2022年《微生物的实验室培养》教案_第1页
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文档简介

1、微生物的试验室培育一、课题目标明白有关培育基的基础学问,进行无菌技术的操作,进行微生物的培育;二、课题重点与难点课题重点:无菌技术的操作;课题难点:无菌技术的操作;三、课题背景分析课题背景通过生产中的实例,第一引导同学熟识在微生物的培育过程中,保持培育物纯洁的重要性; 老师不必拘泥于教材中列举的实例,可以充分发挥同学的主动性,让同学搜集列举更多的生产生活中的实例,从中体会培育物纯洁对于微生物培育的重要性;在此基础上,教材让同学进一步明确培育微生物的要领,是为所需要的微生物供应良好的生存环境,同时阻挡或抑制其他微生物的生长;四、基础学问分析与教学建议(一)培育基学问要点: 1. 培育基的用途和种

2、类,指出培育基可分为液体和固体两大类;2. 不同的微生物往往需要采纳不同的培育基配方;3. 尽管培育基的配方各不相同,但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐;教学建议:老师在介绍液体和固体培育基时,宜结合教材供应的图片进行讲解,以增进同学的感性熟识;教材以表格的形式供应了一个培育基配方的实例;老师可以采纳资料分析的形式, 让同学通过主动的分析,熟识培育基的基本组成成分,并结合必修模块“ 分子与细胞” 中的学问, 让同学从生物体构成的基本元素这一角度懂得培育基中为什么都需要具备这些基本成分;(二)无菌技术学问要点: 1. 无菌技术的含义;消毒与灭菌的概念及两者的区分;3. 常用的消毒与灭菌的

3、方法,接种环灼烧灭菌的方法;教学建议:老师可以第一结合同学的生活体会,让同学意识到日常的生活环境中,每时每刻每处都存在着微生物,任何一个不经意的动作都可能将某种微生物引入到培育物中,然后再强调无菌操作的重要性;无菌操作泛指在培育微生物的操作中,全部防止杂菌污染的方法; 无论是随后将要学到的倒平板、平板划线操作,仍是平板稀释涂布法,其操作中的每一步都需要做到“ 无菌” ,即防止杂菌污染;地培育微生物;只有娴熟、 规范地进行无菌操作,才可能胜利教材中供应了阅读材料“ 试验室常用的消毒和灭菌方法” ,老师可以让同学通过阅读明白这些常用方法,并回答旁栏中的两道摸索题,依据回答的情形, 检查同学是否真正

4、懂得了上述内容; 在此基础上, 老师再介绍无菌操作的详细内容,的规范操作,以及试验中将要用到的材料与器具;五、试验支配及留意事项让同学进一步熟识培育微生物(一)从菌种保藏中心购买菌种后,老师第一需要用平板划线法纯化培育所得菌种,并依据同学小组的数目,预备好数个平板;(二)第 1 课时完成基础学问的教学,学习各种操作方法,并制备培育基;高压蒸汽灭菌所需要的时间较长,因此需要利用课下时间完成;课下完成后, 再于第 2 课时完成大肠杆菌的纯化培育;此后支配同学连续观看记录 34 d ;(三)配制培育基时,老师需要提示同学依据每个培育基消耗 15 20 mL 的量来估算总用量;全班同学的培育基可以集中

5、起来,分批灭菌;(四)灭菌后,培育基冷却到55 后应准时进行倒平板操作;假如不能准时操作,需要将培育基放到 55 左右的电热箱中保温,以防止琼脂凝固;(五)假如准备做本专题的第2 或第 3 课题,建议此课题不仅要练习平板划线操作,仍要练习稀释涂布平板法操作;为此, 老师需要提前1 天用液体培育基培育大肠杆菌,培育一夜后,于第2 天将培育液分发到各小组;(六)试验后,全部用过的培育基、培育液等都需要统一进行高压蒸汽灭菌后再丢弃,否就将会造成环境污染;六、课题成果评判(一)培育基的制作是否合格假如未接种的培育基在恒温箱中保温 的,否就需要重新制备;(二)接种操作是否符合无菌要求12 d 后无菌落生

6、长,说明培育基的制备是胜利假如培育基上生长的菌落的颜色、外形、大小基本一样,并符合大肠杆菌菌落的特点,就说明接种操作是符合要求的;假如培育基上显现了其他菌落,就说明接种过程中,无菌操作仍未达到要求,需要分析缘由,再次练习;(三)是否进行了准时细致的观看与记录培育 12 h 与 24 h 后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,准时观看记录的同学会发现这一点, 并能观看到其他一些微小的变化;与习惯;七、答案和提示(一)旁栏摸索题这一步的要求主要是培育同学良好的科学态度1. 无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,仍有什么目的?答:无菌技术仍能有效防止操作者自身被微生物感染;2. 请

7、你判定以下材料或用具是否需要消毒或灭菌;假如需要,请挑选合适的方法;(1) 培育细菌用的培育基与培育皿(2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管(3) 试验操作者的双手 答:( 1)、( 2)需要灭菌;(3)需要消毒;(二)倒平板操作的争论1. 培育基灭菌后,需要冷却到 养基的温度?50 左右时,才能用来倒平板;你用什么方法来估量培提示:可以用手触摸盛有培育基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了;2. 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基;3. 平板冷凝后,为什么要将平板倒置?答:平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠,凝固后的培育基表面的湿度也

8、比较高,将平板倒置, 既可以使培育基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染;4. 在倒平板的过程中,假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板仍 能用来培育微生物吗?为什么?答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,因此最好不要用这个平 板培育微生物;(三)平板划线操作的争论 1. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作终止时,仍 然需要灼烧接种环吗?为什么?答:操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培育物;每 次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线终止后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的

9、菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐步削减, 以便得到菌落; 划线终止后灼烧接种环,防止细菌污染环境和感染操作者;能准时杀死接种环上残留的菌种,2. 在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?答:以免接种环温度太高,杀死菌种;3. 在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开头划线?答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开头,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁衍而来的菌落;(四)涂布平板操作的争论涂布平板的全部操作都应在火焰邻近进行;想一想,第 2 步应如何进行无菌操作?结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,提示:应从操作的各个细节保证“ 无菌” ;例如,酒精灯与培育皿的距离要合适、吸 管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰四周;等等;(五)练习1. 提示:可以从微生物生长需要哪些条件的角度来摸索;例如,微生物的生长需要水、空气、 相宜的温度, 食品储存可以通过保持干燥、物的生长;真空的条件,以及冷藏等方法来阻挡微生2. 提示:可以从这三种培育技术的原理、操作步骤等方面分别进行总结归纳;例如,这三种培育技术都需要为培育物供应充分的养分,的条件,而其他两种技术都要求严格的无菌条件

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