兽医微生物学资料(共40页)

1、PAGE PAGE 65兽医(shuy)微生物资料绪言(x yn)一、微生物与微生物学(wi shn w xu)1、微生物（Microorganism）是一类肉眼看不见，有一定形态结构，能在适宜环境中生长繁殖的细小生物。包括八大类：细菌、真菌(包括霉菌和酵母菌)、放线菌、螺旋体、霉形体、立克次体、衣原体和病毒等。微生物的种类：具有细胞结构的微生物（原核微生物，如细菌和放线菌；真核微生物，如真菌、显微藻类和原生动物）、没有细胞结构的微生物，病毒。2、微生物学研究微生物生命活动的科学称为微生物学。包括研究其形态结构、生理生化、遗传变异、生态等方面。微生物是一把双刃剑，有利有害 （1）有利面：在食品

2、、医药制品、环境治理等方面起着重要作用。（2）有害面：是人和其他各种生物传染疾病的罪魁祸首。 二、微生物学发展简史微生物学的发展可分为三个阶段第一阶段 微生物形态学时期（1683-1870） 1683年荷兰人吕文虎克(Antony van Leeuwenhoek)发明了放大200倍的显微镜，并首次观察到微生物的细微形态。第二阶段 微生物生理学及免疫学奠基时期（1870-1920） 这个时期主要有两个代表性人物：巴斯德和科赫巴斯德的功绩：彻底否定了自然发生说、证实发酵由微生物引起、免疫学预防接种、发明巴氏消毒法科赫的功绩：1、发明了固体培养基并用其纯化微生物等一系列研究方法的创立2、证实炭疽病因

3、 炭疽杆菌3、发现结核杆菌、霍乱弧菌4、提出柯赫氏法则(Koch postulates)柯赫法则：是确定某种微生物是否具有致病性的主要依据。第一 特殊的病原菌应在同一疾病中可查见，在健康者不存在；第二 此病原菌能被分离培养而得到纯培养物；第三 此纯培养物接种易感动物，能导致同样病症；第四 自感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。该法则也适用于其他病原微生物，如病毒等。 (Edward Jenner,17491823)首创用牛痘预防天花，为预防医学开辟了广阔途径。(Joseph Lister,18271912)首创用石炭酸喷洒手术室和煮沸手术用具以防术后感染，为防腐、消毒，以及无菌操作奠定了

4、基础。第三阶段：近代及现代微生物学时期（1920年起）特别是近半个世纪以来，微生物学在理论(lln)研究、技术创新及实际应用方面都取得了重要进展。1928年，英国科学家弗雷明发现，青霉菌落周围出现抑制(yzh)萄葡球菌生长的现象三、微生物学理论成就(chngji)及应用1.微生物遗传理论的研究 ：揭示了遗传物质基础是DNA或RNA。2.组织移植、免疫耐受的研究：可以识别抗原、控制抗原抗体反应，使人类器官移植得以成功。3.抗微生物药物的研究：化学治疗药剂和抗生素的研究。4.免疫球蛋白的研究 ：免疫球蛋白(包括单克隆抗体)在疾病诊断及防治方面广泛应用。四、 微生物的特点体积小，面积大；吸收多，转化

5、快；适应强，易变异；分布广，种类多；生长旺，繁殖快五、兽医微生物学任务与作用1.任务与作用兽医微生物学是以微生物学一般理论和技术为基础，研究病原微生物与动物疾病的关系，诊断和防止动物疾病，保障动物健康和人类食品安全的一门基础学科。2.研究领域 包括家畜、家禽、家庭动物、实验动物、水生动物、野生动物等的微生物。内容涉及微生物学基础、动物免疫、动物微生态、动物病原微生物等。第一章 细菌(xjn)的形态与结构1.细菌(xjn)(bacterium)是属原核(yun h)生物界的一种单细胞微生物。观察细菌常用光学显微镜，以微米(m)为测量单位。细菌按其外形，主要有：球菌、杆菌和螺旋菌球菌：双球菌、链球

6、菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌杆菌：不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致（大、中、小）；杆菌的形态多样（两端齐平，两端尖细、分枝杆菌、双歧杆菌）；螺旋菌：弧菌、螺菌、螺杆菌其它形态：柄杆菌（prosthecate bacteria）细胞上有柄（stalk）、菌丝（hyphae）、附器（appendages）等细胞质伸出物，细胞呈杆状或梭状，并有特征性的细柄 。衰老型和多形性 在正常情况下，细菌的个体形状和排列是规则和一致的，在老龄培养物中，会出现和正常形状不一样的个体，这就是衰老型和退化性。当这些衰老型的培养物，重新处于正常的培养环境中，可恢复正常形状（慢性猪丹毒杆菌）。但有些细菌，即使在正常

7、环境中生长，起形状也很不一致，这种现象称多形性（溶血巴氏杆菌,支原体,L型细菌）。 第二节 细菌的结构细菌的基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质细菌的特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢基本结构一、细胞壁革兰染色法：结晶紫1min；碘液1min；95%乙醇脱色；复红（沙黄）革兰阳性菌染成紫色；革兰阴性菌染成红色。两类细菌细胞壁的共同组分为肽聚糖，但各有其特殊组分。细胞壁的功能(gngnng)：维持(wich)菌体固有的形态；保护细菌(xjn)抵抗低渗环境；参与菌体内外的物质交换；菌体表面带有多种抗原分子；可诱发机体的免疫应答。细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）细菌细胞壁缺陷型或L型(bacterial

8、 L form)：细胞壁受损后仍能生长和分裂的细菌。革兰阳性菌细胞壁缺失后，原生质仅被一层细胞膜包住原生质体(protoplast)。革兰阴性菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护原生质球(spheroplast)。某些L型仍有一定的致病力，通常引起慢性感染。细菌L型的形态和染色性：细菌L型呈高度多形性，大小不一，着色不匀，无论其原为革兰阳性或阴性菌，形成L型大多染成革兰阴性。细菌L型的菌落形态：细菌L型在高渗的含血清的培养基上生长后形成三种类型菌落。二、细胞膜由磷脂和多种蛋白质组成。主要有物质转运、生物合成、分泌和呼吸等作用。细菌细胞膜可形成一种特有的结构，称为间体。间体：是部分细胞膜内陷、折叠形成的

