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文档简介
1、(设计)正文题目:肉桂醛对采后西兰花的抑菌作用及其生理的影响The Antimicrobial effect of cinnamic aldehyde on harvested broccoli and the effect on Physiology学院:食品与生物专业:食品科学与工程级:食工 1102班号:1110100213学学生:指导教师:二一五 年 三 月肉桂醛对采后西兰花的抑菌作用及其生理的影响摘要:本实验选取花球紧实、各蕾尚未松开的鲜绿色花球,并且无病害、无机械损伤的西兰花为试材,分切成直径 3cm4cm 的球,并随机分成 2组。第 1 组为空白组,不经过任何处理(对照);第 2
2、 组为实验组,在浓度为10L/L 肉桂醛中熏蒸 4h,而后分装入筐中,在温度为(4 1)的冷库贮藏,相对湿度约为 90%。每隔 5d 取样测定其感官品质,腐烂指数、指数、失重率、可溶性固形物含量、微生物总数、含量、以及抗坏血酸含量,来探索肉桂醛对西兰花的抑菌作用以及对其生理的影响。实验结果表明,肉桂醛熏蒸处理,能够抑制西兰花表面微生物的生理活动,减少西兰花的腐烂率;并对西兰花的生理活动也具有一定的抑制作用,能有效地延缓西兰花的、失重,以及和抗坏血酸的降解,抑制其呼吸作用以及营养物质的分解,保持西兰花的感官品质。:肉桂醛西兰花熏蒸抑菌作用 生理The Antimicrobial effect o
3、f cinnamic aldehyde on harvested broccoli and the effect on PhysiologyAbstract:The experiment selected broccoli as materials, which had tight curd,fresh green flower ballst small buds had not released with no diseaseand mechanical damage. The broccoli should be cuto flowers ball with3 to 4 centimete
4、rsmeter , and randomly dividedo 2 groups. Thegroup is the blgroup, without any treatment (control); group2 fumigated with the concentration of the 10L/L cinnamic aldehyde 4h.After fumigation, place themo the plastic basket respectively, andstorage at 4 , relative humidity of about 90%. Every five da
5、ys, we shouldassay the sensory quality, decay index, yellowing index, weight loss,soluble solids content, the total number of microanisms, chlorophyllcontent, and ascorbic acid content of each group of broccoli, to explorethe antimicrobial effect of cinnamic aldehyde on broccoli and itsphysiological
