国家药监局高级研修院 体外诊断试剂培训 04产品技术要求-韩昭昭2

1、体外诊断试剂产品技术要求附录编写2016年4月 北京一、依据医疗器械监督管理条例体外诊断试剂注册管理办法医疗器械产品技术要求编写指导原则三类体外诊断试剂（包含境外、境内）。以附录形式明确主要原材料、生产工艺及半成品要求。产品技术要求作为注册证附件变化，应进行注册变更。二、注册产品标准与产品技术要求（一）注册产品标准（二）产品技术要求三、第三类体外诊断试剂产品技术要求附 录编写要求征求意见稿报批稿根据产品的特性确定其中内容是否适用四、基本要求（一）医疗器械产品技术要求中应采用规范、通用的术语。如涉及特殊的术语，需提供明确定义，并写到“4.术语”部分。四、基本要求（二）附录的内容：主要原材料主要原

2、材料对照品和校准品企业内部参考品辅料包材生产工艺流程图描述性语言半成品无特殊要求与定义其他检验方法四、基本要求（三）主要原材料的通用要求：外购原材料供应商名称（相对固定，不得随意更换）主要原材料的质量控制标准自制原材料制备原理描述制备过程主要原材料的质量控制标准外购原材料 抗原抗原名称生物学来源技术指标抗体抗体名称克隆号生物学来源刺激免疫原技术指标引物探针核酸序列（引物探针的名称-标示）技术指标自制原材料 抗原天然抗原病原体毒株（或菌株）病原体培养抗原提取及纯化鉴定重组抗原有关特定基因选择基因序列（基因座位/位点）基因克隆抗原表达及抗原纯化鉴定对基因克隆的整个过程进行描述。抗体使用天然抗原作为

3、免疫原明确该天然抗原的来源使用重组抗原或其他人工合成抗原作为免疫原明确相关的抗原重组方面的信息生物学源性、免疫原、克隆号及主要技术指标要求引物、探针核酸序列合成、纯化、验证技术指标要求四、基本要求不同方法学产品的具体要求（1）核酸类检测试剂核酸扩增试剂测序试剂PCR-杂交试剂荧光原位杂交试剂等核酸类检测试剂主要材料包括引物、探针、各种酶及脱氧三磷酸核苷（dNTP）。扩增靶序列的描述，包括相应的基因座位/位点（单个或多个）名称、具体序列信息、探针结合位置等信息。主要材料的质量控制 核酸类检测试剂引物相应名称（标识）纯度（SDS，单一条带、HPLC级,无杂峰）紫外光吸收分析（如A260nm/A28

4、0nm的比值在1.8-2.0之间）探针同“引物”+根据标记荧光物质不同，描述相应激发波长下的吸收峰（如以紫外分光光度计对200800nm范围进行扫描，在260nm、494nm、534nm处应有吸收峰，其中内控探针应在260nm及534nm处应有吸收峰。）酶反应液中各种酶的功能（如Taq酶、逆转录酶或UNG酶）功能包括：是否具有内切或外切酶活性（如DNA聚合酶活性，无核酸内切酶活性，具有5-3核酸外切酶活性）、热稳定性要求。（如94C保温1小时后仍保持50%的活性）、性能试验要求（如以阳性对照为模板，进行荧光PCR扩增检验，观察荧光PCR扩增结果，其结果呈S型曲线，Ct值为2025，并且重复2次

5、，检测结果显示Ct值均在2025之间。）四、基本要求（2）免疫类检测试剂 酶联免疫吸附法 化学发光免疫分析法 时间分辨荧光法 胶体金法等 免疫类检测试剂主要原材料包括： 生物活性物质：抗原、抗体、多肽类原料（如BSA）、标记用酶。 固相载体：板、膜、珠子。免疫类检测试剂抗原外观纯度、分子量（用还原性SDS测定，上样量为5g条件下，结果为条带清晰的两条带，分子量约为46kD、22kD，纯度不小于95%）蛋白浓度功能性试验抗体同抗原+效价（ELISA法效价不低于1:10000）多肽类原材料外观纯度浓度分子量蛋白浓度功能性实验标记用酶酶的纯度值（如：辣根过氧化物酶：RZ（OD403nm/ OD280

6、nm）应不低于3.0）功能性实验功能性实验：指生物原料用于试剂盒试剂生产中的情况，一般考察使用该原料的试剂盒的准确性、灵敏度、精密度、特异性的性能。免疫类检测试剂膜液体移行速度孔径厚度如：孔径0.45m，膜体表面光滑，无光斑、无起皱现象、液面移行速度应不低于10mm/min四、基本要求（3）抗体类检测试剂流式细胞仪配套用检测试剂免疫组化血型类试剂等抗体类试剂主要原材料包括 抗体 标记荧光素 荧光素标记的单克隆抗体 酶标第二抗体 其他生物活性物质，如BSA抗体类试剂抗体外观浓度克隆号效价功能性实验等标记荧光素（抗体）外观浓度紫外-可见吸收光谱最大吸收波长、在特定激发波长下进行荧光发射光谱扫描时荧

7、光素的最大发射波长酶标第二抗体外观浓度抗体特异性效价功能性实验等四、基本要求（4）血型及组织配型相关检测试剂血型反定型试剂不规则抗体筛查试剂凝聚胺试剂等 血型及组织配型相关检测试剂主要原材料包括： 红细胞 抗体 其他原材料（凝胶、玻璃珠等）血型及组织配型相关检测试剂红细胞外观特异性抗原性亲和力多特异性直接抗人球蛋白试验溶血指标测定等来源（从采供血机构获得的原料必须符合中华人民共和国国家标准GB18467-2001和GB18469-2001(全血及成分血质量要求）。抗体（抗人球蛋白试剂）外观抗体浓度效价功能性实验等。红细胞特异性红细胞抗原性亲和力直接抗人球蛋白试验四、基本要求（5）检测血清（肠道致病性大肠艾希氏菌诊断血清）、检测菌液主要原材料为：菌种、动物、培养基。来源：菌种应有明确来源和菌种号并验证确认。诊断血清菌种菌种应具有典型的 形态、培养、生化及血清学特性，并具有丰富的目的抗原。动物使用有实验动物等级合格证的动物，且实验动物应符合实验要求。（如：使用有实验动物等级合格证的健康家兔）四、基本要求（6）质控品、校准品及企业内部参考品 选择、处理过程及相关质量标准也应包含在技术要求附录中，对来源、制备、纯化、阴性/阳性确认、质控品的定值、校准品的溯源、生物安全性指标及相关质控标准进行详述。四、基本要求 (四)生产