医学诊断学课件：第3章 血栓与止血检测

1、第三章 血栓与止血检测P285生理状态下血管中流动的血液为什么不凝固破损的血管为什么能止血抗凝血血栓形成出血止凝血动态平衡正常止血机能两个方面四个因素凝血机制抗凝机制血管壁（vessel wall）血小板（platelet）凝血系统（coagulation system）抗凝及纤溶系统（anticoagulation and fibrinolytic）凝血与抗凝机制的病理生理基础止血与凝血简要机理1.血管壁：血管收缩、血流减慢。2.血小板: 粘附、聚集、释放、促凝、收缩、血小板栓(白色栓子)3.凝血系统：内源和外源激活（红色栓子）4. 纤溶激活：血块自溶，血管修复。第二节 血管壁检测筛检实验诊

2、断实验一、筛检试验（一）出血时间（bleeding time,BT）原 理 测定毛细血管被刺破后至自然止血所需时间主要反映血管壁和血小板相互作用。方 法用标准弹簧针或刀片刺破皮肤2-3mm深，观察出血自然停止的时间。参考值 出血时间测定器法 （ 6.92.1）min ， 9min为延长。意 义 BT长短主要受血小板因素和血管壁因素的影响1、 BT延长血小板明显减少：如原发性或继发性血小板减 少性紫癜; 血小板功能异常：如血小板无力症和巨大血小板综合征 严重缺乏血浆某些凝血因子：如vWD、DIC；血管异常：如遗传性出血性毛细血管扩张症; 药物干扰：如服用阿司匹林、肝素、rt-PA等。意 义3BT

3、缩短 某些严重高凝状态或血栓性疾病 心梗、脑梗、DIC高凝期本试验临床价值有限（二）束臂试验毛细血管壁完整性vWF血小板质与量异常脆 性通透性压力易出血原 理又称毛细血管脆性试验(capillary fragility test, CFT)毛细血管抵抗力试验(capillary resistance test, CRT) 血压计袖带上臂加压8min 在前臂直径5cm 圆圈内计数出血点(收缩压+舒张压)2方 法 参考值5cm直径的圆圈内8分钟时间新的出血点成年男性：0-5个 成年女性、儿童：0-10个10个为异常 本实验观察血管壁、血小板的综合止血作用。1.异常提示：毛细血管脆性、通透性2. 常

4、见于： 血管壁结构和功能缺陷,如遗传性出血性毛细血管扩张症、过敏性紫癜、单纯性紫癜、vitc缺乏。血小板的量和质异常,如原发性和继发性血小板减少症、血小板增多症、先天性和获得性血小板功能缺陷症；血管性血友病(von Willebrand disease,vWD)等。其他：高血压、糖尿病、败血症、维生素C缺乏、尿毒症、肝硬化和某些药物等。临床价值有限意 义诊断试验（一）血管性血友病因子抗原测定（vWF：Ag）【原理】免疫火箭电泳法：在含vWF抗体的琼脂糖凝胶板中加入一定量受检血浆（vWF抗原），在电场作用下，泳动一定时间，出现抗原-抗体反应形成的火箭样沉淀线，其高度与受检血浆中vWF的浓度呈正相

5、关，计算出vWF：Ag的含量。酶联免疫吸附试验（ELISA）诊断试验（一）血管性血友病因子抗原测定（VWF：Ag）【参考值】94.1%32.5%。【临床意义】减低:见于vWD,是诊断vWD及其分型的指标之 一。增高:见于血栓性疾病及血栓性前状态,如心肌梗塞、心绞痛、脑血管病变、糖尿病等。 第二节 血小板检测数量：血小板计数血小板平均容积血小板分布宽度功能：粘附、聚集、释放、促凝和血块收缩参与初期止血一、筛检试验（一）血小板计数（二）血块收缩试验血凝块血小板血小板收缩蛋白纤维蛋白网 收缩血清被挤出血块缩小加固原理血块收缩试验（clot retraction test, CRT）方法全血标本注入试

6、管中，加入Ca2+和凝血酶，静置，观察析出的血清占原有全血量的百分比。 表示血块退缩的程度参考值血块收缩时间： 2h 开始退缩18h-24h 完全退缩 血块收缩率=血清(ml)/全血(ml)(100%-Hct%)100%参考值：65.8士11.0%。意义主要用于血小板功能测定的初筛试验。1.减低 见于ITP、血小板增多症、血小板无力症、红细胞增多症、低(无)纤维蛋白原血症、多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等。2.增高 见于先天性和获得性因子缺乏症等。二、诊断试验（一）单克隆抗体血小板抗原固定试验monoclonal antibody immubilization of platelet ant

7、igens,MAIPA检测血清中血小板膜蛋白特异的自身抗体。【参考值】ELASA法：阴性【临床意义】 1、自身免疫性疾病： ITP。2、血小板减少患者：免疫学诊断和鉴别诊断的依据。3、观察病情：经治疗后，ITP患者的PAIg水平下降；复发后则又可升高。 玻珠柱法和玻璃器皿法【参考值】62.5%8.61%【临床意义】1.PAdT增高 见于血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗塞、心绞痛、脑血管病变、糖尿病、DVT、妊高征、肾小球肾炎、肺栓塞、口服避孕药等。2.PAdT减低 见于vWD、巨大血小板综合征、血小板无力症、尿毒症、肝硬化、异常蛋白血症、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性白血病、服用抗血小板药

8、物等。临床应用价值有限（二）血小板粘附试验 platelet adhension test,PAdT（三）血小板聚集试验platelet aggregation test,PAgT原理：在富含血小板血浆中加入诱聚剂，血小板由于发生聚集反应其血浆的浊度减低，透光度增加。计算：参考值：（三）血小板聚集试验platelet aggregation test,PAgT临床意义反映血小板膜糖蛋白（GPb/a）通过纤维蛋白原（Fg）与另一血小板膜GPb/a结合的聚集能力。1.PAgT增高 反映血小板聚集功能增强,见于血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗塞、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊高征、DVT 。2.PA

9、gT减低 反映血小板聚集功能减低,见于血小板无力症、尿毒症、肝硬化、骨髓增生性疾病、ITP 等。血小板粘附、聚集试验是血小板功能和激活的初筛试验（四）血小板P-选择素测定血小板颗粒膜蛋白-140(GMP-140)测定原理：GMP-140是存在于血小板颗粒膜的标志蛋白分子，当血小板激活时，GMP-140进入血浆或与血小板质膜融合，并大量表达于膜表面，形成质膜表面的一个新抗原。利用抗P-选择素的单抗定量测定受检血浆中或血小板P-选择素的含量可反映体内血小板的激活程度。临床意义：1.是血小板被激活的一个最有意义的特异性分子标志物。2.增高见于急性心肌梗塞 、心绞痛、高血压、糖尿病、脑血栓形成、动脉硬化等。原理：血小板激活后，膜磷脂花生四烯酸(AA)代谢亢进，生成TXA2，其不稳定，并很快转化为TXB2，测定血浆中含量可