6、 affect.Experimental results showt cinnamic aldehyde fumigation caninhibit the physiological activity of microanisms on broccoli surface,reduce the rate of decay of broccoli; cso inhibit the physiologicalactivity of broccoli,and effectively delay yellowing, weightleess, aswell as the degradation of
7、chlorophyll and ascorbic acid. Whats more,itcan inhibit respiration andition of nutrients, keng thesensory quality of broccoli well.Keywords: cinnamic aldehyde, broccoli, fumigation, Antimicrobial effect,physiology目录1引言1.11.2研究背景和意义研究现状和分析1.2.1 果蔬采后防腐保鲜相关技术1.2.1.11.2.1.21.2.1.31.2.1.4防腐保鲜原理物理法防腐保鲜化学
8、法防腐保鲜生物法防腐保鲜1.31.4研究基本思路研究内容2实验部分2.1材料、器材及主要试剂2.1.12.1.22.1.3实验材料实验器材主要试剂2.2实验方法西兰花处理流程检验项目及测定方法2.2.2.12.2.2.22.2.2.3感官品质测定腐烂指数测定指数测定失重率测定可溶性糖含量测定微生物总数测定2.2.2.7含量测定抗坏血酸含量测定数据处理. 3 结果分析与结果分析感官品质腐烂指数3.1.3指数失重率可溶性糖含量3.1.6 微生物总数3.1.7含量3.1.8 抗坏血酸含量3.2 结果. 4 总结致谢参考文献1 引言1.1 研究背景和意义西兰花又叫青花菜(Brassica oleace
9、a L.var.italica)、绿菜花、嫩茎花椰菜,属花科芸苔属甘蓝变种,富含多种营养成分,并具有防癌抗癌之功效1-2。西兰花为一年或二年生草本植物,原产地在地中海东部的沿岸一带,20世纪初时开始传入中国,而后渐渐得到我国市场的喜爱,最先在南方区域开始大量种植。随着人们对蔬菜的营养价值的需求提高,其所需的果蔬品种逐渐多样化,因此对西兰花的需求也逐渐增加。此外,西兰花具有十分广阔的的出口前景,它的种植面积也因此扩大,国内种植的地域开始向北方地区延伸。西兰花的可食用的部分主要为的花茎和花蕊,其品质柔嫩,水分丰富,少,风味鲜美,主要用于西餐配菜,也可做沙拉、煲汤、热炒等,是蔬菜中的优等品之一。西兰
10、花的营养成分十分丰富,并且某些成分的含量很高,主要有蛋白质、脂肪、维生素、碳水化合物和各种矿物质等。据分析,每 100 克新鲜采摘的西兰花,其维生素 C 的含量是番茄的 6 倍、花椰菜的 2 倍;钙含量为番茄的8 倍、花椰菜的 3 倍;蛋白质的含量是番茄的 4 倍、花椰菜的 2 倍。此外,西兰花还有很高的药用价值,能够预防和心疾病,有延缓衰老、增强抵抗力等功效3-4。近些年,西兰花的抗癌作用已被越来越多的人重视和研究,现已成为及西方国家的科学家所研讨的重要内容。研究中心此前了一份抗癌蔬菜榜,其中西兰花名列前茅。等人研究表明,异硫酸盐是西兰花中最主要的抗癌活性成分,这种物质具有高度的生物活性,S
11、GC 一 7901 细胞凋亡5-6。能诱导人肝癌细胞和胃可将摄入的西兰花中的芥子油苷水解成异硫酸酯(Isothiocyanate,ITC),作为直接的抗氧化剂或诱导产生抗氧化二相酶,而 ITC 中最具特征的化合物萝卜硫素1-异硫酸-4-甲磺酰基丁烷(Sulforaphane,SFN),具有抗各种肿瘤细胞系的特性7。此外,西兰花中抗坏血酸成分十分丰富,对肝脏的解毒能力具有促进作用,对机体免疫力的提高也有十分有效的作用。西兰花中的黄酮类化合物,能有效预防糖尿病以及因引起的并发症,改善微循环和预防毛细变脆,治疗皮肤疾病,抗突变等作用8。此外西兰花作为一种高蔬菜,能促进肠胃蠕动,并降低对葡萄糖的吸收,
