柱色谱分离中的应用

1、柱色谱分离中的应用摘要：本文主要简述柱色谱的基本知识，了解柱色谱的简要 操作以及分类。简介柱色谱的广泛应用等。关键词：柱色谱分离 吸附剂1、柱色谱柱色谱是在一根玻璃管或金属管中迸行的色谱技术，将吸附 剂填充到管中而使之成为柱状，这样的管状柱称为吸附色谱 柱。使用吸附色谱柱分离混合物的方法，称为吸附柱色谱。 这种方法可以用来分离大多数有机化合物，尤其适合于复杂 的天然产物的分离。分离容量从几毫克到百毫克级，所以， 适用于分离和精制较大量的样品2、吸附剂吸附剂是能有效地从气体或液体中吸附其中某些成分的固 体物质。吸附剂一般有以下特点：大的比表而、适宜的孔结 构及表面结构；对吸附质有强烈的吸附能力；

2、一般不与吸附 质和介质发生化学反应；制造方便，容易再生；有良好的机 械强度等。吸附剂可按孔径大小、颗粒形状、化学成分、表 面极性等分类，如粗孔和细孔吸附剂，粉状、粒状、条状吸 附剂，碳质和氧化物吸附剂，极性和非极性吸附剂等。吸附剂要求一种合适的吸附剂，一般应满足下列几个基本要求：对样品组分和洗脱剂都不会发生任何化学反应，在洗脱 剂中也不会溶解。对待分离组分能够进行可逆的吸附，同时具有足够的吸 附力，使组分在固定相与流动相之间能最快地达到平衡。颗粒形状均匀，大小适当，以保证洗脱剂能够以一定的 流速（一般为15 mL min-1）通过色谱柱。材料易得，价格便宜而且是无色的，以便于观察。可用 于吸附

3、剂的物质有氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、 氧化钙（镁）、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。其中有些 对几类物质分离效果较好，而对其它大多数化合物不适用。二、柱色谱分类：吸附柱色谱色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或 玻璃纤维塞住，管内装入吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀，以保证良好 的分离效果。除另有规定外，通常多采用直径为0.070.15mm的颗粒。色谱柱的大小，吸 附剂的品种和用量，以及洗脱时的流速，均按各品种项下的规定。吸附剂的填装 干法 将吸附剂一次加入色谱柱，振动 管壁使其均匀下沉，然后沿管壁缓缓加入洗脱剂；或在色谱柱下端出口处连接活 塞，加入适量的洗脱剂

4、，旋开活塞使洗脱剂缓缓滴出，然后自管顶缓缓加入吸附剂，使 其均匀地润湿下沉，在管内形成松紧适度的吸附层。操作过程中应保持有充分的洗脱剂 留在吸附层的上面。湿法将吸附剂与洗脱剂混合，搅拌除去空气泡，徐徐倾入色谱柱中，然后加入洗脱剂将附着管壁的吸附剂洗下，使色谱柱而平整。俟填装吸附剂所用洗脱剂从色谱柱自然流下，液面和柱表而相平时，即加供试品溶液。供试品的加入除另有规定外，将供试品溶于开始洗脱时使用的洗脱剂中，再沿色谱管壁缓缓加入，注意勿使吸附剂翻起。或将供试品溶 于适当的溶剂中，与少量吸附剂混匀，再使溶剂挥发去尽使呈松散状，加在已制备好的色谱柱上面。如供试品在常用溶剂中不溶，可将供试品与适量的吸附

5、剂在乳钵中研磨混匀后加入。洗脱除另有规定外，通常按洗脱剂洗脱能力大小递增变换洗脱剂的品种和比例，分别分部收集流出液，至流出液中所含成分显著减少或不再含有时，再改变洗脱剂的品种和比例。操作过程中应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。分配柱色谱方法和吸附柱色谱基本一致。装柱前，先将载体和固定液混合，然后分次移入色谱柱中并用带有平面的玻棒压紧；供试品可溶于固定液，混以少量载体，加在预制好的色谱柱上端。洗脱剂需先加固定液混合使之饱和，以避免洗脱过程中两相分配的改变。实验关键步骤：1、装柱要紧密，要求无断层、无缝隙。2、在装柱、洗脱过程中，始终保持有溶剂覆盖吸附剂。一个色带与另一色带的洗脱液的接受不要交

6、叉三、柱色谱的分离应用1、天然胡萝卜素的提取及分离 【摘要】采用浸取法从胡萝卜中提取胡萝卜素，研究了不同提取剂对胡萝卜素提取效果的影 响。使用薄层色谱(TLC)、柱色谱对提取液进行分离纯化,采用紫外可见分光光度计测定胡萝卜素含量。研究结果表明:用丙酮一石油醚(3:7,V/V)混合液提取效果较好，提取的胡萝卜素 含量可达995g?g;薄层色谱分离中展开剂选用石油醚和乙醚的混合液，两者比例为9 ： 1时 分离效果最好;柱色谱的洗脱速度和效果与溶剂极性相关，洗脱剂为石油醚和乙醚的混合液 时色带分离明显2、紫杉醇生产新工艺研究【摘要】从红豆杉茎皮提取紫杉醇，采用1%柠檬酸渗漉、柱色谱分离、漠加成后柱色

7、谱 分离的新工艺，可以获得比较满意的结果。3、硅胶柱色谱分离纯化生物发酵液中叶酸的研究【摘要】采用硅胶柱色谱分离纯化生物发酵液中的叶酸，实验研究了色谱方法，确定了适 的谱条件。4、柱色谱分离提纯叔戊基蒽醌【摘要】叔戊基蒽醍作为一种有机中间体,被广泛的运用在合成、催化等各领域，其作为过 氧化氢的催化剂不仅催化效率高，且催化剂不易中毒。本文就叔戊基蒽醍的分离做了初步研 究，主要利用了薄层色谱定性，柱色谱分离的方法，使叔戊基蒽醍得到了分离提纯，经高效液 相色谱内标法测定，纯度达到了 90%左右。5、切割硅胶柱色谱法分离丹参中的丹参酮IIA【摘要】采用加热回流提取丹参中主要化学成分丹参酮IIA,采用切割硅胶柱色谱法分离丹 参中的脂溶性成分丹参酮IIA，结合红外图谱对比进行鉴定。结果表明，该方法具有简便、快 速、结果可靠等优点，用此方法分离的产物为丹参酮IIA且纯度较好。参考文献1、王敏；祝渊静；赵国良；李彪；木石石；重庆理工大学学报(自然科学版)2010-03-152、陈冲