AKTAPrimer层析系统在天然产物分离中实验课件

1、AKTA Primer 层析系统的应用技术专业基础实验第1页，共25页。Principles of Operation for Chromatography Techniques现代柱层析技术的原理GelFiltrationIonExchangeHydrophobic InteractionAffinity Reversed Phase基本知识第2页，共25页。层析介质硅胶氧化铝聚酰胺大孔树脂分子筛凝胶离子交换凝胶亲和层析介质反相层析介质基本知识第3页，共25页。AKTA-分离和纯化各类生物分子天然蛋白质重组和融合蛋白质肽类寡核苷酸质粒病毒抗生素生物碱, TCM。等等基本知识第4页，共25页。

2、AKTA Primer 系统组成AKTA Prime + PrimeViewAKTA Primer 第5页，共25页。AKTA Prime 主机组分收集器控制面板系统泵AKTA Primer 第6页，共25页。AKTA Prime 主机AKTA Primer 第7页，共25页。AKTA Prime 流程图AKTA Primer 第8页，共25页。AKTA Prime 流程图第9页，共25页。面板操作按钮及简要操作命令第10页，共25页。面板操作按钮第11页，共25页。面板操作按钮按OK进入子菜单；按ESC退到上级菜单；按上下箭头，可选择菜单命令、调整参数等。第12页，共25页。面板操作按钮分布

3、收集器前进一管停止程序或方法运行梯度运行过程中，按此键，系统将保持当前浓度运行，而流速和分步收集继续，再按一下，继续梯度运行按此键，系统暂停运行，包括泵和收集，再按一下，继续第13页，共25页。操作命令简介主菜单第14页，共25页。预编好的方法模板运行保存的方法手动运行编辑方法将方法拷入电脑或拷回检查系统状态设定系统参数第15页，共25页。子菜单以Manual Run为例：操作命令简介第16页，共25页。单位 ml、min浓度 %B收集单位 ml、min、drop收集数量 （每管）限压 （保护层析柱） MPa缓冲阀位 1-8样品阀位 waste、load、inject开始梯度 （长度ml/目标

4、浓度%B）流速 ml/min第17页，共25页。PrimeView软件系统-数据采集AKTA Primer 第18页，共25页。运行曲线图谱（Curve）：记录系统采集到的全部数据，系统开始运行后，自动开始记录，结束后，自动保存。运行日志（Logbook）：记录系统收到的所有指令第19页，共25页。AKTA Primer 第20页，共25页。PrimeView数据采集选择浏览曲线及设定曲线颜色设定X，Y轴的坐标范围AKTA Primer 第21页，共25页。实验题目蛋白质脱盐实验目的1.了解层系技术的理念，基本操作和应用2.掌握分子筛层析的原理，了解其用途；3.熟悉AKTA Prime 的操作。实验原理实验的基本内容第22页，共25页。实验材料层析介质 葡聚糖凝胶G25分离对象 脱除含1M硫酸铵的小牛血清中的盐实验试剂 0.15M的氯化钠溶液第23页，共25页。实验注意事项设置限压0.3MPa。排尽注射器内的空气，从上样阀注入样品环，注射器放在原位不拔出。第24页，共25页。实验思考题蛋白质分离纯化的方法有哪些？请列举2种以上，并阐述其原理。利用凝胶层析法分离混合样品时，怎样才能得到较好的分离效果？现有含谷氨酸(Glu)、甘氨酸（Gl