9、囊状物，多见于革兰阳性菌。三、细胞质核糖体（ribosome）；质粒（plasmid）；含有多种颗粒，大多为贮藏的营养物质。四、核质核质由单一密闭环状DNA分子反复回旋卷曲盘绕组成松散网状结构。特殊结构荚膜：某些细菌在其细胞壁外包绕一层黏液性物质，为疏水性多糖或蛋白质的多聚体。鞭毛(binmo)：许多细菌(xjn)在菌体上附有细长并呈波状弯曲的丝状物，称为鞭毛，是细菌的运动器官。（单鞭毛(binmo)、丛鞭毛、双鞭毛、周毛菌），功能是运动器官，有抗原性。菌毛：菌毛蛋白具有抗原性；菌毛可分为普通菌毛和性菌毛两类。芽孢：某些细菌在一定的环境条件下，能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠

10、形式芽胞的形成与发芽一个细菌只形成一个芽胞，一个芽胞发芽也只生成一个菌体，因而芽胞不是细菌的繁殖方式。与芽胞相比，未形成芽胞而具有繁殖能力的菌体可称为繁殖体(vegetative form)。芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异，有重要的鉴别意义。芽胞的功能：抵御外界一切不良环境条件。第三节 细菌形态与结构检查法显微镜放大法细菌形体微小，肉眼不能直接看到，必须借助显微镜（普通光学显微镜、电子显微镜）放大后才能观察。染色法细菌体小半透明，经染色后才能观察较清楚。普通光学显微镜：普通光学显微镜的分辨率为0.25um。一般细菌都大于0.25um，故可用普通光学显微镜观察。电子显微镜：电子显微镜的分辨率

11、为1nm。不仅能看清细菌的外，内部超微结构可一览无余。染色法革兰染色法：结晶紫1min；碘液1min；95%乙醇脱色；复红（沙黄）抗酸染色：石碳酸复红5min；脱色3%盐酸酒精；美兰（结核杆菌）第二章 细菌的生长(shngzhng)繁殖和生态第一节 细菌细胞(xbo)的代谢过程一、细菌的化学(huxu)组成 （一）水分 （二）矿物质（三）有机物1蛋白质和含氮化合物 2核酸：DNA和RNA)3糖类：主要以多糖的形式存在，并与脂类、蛋白质等形成复合物。4脂类：主要存在于细胞壁。二、细菌细胞内外物质交换的方式单纯扩散、促进扩散、主动输送、基团转位三、细菌(xjn)的代谢（一）能量代谢呼吸(hx)：以

12、无机物为受氢体，包括: 需氧呼吸(hx)（分子氧）厌氧呼吸（氧以外的其它无机物）发酵：以有机物为受氢体（二）物质代谢1合成性代谢产物热源(原)质(pyrogen)：注入人体或动物体能引起发热反应，耐高压灭菌。毒素：外毒素（蛋白质）、内毒素（脂多糖）抗生素：由某些微生物在代谢过程中产生的一类抗菌物质，能抑制或杀死某些病原微生物和肿瘤细胞。细菌素（蛋白质）：仅对与产生菌有近缘关系的细菌有杀伤作用。2.分解性代谢产物依此设计特定的生化反应，对细菌进行鉴定。 第二节 细菌的生长繁殖一、细菌个体的生长繁殖 细菌繁殖的方式：二等分分裂法、代时（多数为2030 min） 二、细菌群体的生长繁殖细菌的生长曲线

13、观察细菌形态和G染色反应(fnyng)以对数期至稳定期中期的细菌为标准。1.延滞(yn zh)期特点生长(shngzhng)速率常数等于零；菌体粗大；含量增加；代谢活力强；对不良条件抵抗能力降低缩短延滞期的意义和方法可以缩短生产周期，提高设备利用率；接种对数生长期的菌种，采用最适菌龄；加大接种量；用于培养菌种相同组成分的培养基。2、指数期(对数期)特点活菌数呈对数增加 酶系活跃，代谢旺盛 生长速率最大，generation time最短 细胞的化学组成及形态，生理特性比较一致3、稳定期特点活菌数保持相对稳定，总菌数达最高水平。细菌代谢物积累达到最高峰。芽胞杆菌这时开始形成芽胞。这是生产收获时期

14、。4、衰亡期特点细菌死亡数大于增殖数,活菌数明显减少,群体衰落。细胞出现多形态,大小不等的 畸形,变成衰退型。细胞死亡,出现自溶现象。第三节 细菌的人工培养 人工培养细菌，除需要提供充足的营养物质外，尚需要有合适的酸碱度、适宜的温度及必要的气体环境 。一、细菌生长繁殖的条件1营养条件：水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等2温度： 低温型(嗜冷菌)、中温型(嗜温菌)和高温型(嗜热菌)3pH：细菌：7.2-7.6；霉菌：3.0-6.0。4渗透压5气体(qt)：O2，CO2二、培养基1. 按状态的差异(chy)，可将培养基分为三类：液体(yt)培养基、固体培养基（1%2%琼脂）半固体培养基（0.5%琼

15、脂）培养基的用途液体培养基：增菌；固体培养基：纯化，增菌，保种；半固体培养基：动力检测，保种2.按功能的差异，可将培养基分为三类：鉴别培养基：在培养基中加入特定作用底物及指示剂，即可凭肉眼根据颜色识别。选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，对不同细菌分别产生抑制或促进作用，从而可从混杂多种细菌的样本中分离出所需细菌。如麦康凯培养基厌氧培养基：在培养基中加入配制培养基的原则（1）适合微生物的营养特点（2）按微生物需要量调好营养配比 （3）控制微生物的培养条件：A、 pH值，B、调节氧和CO2的浓度，C、调节培养基的渗透压第四节 细菌的生态微生物在自然界的分布微生物生态学是研究微生物群（微生物区

16、系或正常菌群）与其周围的生物和非生物环境条件相互作用的科学。微生物种类很多，适应能力强，在自然界中广泛分布，大部分对动物和人类生产生活无害或有益，一小部分是危害人类和动植物的病原微生物。土壤中的微生物（一）土壤环境适合微生物的生长1 土壤中有各种有机物和无机物；2 温度恒定，昼夜温差和季节温差不大；3 经常保持一定的湿度；4 酸碱适中(pH大多5.5-8.5之间)，缓冲性强；5 空隙中充满着空气和水分，渗透压适中。是微生物在自然界最大的贮藏所。（二）土壤中微生物的分布土壤中微生物的分布受地理区域、环境条件和土壤深浅等因素的影响，一般：1. 肥沃泥土中微生物多；每克肥土中通常含有几亿至几十亿个微