12、进而起到了降低血糖的作用,因此可以十分有效地控制患者的病情。然而,西兰花是呼吸越变型蔬菜,采后阶段由于营养断绝,其未成绿色花序会迅速开放并衰老,极易产生、失水、营养成分流失等品质问题,严重影响其商品价值。并且采后西兰花的花球容易出现腐烂、长褐色斑等现象,其原因是在采摘、和采后的贮藏各个阶段中,许多病原真菌在花球表面和收割伤口处大量繁殖,使其迅速失去商品价值,从而使西兰花变质。因此,如何有效抑制西兰花微生物污染以保证西兰花的品质,是延长西兰花货架期的关键和亟待解决。植物精油(essential oils,EOs)被认为是一种一般公认安全(generallyrecognized as safe,G
13、RAS)的物质,是具有较强挥发特性的植物次生代谢产物的提取物,具有杀虫、抗菌、抗真菌、抗氧化和抗癌作用,可用于食品、药品和化妆品行业,并获得食品药物管理局安全认可9-10。植物精油是一种天然而成的绿色,是一种对环境无污染的生物防治试剂,近年来在果蔬、肉类、蛋品等食品中的应用,均取得了显著的防腐保鲜效果。植物精油对果蔬病害的作用方式多样,而对果蔬进行熏蒸是其中常用的方法之一。肉桂醛( Cinnamaldehyde) 属于醛类有机化合物,是肉桂提取物肉桂油的主要成分,已被食品和药物管理局批准为一个安全的食品级化学品11-12。肉桂醛是良好的抗真菌的物质,能十分有效地抑制真菌的生命活动,如对、橘青霉
14、、交链孢霉、串珠镰刀菌、白地霉等真菌的抑制作用都十分显著。肉桂醛的杀菌机理是毁坏真菌的细胞壁,使对真菌有害的物质进入到真菌的细胞内,并且破坏其蛋白质结构和细胞器,从而起到杀菌作用。现今,肉桂醛作为一种食品添加剂,在食品行业得到广泛运用,并在果蔬防腐保鲜领域,也已有不少等人13研究表明,肉桂提取物对芒果的炭疽病菌具有较强的抑制作研究。用。等14对肉桂醛防治芒果炭疽病的机理进行研究后认为:炭疽病菌侵入芒果后,活性氧基等物质含量上升,肉桂醛减少了此类物质的产生,减小芒果因病菌侵染而致使防御酶系统发生紊乱的程度,使芒果保持较为正常的生理状等15试验研究了牛至油、柠檬醛、肉桂态,从而抑制和减轻病害的发生
15、。醛和香芹酚对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果,结果发现其抑菌效力大小为肉桂醛香芹酚牛至油柠檬醛。可见,肉桂醛作为一种天然香料,不仅对环境无毒无害,并且抑菌效果也十分可观,进一步研究和开发利用肉桂醛在果蔬防腐方面的应用意义,前景广阔。因此,将采后的西兰花通过肉桂醛熏蒸处理,研究其对西兰花的防腐抑菌效果,是一项十分有意义的研究。研究现状和分析果蔬采后防腐保鲜相关技术防腐保鲜原理西兰花采后腐烂原理主要是西兰花在储藏和过程引起了大量机械损伤,一些营养物质外流,使病原真菌在花球表面和收割伤口处大量繁殖,从而使西兰花变质。另外,微生物还可通过西兰花的皮孔和气孔西兰花组织。因此,防止西兰花的原理主要是预
16、防和减少微生物对西兰花的侵染,或是降低依附在西兰花表面的微生物的生理活动,或破坏微生物的细胞结构达到杀死微生物的目的,以减缓或抑制腐烂。通常用以下基本措施:1.2.1.2 物理法防腐保鲜低温冷藏冷藏法是常用的防腐保鲜方法之一,包括利用制冷设备快速冷藏法、普通自然冷藏法、自然冰及人工冰冷藏法等,其应用均十分广泛。低温冷藏能够有效降低西兰花的代谢,并抑制微生物繁殖。实验证明,4时可有效抑制微生物的侵染长,抑制西兰花现象的发生;并且能够延缓西兰花的球的褪绿、和褐变,降低营养物质的减少速度,保持西兰花细胞膜的完整性,从而有效地保持西兰花的食用价值,延长货架期。射线处理射线可杀死西兰花表面的微生物从而起
