中学生物实验教学3-7

1、中学生物实验教学综合实验3四川师范大学生命科学学院 张小勇【实验3-7】观察DNA和RNA在细胞中的分布生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【目的原理】染色剂染色颜色 主要存在部位 DNA RNA吡罗红甲基绿红色绿色主要在细胞核，线粒体、叶绿体含少量主要在细胞质生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【实验准备】人的口腔上皮细胞 大烧杯，小烧杯，温度计，滴管，消毒牙签，载玻片，盖玻片，铁架台，石棉网，火柴，酒精灯，吸水纸，显微镜 质量分数为0.9%的NaCl溶液，质量分数为8%的盐酸，吡罗红甲基绿染色剂，蒸馏水生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【安全事项】 用

2、酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【实验方法步骤】 取口腔上皮细胞制片 水解 冲洗涂片 染色 观察（8%HCl，能改变细胞膜的通透性，同时使DNA与蛋白质分离）（蒸馏水）（0.9%的NaCl）生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【方法步骤】 (一)取口腔上皮细胞制片1、在洁净的载玻片上，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液（维持口腔上皮细胞的正常形态）。2、 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下

3、，把牙签上附有碎屑的一端，放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。3、点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。(二)水解1、在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸，将烘干的载玻片放入小烧杯中。2、在大烧杯中加入30温水。3、将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【方法步骤】 1、用低倍显微镜观察：选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，将物象调节清晰。2、换用高倍显微镜观察，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s。(四)染色1、用吸水纸吸去载玻片上的水分。2、将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴在载

4、玻片上，染色5min。3、吸去多余染色剂，盖上盖玻片。(三)冲洗涂片(五)观察生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【方法步骤】 真核细胞的DNA主要分布于细胞核中。线粒体、叶绿体内也含有少量的DNA。RNA主要分布在细胞质中。五、实验结论生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【注意事项】1.材料的选择 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察； 常用的观察材料有人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰，不可使用紫色表皮细胞)2.取材要点 取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； 取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞3.冲洗载

5、玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。 生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【实验改进】实验中是否要用盐酸处理以增大细胞膜通透性应根据所选材料而定。若使用处理, 一定要注意处理时间不宜过长, 以免进人细胞核内对DNA结构造成破坏, 并在处理后及时用NAHCO3溶液中和残留的盐酸, 从而避免残留细胞内的少量HCL改变染色剂发挥作用的pH值。生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇【实验思考】2、“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的实验中，没有用的试剂 A.0.9NaCl B.8的HCl C. 吡罗红、甲基绿染色剂 D.斐林试剂1、将用甲基绿和吡罗红染色的人口腔上皮细胞装片放在显微镜下观察，可以看到 A.细胞核内呈现红色，细胞质内呈现绿色 B.细胞核内呈现绿色，细胞质内呈现红色 C.细胞核和细胞质都呈现绿色 D.细胞核和细胞质都呈现红色生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小