17、生物，贫瘠土壤每克也有几百万至几千万个微生物。2. 表层和深层含菌量较少，在距离地面10-20cm的土层中含菌量最多，在4-5m的深土层中几乎呈无菌状态；3. 随季节的变化微生物的数量也有所改变。不同微生物在土壤中生存的时间土壤(trng)的细菌学检查 主要(zhyo)测定菌落总数、大肠菌值和产气荚膜梭菌值3项指标。大肠菌值(产气荚膜梭菌值)是指能检出大肠杆菌(产气荚膜梭菌)的最小土壤量(g)。水中的微生物水环境：地球的70%左右由水覆盖，其中溶解和悬浮有机物和无机物，流动(lidng)水有氧渗入可供微生物生长，是微生物栖息的第二天然场所。(一) 水体中微生物的来源土壤、空气、动植物尸体、人和

18、动物的排泻物、工业及生活污水。(二) 种类水中存在的微生物90%为革兰氏阴性菌，主要有弧菌、假单胞菌、黄杆菌等。(三) 水体中的病原微生物通过水体传播的病原微生物主要有沙门氏菌属、志贺氏菌属、霍乱弧菌等。淡水微生物淡水的pH值多数为6.5-8.5，因而适于多数水生微生物的生长。大多来源于土壤、空气、污水等。一般:1. 有机物含量多，温度适中的地方微生物多；深层水中厌氧微生物较多，而表层水中好氧微生物较多；2. 远离人群的水体中，微生物少，且以自养型为主；在人口密集的区的湖泊和河流内，微生物多，且多是腐生型细菌和原生动物。在饮用水的微生物学检测中，由于水体中病原菌较少，所以通常采用大肠菌群的数量

19、作为指标，判断水源被污染程度。大肠菌群：该菌群主要来源于人、畜粪便，大肠菌群数愈多，表示粪便污染的情况愈严重，也间接表明可能有肠道致病菌污染，故以此作为水污染程度的指标。水中大肠菌群系以及100ml检样内大肠菌群最近似数（MPN）表示。某些微生物在水中的生存时间水质细菌学检查(jinch)三项指标空气(kngq)中的微生物1空气是传播微生物的重要(zhngyo)介质空气本身缺乏微生物生活所必需的营养物，日光对微生物也具有很强的杀菌作用，另外空气一般是干燥的，因此空气不是微生物生活的良好环境，所以无固定种类。2空气中微生物的种类和数量来源：带有微生物菌体及孢子的灰尘（腐生）。人和动物（呼吸道排出

20、的，其中也包含有病原微生物）分布：随环境条件及微生物的抵抗力不同而不同。空气中存在较多的、存活时间较长的是各种真菌、放线菌的孢子及细菌芽胞。空气中微生物的数目决定于尘埃的总量。不同地区空气(kngq)中的细菌总数微生物种群间的相互(xingh)关系可分为(fn wi)互生、共生、拮抗和寄生。互生(synergism)：两种或多种微生物共同生存时，可互相受益。共生(symbiosis):两种或多种微生物共同生活在一起，彼此间互不伤害或互为有利的关系。拮抗(antagonism):两种或两种以上微生物共同生长时，使双方或一方受害的现象。双方受害叫竞争，一方受害叫偏生寄生(parasitism):是

21、一种小型生物生活在另一种较大型生物的体内或体表，从中获取营养生长繁殖并使后者蒙受伤害甚至被杀死的现象。细胞内寄生和细胞外寄生动物的正常菌群一 概念正常菌群(normal microbiota在正常动物的体表或体内腔道经常有一层微生物或微生物层存在，它们对宿主不但无害，而且是有益的和必需的。二 分布1、呼吸道菌群：以鼻腔细菌最多。2、消化道菌群：口腔细菌较多，有葡萄球菌、链球菌、乳杆菌、棒状杆菌、螺旋体等；食道和胃内细菌极少。正常菌群与其宿主的相互关系营养、免疫、生物拮抗益生菌：平衡，能抑制对宿主有害微生物的生长，这些微生物制剂称之为益生菌。某些细菌或真菌有利于宿主胃肠道微生物区系的益生元：饲料

22、或食品中的某些寡糖不被宿主消化吸收，但能选择性地刺激宿主消化道有益微生物或饲喂的益生菌的生长，对宿主产生有益作用，此类成分称为益生元。菌群失调与菌群失调症菌群失调正常情况下，正常菌群与宿主(szh)、环境间处于协调，维持着一定的生态平衡，对动物是有利的。如果宿主患病、外科手术、环境改变和滥用抗菌药物等，宿主机体某个部位的正常菌群中微生物种类、数量和栖居处将会发生改变，即称为菌群失调。菌群失调症由于肠道正常菌群的生态平衡受到破坏而引起的病理(bngl)过程称为。在应用(yngyng)抗菌药物治疗疾病的过程中，要注意防止菌群失调症的发生。实验动物分类无菌动物、悉生动物、无特定病原体动物、清洁动物、

23、普通动物无菌动物 (germ free animal, GF)：指不携带任何微生物的动物，即无外源菌动物。无特定病原体动物(specific pathogen-free animals, SPF)：指不存在某些特定的具有病原性或潜在病原性微生物的动物。第三章 消毒、灭菌与兽医(shuy)微生物实验室的生物(shngw)安全基本概念杀菌作用：指某些物质或因素所具有(jyu)的在一定条件下杀死微生物的作用。抑菌作用：某些物质或因素具有抑制微生物生长与繁殖的作用。抗菌作用：某些药物具有的抑制或杀灭微生物的作用。灭菌：应用物理或化学方法杀灭物体中所有的病原微生物、非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。

24、消毒：应用物理或化学方法杀灭物体中的病原微生物的方法，称为消毒。防腐：应用各种化学药品或物理方法防止或抑制微生物生长繁殖的方法。无菌法：采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其他物体的方法。无菌操作：以无菌法进行的操作。滤过除菌：通过机械阻留作用将液体或空气的细菌等微生物除去的方法。 病毒、支原体以及细菌L型 ！第一节 物理消毒灭菌法影响细菌的物理因素有：温度、辐射、干燥、渗透压、滤过等。一、温度对细菌的影响按细菌对温度的适应可分为：嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌按温度对细菌的影响有：最适温度、最高温度、最低温度1. 低温对细菌的影响大多数微生物对低温具有很强的抵抗力。环境温度最低生长温度：代谢活动降

