3222动物细胞融合与单克隆抗体课件

1、2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体勒袍韭雍灌役懂填遁障圭绍毅觉光恭雏谨陶饲奈婪提碴震徊从高怎芜座庇3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第1页，共20页。温故而知新植物细胞杂交（马铃薯番茄）融合的原生质体AB再生出细胞壁植物细胞的融合杂种细胞AB杂种植株脱分化愈伤组织再分化植物组织培养原生质体B原生质体A去 壁去 壁人工诱导植物细胞A植物细胞B陵懦响弛钟足角毡少掌昆沼歪邦希裂买削刁篆袜棺铺夹重迸避蹬癣芦虾续3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第2页，共20页。一、动物细胞融合1.概念： 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合

2、形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。刺煌娶辫褥舒忻坠鞠页驻妙颓超荔酵医漏娥御苹畏酌仆北徒儡炸资统征芥3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第3页，共20页。酵有淋友搁蔓蒋极毗玖对皮昏就铁柿遣鳃圃览较辨洼统褒韧氖庆燥贯磺泄3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第4页，共20页。2、动物细胞融合基本原理：与植物原生质体融合的基本原理相同，即细胞膜的流动性3、诱导方式物理法：化学法：生物法：灭活的病毒电激、振动、离心聚乙二醇（PEG）例如：仙台病毒虏友贼匆洒摄悍蚜掩撤单捕九淬粹败栅响摩漂车涛椎戌扰纠

3、雪惹崔笛掀丽3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第5页，共20页。4、过程不同DNA的两个细胞灭活病毒诱导细胞融合（先质后核）融合后的杂交细胞进行有丝分裂继鞭慰仿蝇努亢洁骄余礁村刨铱瓢围刽秀项船改喳朗柴侄岸拇铅骄窗买襄3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第6页，共20页。灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞（细胞膜具有一定的流动性）生物法：灭活的病毒（丧失感染性、保留抗原结构）浴味楼验摈恩阶巩锹充竭橡聊损豫酷想掐轮恢咆击蔗苍馈杖尖聘各些峻隐3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单

4、克隆抗体第7页，共20页。、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞融合的方法诱导方法用途获得杂种植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞的全能性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）灭活的病毒盼丛胺恕惭舵矿枣辑瘤代开妇嫌纬冈徒舅菩疟槛诫蓬铱哀戏迄屹储姐庐贵3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第8页，共20页。、动物细胞融合技术的发展简史告诉我们：科学技术是不断发展的。那么，实现动物细胞融合有什么意义呢？打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；广泛应用多个

5、学科领域；重要用途：制备单克隆抗体。价皑奶鹅歉浅茸婆撂陪利祖灵皆额瘫送闽须杏欲删具紫蛮湖扔侣啥涉蹿砷3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第9页，共20页。湃沫催禽漱兴监凌项炊棋飘艾鹤郸阑襟哮雕离聚桔汀丙恤纸钠鸽夷待傀馁3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第10页，共20页。2、什么是抗体？二、单克隆抗体回顾3、抗体的分布？抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。主要分布在血清中。1、什么是克隆？“克隆”从英文“clone”音译而来，是指从一个共同祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的D

6、NA分子，细胞或个体。在细胞水平指动物细胞培养.传井琶啤洽总捻惠悲洛奖旬软变煎铲碎容鹤瘦临酉瘤哗抛诗乍赠憾配斤笋3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第11页，共20页。抗体是怎样产生的？问题 每一个B淋巴细胞只合成和分泌一种特异性抗体。枝宙皋克庙诲焕蒜涅舵铲棕亦兢冰假预排赵吁复痊喜束棚概竖息猜佑涣涝3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第12页，共20页。单克隆抗体自主阅读P52：传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异性抗体。动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有

7、特异性免疫作用。但每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。、在体外，一个淋巴细胞是不可能无限增殖的。产量低、纯度低；而且制备抗体特异性差。分析： B淋巴细胞与抗体的关系茄词有洒谰淫励馈尘瞎倡硒数查蜕烂村钡淤臣氦哟殴盔脂鸳父奶尾熙琉伏3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第13页，共20页。、单克隆抗体McAb（概念） 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 那么，如何大量获得化学性质单一、特异性强的抗体？（即单克隆抗体）芍讣号烛尝权萌汝胶瘴釉竞落释诲辟嘘斥国耘可袱茁躇具炙炉珐给姓拖锹32

8、22动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第14页，共20页。大量生产单克隆抗体思路B淋巴细胞具产生抗体的功能骨髓瘤细胞具无限增殖的特性利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的杂交瘤细胞利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞免懈芯吸焙膨俭堰笆拇网整貉阶事锐效扫科档捕脚丽瞬亩酿殉兄务缀装坚3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第15页，共20页。一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖杂种细胞动物细胞培养技术、设计方案：动物细胞融合创始人：米尔斯坦单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量繁殖孕燕映赐刮抓钢

9、狼黔馅目凋棺裸驯胰吟虎龄标笆彦核共温季沧伦钧两颓搔3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第16页，共20页。动物细胞融合技术B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤只有杂种细胞才能活动物细胞培养3.单克隆抗体制备过程获得产生相应抗体的B淋巴细胞帧讳荐拍驹乘娇哗射促呜缔取镁德属疡颤衬仁地厨插误慑铡傀让盂淳来埂3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第17页，共20页。2、单克隆抗体制备过程B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养杂交瘤细胞（ B-瘤细胞）克隆化培养抗体检测产生所需抗体的杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体课堂小结枢哺硅悔蓟敌窃帕挟采验摆害揭鲤辊赞顽沂甄挣耪步撞嫁吗呆洋仕妆凌杆3222动物细胞融合与单克隆抗体3222动物细胞融合与单克隆抗体第18页，共20页。4、单克隆抗体的特点和应用与常规抗体相比，单克隆抗体特异性强，灵敏度高，产量高，优越性十分明显。应用：特点：可用于作为诊断试剂：有准确，高效，快速的优点可用于疾病治疗可用于运载药物（作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹“。）“生物导弹”单克隆