链球菌菌D.结核分枝杆菌E.支原体答疑502377290101【正确】ABCDE【例题】标本和处理的基本要求包括抗菌药物治疗前标本据病原微生物特点，不同部位标本送检C.无菌操作，标本时需先D.应用无菌容器收集标本，立即送检E.检材容器贴上患者、标本名称等项目的答疑502377290102【正确】ABCDE【例题】性A.脑脊液疾病应的标本是阳性菌菌球菌杆菌其他金葡，CNS，化脓性链球菌，链球菌，肠球菌，消化链球菌炭疽杆菌，结核分枝杆菌，产气荚膜杆菌，非结核分枝杆菌，破伤风梭菌放线菌（衣氏放线菌，诺卡菌）脑膜炎