25、低，最后生长繁殖停滞，存活较长时间。一般细菌菌种在5-10低温下保存。但也有些细菌对低温持别敏感，在冰箱内保存比在室温下保存死亡更快。冷冻保存细菌：迅速降低温度2. 高温对细菌的影响高温对细菌有明显的致死作用，是最常用的有效的灭菌方法。干热灭菌法(火焰灭菌和热空气灭菌）火焰灭菌法 主要用于接种针、接种环、试管口等的灭菌。热空气灭菌法用加热空气使灭菌物品温度升高到160并维持12小时来进行灭菌的方法。 主要用于干燥的玻璃器皿、金属器械等的灭菌。湿热灭菌法1. 煮沸灭菌10-20min杀死所有细菌繁殖体；加入1-2%碳酸钠或2-5%石炭酸，灭菌的效果更好。2.巴氏消毒法：用于葡萄酒、啤酒及牛乳等的

26、消毒低温维持巴氏消毒法： 63-65 ，30min，然后迅速冷却至10以下。高温瞬时巴氏消毒法： 71-72，15s，然后迅速冷却至10以下。超高温巴氏消毒(xio d)法：使鲜牛奶通过(tnggu)温度不低于132的管道1-2s，然后迅速(xn s)冷却至10以下。3.流通蒸汽消毒法：100的蒸汽维持30min (不能杀死芽胞和霉菌孢子）4.流通蒸汽灭菌法（间歇灭菌法）：利用反复多次的流通蒸汽间歇加热以达到杀灭所有微生物的方法。5.高压蒸汽灭菌法：在一个加有少量水的密闭金属容器内，通过加热来加大蒸汽压力，以提高温度，达到在短时间内完全灭菌的效果。高压蒸汽灭菌时压力与温度的关系10磅(磅/平方

27、英寸），115 ；15磅，121 ；20磅，126 一定要排除冷空气高压蒸汽灭菌的适用范围适用于培养基、生理盐水等。糖类溶液或含糖的培养基可用10磅1520min灭菌，若压力、温度过高则可使培养基颜色变深。血清、酶、氨基酸等过滤二、辐射对细菌的影响1.日光对细菌的影响杀菌作用：日光杀菌作用的主要因素是紫外线，紫外线波长为13604000A，而以25002650A杀菌力最强。紫外线的穿透力不强。 2.电离辐射：x射线，射线和射线 应用：塑料制品的消毒；食品、饲料的消毒。3.红外线1-10um波长的电磁波的热效应最强。红外线烤箱灭菌， 类似于热空气灭菌。应用：医疗器械的灭菌。4.微波1mm-1m波

28、长的超高频电磁波，可穿透玻璃、塑料薄膜等，但不能穿透金属表面。三、干燥对细菌的影响缺水细菌的新陈代谢发生障碍死亡。不同种类细菌对干燥的抵抗力差异很大淋球菌: 干燥的环境中仅能存活几小时巴氏杆菌、鼻疽杆菌、嗜血杆菌: 几天结核杆菌: 几周至三个月炭疽杆菌: 几年甚至几十年四、渗透压对细菌的影响盐腌、糖渍造成细菌的生理干燥导致质壁分离而达到抑菌的目的。第二节 化学消毒灭菌法一、消毒剂和防腐剂的概念消毒剂(disinfectant)：用于杀灭病原微生物的化学药物。防腐剂(antiseptic)/抑菌剂(bacteriostat)：用于抑制细菌生长繁殖的化学药物。化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微生物

29、或其他寄生虫的化学药物。二 、消毒剂的应用消毒剂主要用于体表、器械、排泄物和周围环境的消毒。最理想的消毒剂应是杀菌力强、价格低、无腐蚀、能长期(chngq)保存、对动物无毒性或毒性较小的化学药物。三、影响消毒剂作用(zuyng)的因素消毒剂的性质、浓度和作用(zuyng)时间各种消毒剂的理化性质不同，对微生物的作用大小也有差异。 一般浓度高，杀菌作用强。浓度一定，作用时间越长，杀菌效果越好。（2）微生物的种类与数量同一消毒剂对不同种类和处于不同生长期的微生物的杀菌效果不同。 微生物的数量越多，消毒时间就越长。（3）温度 一般温度升高，可增强杀菌效果。（4）pH值（5）有机物:蛋白质能和许多消毒

30、剂结合，严重降低消毒剂的效果。（6)药物的相互拮抗:由于理化性质不同，两种药物合用时，可能产生相互拮抗，使药效降低。 第三节 抗生素和细菌素的杀菌作用一、 抗生素（antibiotics）某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀灭另一些微生物的物质。主要来源于放线菌，少数来源于某些霉菌和细菌，有些也能用化学方法合成或半合成。二、 细菌素（bacteriocin）是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质，只能作用于与它同种不同菌株的细菌以及与它亲缘关系相近的细菌。三、 植物杀菌素（phytocidin）存在于某些植物中的杀菌物质。如黄连、黄苓、黄柏、大蒜、板蓝根等都含有杀菌物质。第四节 兽医微

31、生物实验室的生物安全一、概念生物安全一般指由现代生物技术开发和应用所造成的对生态环境和人体健康产生的潜在威胁，及对其所采取的一系列有效预防和控制措施。实验室的生物安全目的：防止病原微生物等及其他有害生物物质传入实验室(biosecurity)防止病原微生物等传出实验室(biosafety)实验室人员的自身安全防护二、兽医微生物实验室的安全要点（P46）所有送检材料都应视为有传染性并做相应处理。实验人员应具备防范生物危害的知识。三、兽医微生物实验室的生物安全分级（P1-4 ）根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将生物安全的防护水平 (biosafety level,BSL)分为四级(

32、1-4级)四、动物病原微生物的分类我国的动物病原微生物的分类：1-4类1类危害最大，4类危害最小。1类（10）：口蹄疫V，高致病性禽流感V,猪水泡病V，非洲猪瘟(zh wn)V，非洲马瘟V，牛瘟V，小反刍兽瘟V，牛传染性胸膜肺炎丝状支原体，牛海绵状脑病病原，痒病病原2类（8）：猪瘟(zh wn)V， 鸡新城疫V，狂犬病V，绵羊痘、山羊痘V，兰舌病V，兔出血症V，炭疽芽胞杆菌，布氏杆菌第七章 革兰阳性(yngxng)球菌葡萄球菌属：金黄色葡萄球菌链球菌属：无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌、猪链球菌葡萄菌属个体为球状，群体排列为葡萄串状的细菌分布：空气、饲料、饮水、地面和物体表面，人和动物的皮肤

33、、黏膜、消化呼吸道和乳腺。形态与染色特性球状，直径为0.5-1.5m革兰阳性（衰老死亡或被细胞吞噬后可转为革兰阴性）无鞭毛、无芽孢，一般无荚膜固体培养基呈葡萄串状；浓汁或液体培养基呈双球状或短链状。分类根据细胞组成、血浆凝固酶、毒素产生以及噬菌体敏感性的不同在1968年分为20多种常见的动物致病菌：金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌厌氧亚种、中间葡萄球菌和猪葡萄球菌。3.培养特性（以金黄色葡萄球菌为例）营养要求不高，普通培养基上生长良好；需氧或兼性厌氧；致病菌株最适生长温度37，最适pH7.2-7.6普通琼脂：24h-48h，光滑、湿润、边缘整齐、不透明的圆形隆起菌落，直径1-2mm，有时达到3-

34、4mm。有氧环境：可产生色素；无氧环境：不产生色素。血琼脂平板上形成较大的菌落多数致病菌株溶血4.生化特性：致病菌株，DNA酶阳性，血浆凝固酶阳性，分解甘露醇。5.抵抗力：较强，在尘埃、干燥浓汁和血液中存活几个月，70 1h，80 30min不能有效的杀死。对石炭酸、升汞、70-75%酒精等消毒药很敏感。6.致病性：取决于其产生的毒素和酶的能力。（肠毒素、毒素休克综合征毒素1、透明质酸酶、血浆凝固酶、溶血素和杀白细胞素等多种毒素和酶。）超级细菌：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 Methicillin-resistant Staphylococcus aureusMRSA7.微生物学诊断（1）病料采集

35、：不同病型采取不同检材，如浓汁、血液、可疑食物(shw)、呕吐物以及粪便。（2）直接涂片染色(rns)镜检：涂片，革兰氏染色，镜检。根据细菌形态，排列和染色性可做出初步诊断。（3）分离培养与鉴定(jindng)：将病料接种于血琼脂平板和却蒲曼琼脂平板在37 恒温箱中培养24h，观察可疑菌落的形态，溶血和色素，将可疑菌落涂片染色镜检，然后进行毒力和致病性鉴定（血浆凝固试验、分解甘露醇试验、耐热核酸酶试验。动物试验（家兔）（4）食物中毒的呕吐物或剩余食物：将经涂片染色镜检的可疑菌落接种到普通肉汤中，上清100 24h 进行肠毒素检测（幼猫）8.防治措施（1）注意卫生，皮肤创伤及时清理，消毒处理（2

36、）发病后选择敏感性药物进行治疗，（抗菌素药敏试验、防止耐药性产生）（3）加强饲养管理，定期消毒圈舍。（4）防止医源性感染二、链球菌属该属细菌为长短不一、链状排列的球形或卵球形、革兰阳性菌，共有30余种，常见的有10余种。形态和染色特性革兰阳性菌（老龄培养物或被吞噬后可为革兰阴性菌）球形或卵圆形，直径0.5-1m，链状排列。无芽孢、无鞭毛（D群一些菌株除外）A、B、C、D群中，多数菌株在血清培养基上的幼龄培养菌或病料中的菌体常见荚膜。链球菌分类核蛋白抗原（P抗原）：无特异性，各种链球菌均相同，并与葡萄球菌有交叉多糖抗原（C抗原）：群特异性抗原蛋白质抗原（表面抗原）：型特异性抗原；是细胞壁中的蛋白

37、质抗原，位于C抗原外层。根据链球菌细胞壁中多糖抗原的不同，将链球菌分成20个血清群。常见的为A-G，动物病原菌以B、C群较多；人多为A群按溶血能力分类：根据链球菌在血琼脂平板上的溶血现象分为、3种型溶血链球菌：在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环，红细胞未溶解，血红蛋白变成绿色。这类细菌统称为草绿色链球菌，致病力不强，多为机会致病菌。型溶血链球菌：菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。这类菌致病力强，常引起人及动物各种疾病。型溶血链球菌：菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。培养特性需氧或兼性厌氧，个别厌氧；最适生长温度37，最适PH7.4-7.6；营养要求较高，普通培养基生长不良，需加有

38、血液或血清、葡萄糖等。血琼脂：细小露滴状、灰白色、圆而微凸、表面光滑。边缘整齐的菌落。血清(xuqng)肉汤：有黏稠或絮状成点，上液清朗。致病性致病因子(ynz)有：毒素(d s)溶血素：溶解细胞；红斑毒素：致热，致血斑、细胞毒性和致死性休克；内毒素：为肽聚糖多糖复合物，致热、炎症反应、致皮肤坏死、溶解红细胞和血小板。酶透明质酸酶、链道酶、链激酶：扩散感染；DNA酶：分解DNA菌体本身的一些成分菌毛：黏附定居；荚膜：抗吞噬；M蛋白：位于细胞壁，黏附和抗吞噬感染谱较广猪牛羊马犬猫鸡及实验动物和野生动物的化脓性炎症、败血症和脓毒血症等。人类感染链球菌，可引起猩红热、丹毒、风湿热等。猪链球菌猪链球菌

39、病的病原至少有三种：马链球菌兽疫亚种、猪链球菌2型、猪链球菌1型马链球菌兽疫亚种：又叫兽疫链球菌C群，溶血；对各种动物有致病性，致猪急性败血症及关节炎；但未见感染人并致死的报道。猪链球菌致猪败血症、肺炎、脑膜炎、关节炎及心内膜炎1型，S群2型，R群，或溶血，致病性最强，人畜共患微生物学诊断病料采集不同病型采取不同检材，如浓汁。乳汁。血液、组织等直接涂片染色镜检：涂片；革兰染色；镜检；根据菌落形态，排列和染色性可做出初步的诊断分离培养与鉴定将病料接种于血琼脂平板，37 24h 培养，可疑菌落（形态、溶血）将可疑菌落涂片染色镜检，进行生化试验、动物试验（小白鼠、家兔）血清学试验可用于定群和定型，分

40、子生物学方法快速检测。第八章 肠杆菌(gnjn)科肠杆菌科细菌是一大群生物学性状(xngzhung)近似的革兰氏阴性杆菌。多数是肠道的正常菌群，少数为病原菌。埃希菌属：大肠(dchng)埃希菌沙门菌属耶尔森菌属：鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌其他肠道杆菌属：克雷伯菌属埃希菌属 埃希菌属有5个种，其中最重要的是大肠埃希菌俗称大肠杆菌（E.coli)，是最常见的临床分离菌。形态特征：大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的直杆菌，大小0.40.7umx23um，两端钝圆，散在或成对，大多数菌株周生鞭毛，但也有无鞭毛或丢失鞭毛的变异株。染色特性：碱性染料对本菌有良好着色性，革兰氏染色法被染成红色。培养及生化特

41、性：本菌为兼性厌氧菌，在普通肉汤培养基上生长良好，最适生长温度为37，最适生长pH为7.27.4。在麦康凯琼脂上形成红色菌落;在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落; 在SS琼脂上一般不生长或生长较差，生长者呈红色。在血液琼脂上大肠杆菌生长茂盛，一些致病性菌株在菌落周围形成-溶血。 本菌能发酵多种碳水化合物产酸产气。大多数菌株可迅速发酵乳糖。约半数菌株不分解蔗糖，几乎均不产生硫化氢，不分解尿素。TSI（三糖铁培养基）上反应呈黄色。 抗原及血清型大肠杆菌抗原主要有O、K和H三种。O抗原：173种；K抗原：103种；H抗原：60种。由此，有人认为自然界大肠杆菌的血清型可高达数万种。血清型的表示：

42、根据对大肠杆菌抗原的鉴定，可用O:K:H排列(pili)表示其血清型（抗原结构式）。如O8:K23（L）:Hl9，即表示该菌具有O抗原8，L型K抗原23，H抗原为19。对含有蛋白质性黏附(ninf)素抗原的菌株，其黏附素抗原应并列K抗原之后。如O8:K87，K88:Hl9中K88即为黏附素抗原F4。 致病性根据毒力因子与发病机制的不同，Gyles认为与动物疾病有关的病原性大肠杆菌(d chn n jn)可分为五类: 1、产肠毒素大肠杆菌 (ETEC)2、产类志贺毒素大肠杆菌 (SLTEC)3、肠致病性大肠杆菌 (EPEC)4、败血性大肠杆菌(SEPEC)5、尿道致病性大肠杆菌 (UPEC)1、

43、产肠毒素大肠杆菌 (ETEC) ETEC系一类致人和幼畜 (初生仔猪、犊牛、羔羊及断奶仔猪)腹泻最常见的病原性大肠杆菌，其致病力主要由黏附素性菌毛和肠毒素两类毒力因子构成，二者密切相关且缺一不可。初生幼畜被ETEC感染后常因剧烈水样腹泻，发病率和死亡率均很高,如仔猪黄痢 。粘附素性菌毛系人和动物ETEC的一类特有菌毛，因其能粘附于宿主的小肠上皮细胞，故又称其为粘附素或定居因子。迄今，在动物ETEC中已发现的黏附素主要有F4(K88)、F5(K99)、F6 (987P)和F41，其次为F42和F17。肠毒素是ETEC在体内或体外生长时产生并分泌到胞外的一种蛋白质性毒素，按其对热的耐受性不同可分为

44、不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)二种。在动物ETEC中，只有猪源F4+株能同时产生LT和ST，其他菌株仅产ST。2、产类志贺毒素大肠杆菌(STEC)又称产Vero细胞毒素大肠杆菌 (VTEC)，系一类在体内或体外生长时可产生类志贺毒素 的病原性大肠杆菌。在动物，SLTEC可致猪的水肿病，以头部、肠系膜和胃壁浆液性水肿为特征，常伴有共济失调、麻痹或惊厥等神经症状，发病率较低但致死率很高。 引起猪水肿病的SLTEC两类毒力因子： 1）粘附性菌毛：在1990年Bertsching等首次报道，从致猪水肿病的大肠杆菌分离出F18，是猪水肿病的SLTEC菌株的一个重要的毒力因子，它有助于细菌在猪肠

45、黏膜上皮细胞定居和繁殖。 2）致水肿病2型类志贺毒素 (SLT-2e或SLT-2v)：系引起猪水肿病的SLTEC所产生的一种蛋白质性细胞毒素。微生物学诊断：动物致病性大肠杆菌的分离与鉴定程序如下禽大肠杆菌(d chn n jn)病禽大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌的某些(mu xi)血清型所引起的一类疾病的总称。包括心包炎、脐炎、卵巢炎、输卵管炎、肠炎或慢性肿瘤样肉芽肿等。 O抗原(kngyun)：是S型菌的一种耐热菌体抗原，121加热2h不破坏其抗原性。它的抗原特异性决定于LPS的特异多糖侧链的结构。当S型菌体丢失特异性多糖时，即变成R型菌，O抗原也随之丢失。每个菌落只含有一种O抗原，O抗原注射于

46、兔可产生抗O血清。K抗原： 是菌体表面的一种热不稳定抗原，多存在于被膜或荚膜中，个别位于菌毛中。具有K抗原的菌株不会被其相应的抗O血清凝集，称为O不凝集性。根据耐热性不同，K抗原又分成L、A、B三型。每个大肠杆菌的菌体可以含有1-2种不同的K抗原，也有无K抗原的菌株。H抗原：是一类不耐热的鞭毛蛋白抗原，加热至80或经乙醇处理后即可破坏其抗原性。每一有动力的菌株仅含有一种H抗原，且无两相变异。无鞭毛菌株或丢失鞭毛的变种则不含H抗原。H抗原能刺激机体产生高效价凝集抗体。沙门菌属（Salmonella)沙门菌属邦戈尔沙门菌肠道沙门菌（肠道亚种（与致病密切相关）、萨拉姆亚种、亚利桑那亚种、双亚利桑那亚

47、种、豪顿亚种、英迪加亚种）猪：猪副伤寒鸡：鸡白痢、禽伤寒、禽副伤寒兔：沙门氏菌病牛：沙门氏菌病羊：沙门氏菌病形态及染色革兰染色：两端钝圆革兰阴性(ynxng)杆菌瑞士(ru sh)染色：鞭毛(binmo)：周身鞭毛（雏沙门菌、鸡沙门菌除外）荚膜：有菌毛：大多数有芽孢：无培养及生化特性菌落形态：普通培养基（圆形、光滑） SS培养基（圆形、光滑、无色、 菌落中央有黑点）在选择培养基上因不发酵乳糖而呈无色菌落。多数菌株H2S阳性而在菌落中央形成黑点。IMViC试验：-+-+抗原及血清型（一）抗原1 .菌体抗原（O抗原）：其成分为LPS的侧链多糖。60多种，耐热，1个菌株可含多种O抗原，以阿拉伯数字表

48、示。2. 荚膜抗原（Vi抗原）：与毒力有关,由N-乙酰半乳糖醛酸组成。有的菌株有，有的菌株无。3. 鞭毛抗原（H抗原）：其成分为蛋白质，不耐热，63种。 分为两相：（1）第1相（特异相）：小写英文字母表示 （2）第2相（非特异相）：阿拉伯数字表示（二）血清型（抗原式）表示方法： O抗原：第1相H抗原：第2相H抗原，如： 1，4，5，12：i : 1,2 有Vi抗原的，Vi抗原可写在O抗原之后，表示为：O抗原： Vi抗原：第1相H抗原：第2相H抗原致病性多数具有致病性，是一种重要的人畜共患病原菌，很容易在动物与动物、动物与人、人与人之间间接或直接传播。根据对宿主适应性不同，可分为：1. 专嗜性：

49、如鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌2. 偏嗜性：如猪霍乱沙门氏菌3. 泛嗜性：如肠炎沙门氏菌致病因子鞭毛、脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）、粘附素、型分泌系统 （Type secretion system, T3SS）五、诊断（一）分离培养：选择培养基（二）生化试验：糖发酵、IMViC试验、H2S阳性 （三）血清学试验：玻片凝集试验鉴定血清型与大肠杆菌的鉴别诊断：被检材料分离培养三糖铁琼脂斜面普通琼脂斜面涂 片 镜 检生化反应血清型鉴定耶尔森菌属鼠疫(shy)耶尔森菌（人）、假结核(jih)耶尔菌属（哺乳动物、鸟类）、小肠结肠炎耶尔森菌（哺乳动物、鸟类）、鲁氏耶尔森菌（鱼类）、弗

50、氏耶尔森菌、罗氏耶尔森菌、莫氏耶尔森菌、贝氏耶尔森菌、阿氏耶尔森菌鼠疫可在旱懒（土拨鼠）、松鼠、小鼠、花栗鼠等多种野生鼠及野兔(yt)和家兔中流行。形态及染色革兰染色：多形性，固体培养基中多见卵圆形或短杆状汤中为短链状（鼠疫耶尔森菌）；肉汤中为丝状（假结核耶尔森菌）鞭毛：周身鞭毛（鼠疫耶尔森菌除外）荚膜：有菌毛：大多数有芽孢：无培养及生化特性菌落形态：在含血液或组织液的营养培养基中，经24小时48小时形成可见菌落。菌落细小，圆形，无色半透明，中央厚而致密，边缘薄而不规则。有毒菌株形成灰白色，粘液性菌落。液体培养：在肉汤培养基中沉淀生长和形成菌膜，液体一般不混浊，稍加摇动，菌膜下沉呈钟乳石状温度

51、：28-30。兼性厌氧pH：7.2-7.4。选择性培养基：Clin-1培养基、改良Y培养基（小肠结肠炎耶尔森菌）致病机理粘附小肠上皮细胞及M细胞，分泌(fnm)毒力因子，破坏宿主细胞。鉴定(jindng)细菌(xjn)分离接种选择性培养基培养生化、血清学、分子生物学鉴定克雷伯菌属肺炎克雷伯菌（肺炎、臭鼻、鼻硬结）、产酸克雷伯菌、土生克雷伯菌、值生克雷伯菌、肉芽肿克雷伯菌、活动克雷伯菌存在于呼吸道和肠道，是一种条件致病菌。医院感染：造成肺炎、尿路感染和菌血症。耐药菌：超广谱-内酰胺酶耐药基因形态及染色革兰染色：较粗的短杆菌，成堆或短杆状排列鞭毛：无荚膜：有菌毛：大多数有芽孢：无培养及生化特性营养

52、要求：普通培养基菌落形态：粘液状大菌落，浓厚、圆凸、灰白色、闪光、丰盛而黏稠温度： 37兼性厌氧pH： 7.2-7.4。选择性培养基：肠道杆菌选择性培养基（麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素培养基(MIAC）血清型：O抗原：O1-O5。K抗原：82个荚膜型。第十章 巴氏杆菌(gnjn)科及黄杆菌科巴氏杆菌属:多杀性巴氏杆菌曼氏杆菌属:溶血性曼氏杆菌放线杆菌属:胸膜肺炎(fiyn)放线杆菌嗜血(sh xu)杆菌属:副猪嗜血杆菌巴氏杆菌属本属细菌已报道有16多种，多杀性巴氏杆菌(P.multocida)是本属中最重要的畜禽致病菌，可引起多种动物发生出血性败血症或传染性肺炎。猪：猪肺疫鸡：禽霍乱牛：牛出血性

53、败血症（牛出败）兔：兔巴氏杆菌病羊：羊巴氏杆菌病一、形态及染色两端钝圆，中央钝圆的短杆菌G-菌，单个存在，有时成双排列,病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时，可见典型的两极着色，培养物所作的涂片，两极着色不明显。无鞭毛、无芽孢、新分离的细菌有荚膜二、培养特性 对营养要求较严格。在普通培养基上生长贫瘠，血液或血清培养基中生长良好，长成灰白色露珠状针尖大小菌落，不溶血，麦康凯培养上不生长。马丁肉汤培养基三、血清型1.菌体抗原(kngyun):16个型，以阿拉伯数字表示 2.荚膜抗原:有6个型，大写(dxi)英文字母表示禽多杀性巴氏杆菌：5:A、8:A。猪源：5:A、6:B、8:A、2:D。羊源：6:B家

54、兔(ji t)：7:A四、抵抗力本菌抵抗力不强，普通消毒药常用浓度对本菌都有很好的消毒力。在无菌蒸馏水和生理盐水中很快死亡。冻干菌种在低温中可保存长达26年。五、致病性与免疫性本菌是多种动物的重要病原菌 ，主要引起出血性败血症、肺炎，如猪肺疫 、禽霍乱等。实验动物中小鼠非常易感。（荚膜多糖：内毒素、外毒素）动物患病痊愈后，可获得较强的免疫力，且对其他血清型具有交叉保护力。高免多价血清具有良好的紧急预防和治疗作用。灭活疫苗、弱毒疫苗、荚膜亚单位疫苗六、微生物学诊断 1.涂片或触片镜检 染色（美蓝或瑞氏），两极着色 2.分离培养 麦康凯琼脂不生长,血平板不溶血 3.动物试验 病料悬液或培养物接种小

55、白鼠,引起小白鼠迅速死亡 曼氏杆菌属（Mannheimia) 溶血性曼氏杆菌（Mannheimia. haemolytica）原名溶血性巴氏杆菌，是反刍动物（牛、绵羊）肺炎、新生羔羊急性败血症的病原菌。形态及染色革兰染色：两极着色两端钝圆革兰阴性杆菌瑞士染色：两极着色无鞭毛、有荚膜、有菌毛、无芽孢培养及生化特性营养要求：普通培养基、血培养基菌落形态：光滑、半透明菌落，多数菌株在牛血平板出现溶血。温度： 37兼性厌氧pH： 7.2-7.4。三、毒力因子白细胞毒素：穿孔毒素，Repeats-in-toxins（RTX），溶解白细胞和血小板 放线杆菌属胸膜肺炎放线杆菌：猪是该菌的唯一宿主，引起猪的传

56、染性胸膜肺炎林氏放线杆菌驹放线杆菌一、形态及染色革兰染色：小球杆菌，具新鲜病料两极着色瑞士(ru sh)染色：两极着色有鞭毛(binmo)、有荚膜、有菌毛、无芽孢二、培养(piyng)及生化特性营养要求：血培养基，需添加V因子菌落形态：粘液型菌落，多数菌株在绵羊血平板出现溶血。温度： 37兼性厌氧pH： 7.2-7.4。三、血清型根据荚膜和LPS分型：15个血清型:1型分为1a和1b；5型分为5a和5b。根据对辅酶的依赖性：生物型：1-12、15血清型生物型：13、14血清型四、毒力因子Apx毒素：穿孔毒素，Repeats-in-toxins（RTX）嗜血杆菌属嗜血杆菌是一群酶系统不完全的革兰

57、氏阴性杆菌，生长需要血液中的生长因子，尤其是X因子和V因子。形态及染色革兰染色：短杆状、球状杆状或长丝状美蓝染色：两极浓染无鞭毛、有荚膜、有菌毛、无芽孢培养及生化特性营养要求：巧克力平板（需供给X因子和/或V因子，初次分离培养时供给5%10%CO2可促进生长）菌落形态：圆形、表面光滑、边缘整齐、灰白色半透明菌落。温度： 37需氧或兼性厌氧pH： 7.6-7.8。抗原: 荚膜多糖、脂多糖、外膜蛋白鉴定：V因子需要试验、卟啉试验（X因子检测）副猪嗜血杆菌条件致病菌，定植于猪的上呼吸道可引起高热、咳嗽、呼吸困难、关节肿胀、共济失调，与猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染不溶血血清型（根据荚膜分类）高度力：

58、1、5、10、12、13、14中等毒力：2、4、15无毒力：3、6、7、8、9、11微生物学诊断1. 显微镜检查：两极浓染2. 分离培养：血平板（生长不好或不长，巧克力平板（生长良好）3. V因子需要试验：卫星现象4. 生化试验 5. 血清学试验 里氏杆菌属鸭疫里氏杆菌（R. anatipestifer）是本属的代表(dibio)种，原名鸭疫巴氏杆菌，是雏鸭传染性浆膜炎的病原菌。形态(xngti)及染色革兰染色：菌体呈杆状或椭圆形，多为单个，少数(shosh)成双或短链排列。瑞氏染色：两极着色无鞭毛、有荚膜、无芽孢培养及生化特性营养要求：巧克力或因蛋白胨大豆琼脂（TSA）平板（ 初次分离培养时

59、供给5%10%CO2可促进生长）5%CO2或烛缸中菌落形态：圆形、微突起、表面光滑、奶油状菌落。温度： 3724-48h。pH： 7.2-7.4。血清型：共有21个血清型。我国目前已知存在13个血清型，以1型为主。致病因子与致病性：Vap1蛋白。各血清型之间缺乏交叉保护。微生物学诊断：病料采集：病鸭的脑及心血。培养基：巧克力平板。第十一章 革兰阴性需氧杆菌布氏杆菌属假单胞菌属:铜绿假单胞菌军团菌属布氏杆菌属布氏杆菌又名布鲁氏菌 ,1887年Bruce从死亡士兵脾脏中分到第一株布鲁菌，可引起多种动物发病。主要寄居于肝、脾和淋巴组织内的单核细胞中，是胞内寄生菌。布氏杆菌属：流产布氏杆菌（牛、山羊、

60、绵羊、猪、犬）、马尔他布氏杆菌（山羊、牛、绵羊、猪、犬）、绵羊布氏杆菌（绵羊）、猪布氏杆菌（猪、牛、犬）犬布氏杆菌（犬）一、形态及染色革兰染色：球状或短杆状，多散在无鞭毛、无荚膜、无芽孢培养及生化特性本菌专性需氧，在初代分离培养时尚需5%-10% CO2，泛酸钙和内消旋赤藓糖醇可刺激某些菌株生长。在培养基中加入少量血液、血清或肝浸液可促进生长，不溶血。生长缓慢，常需5-10d甚至20-30d。液体培养基上呈轻微浑浊生长，时间长可形成很厚的菌膜；在固体培养基上有S、M、R型菌落，大小不一。S型菌落：无色透明、表面光滑湿润，大小不等；R型菌落(jnlu)：不太透明，多呈颗粒状，浅黄色到褐色，易碎或