17、到防腐的效果,常用的射线有射线、电子射线、射线、宇宙射线、中子射线、紫外射线等。研究证明,2.5 kGy剂量的辐照能够有效地杀死附在西兰花表面的真菌和细菌,抑制真菌和细菌对西兰花的侵染而引起的腐烂,进而提高防腐保鲜贮藏效果。此外,辐照能有效地减少西兰花中乙烯的产生,进而抑制其呼吸代谢的作用,而西兰花自身的品质则不受影响。热激处理热处理是指以不影响果蔬的品质为前提,将果蔬经过微波处理、热水浸泡、远红外线、热蒸汽等方法的处理,在一定的温度下抑制或杀死病原菌的生命活动;或改变酶活性,诱导果蔬产生抗逆性,从而达到保鲜效果。采后热处理技术能有效减少西兰花在贮藏期间的腐烂,是一种无残留、无环境污染的有效的
18、采后病害的控制方法。但此方法虽有利于延长西兰花的货架期,却不利于西兰花的长期。气调保鲜气调保鲜是指通过控制贮藏环境中各种气体的比例,来达到果蔬的防腐保鲜的一项技术。气调方法有多种,因对各种气体的浓度指标和设备所需条件的要求的不同而不同。主要包括自然降氧、减压气调和气调包装、充氮降氧、最适浓度指标气体置换等。涂膜处理在果蔬的表面被膜是物理法防腐保鲜的又一种技术措施。其作用机理是将具有成膜性的物质通过浸渍、涂布、喷洒等方式涂敷在西兰花表面,使其形成一层具有抑制西兰花内外气体、水分和溶质交换及微生物对西兰花等作用的薄膜,从而防止西兰花变质。经典雾化静电雾化是外界的干扰使液体的表面出现不稳定的状态,产
19、生液体、细化等现象,从而形成直径在十到几百微米之间的小液滴。静电雾化水处理采后西兰花能够有效抑制其表面和病菌生长,并且能显著抑制西兰花在贮藏过的呼吸强度,减少乙烯的产生,延缓花球的褐变,从而有效延缓西兰花采后的衰老进程。1.2.1.3 化学法防腐保鲜防腐剂防腐剂是应用其中的杀菌剂抑制或杀死果蔬及环境中的病原菌, 从而起到防腐保鲜的目的。常用的有唾菌灵(BT )E、苯菌灵、邻苯基苯酸盐、仲丁胺、抓硝按、甲霜灵、甲基、抑霉哇、双肌盐、三哩类邻苯基苯酚钠等。脱氧剂脱氧剂的主要作用是脱除果蔬大环境或微环境中的氧气, 抑制各种病原菌的生命活动,并且降低果蔬的呼吸强度,从而达到防腐保鲜的效果。现在常用的脱
20、氧剂有过氧化氢加碳酸氢钠加氯化氢, 连二亚硫酸盐加氢氧化钙加碳酸氢钠加活性炭, 沸石吸附,素加安息香酸及其盐类等。乙烯氧化剂乙烯氧化剂主要通过抑制西兰花的呼吸强度,降低乙烯量,有效减少西兰花采后病害,抑制腐烂的发生,并且能够保持其营养成分和风味物质不流失,从而起到延缓西兰花采后衰老现象的发生的作用。其主要应用的是过氧化物,如过氧化钙、过氧化钡、过氧化钠、过氧化锌、高锰酸钾、高锰酸钠、高铬酸钾、高铬酸钠、澳化钾、澳化钠等。1.2.1.4 生物法防腐保鲜微生物及其代谢物微生物可以产生抗生素、溶菌酶、细菌素、蛋白酶、过氧化氢和有机酸等生物活性物质,这些产物都具有很好的抗菌效果,故利用具有拮抗作用的微
21、生物可以抑制或杀死果蔬其他微生物的生长,从而达到防腐保鲜的目的16。并且,微生物产生的次级代谢产物,如抗生素、激素、毒素、维生素物碱等物质,都具有十分的良好的抑菌和抗氧化等作用。此外,抗菌肽也具有良好的抑菌效果。抗菌肽是由多种生物细胞特定编码经外界条件诱导产生的一类具有广谱抗细菌、真菌、原虫、抑杀肿瘤细胞等活性作用的多肽,尤其对部分真菌具有极强的力17。天然提取物质天然提取物保鲜剂是通过利用从天然提取物中提前的的活性物质来抑制西兰花表面致病菌的生命活动,减少的发生;以及抑制西兰花中酶的,从而降低其的生命活动强度。天然提取物保鲜剂无毒无害,具有良好的绿色保鲜的效果,早期的研究应用主要集中在对将果
22、蔬浸泡在普通的天然植物水提取液后的保鲜效果的方面。天然提取物和其他具有防腐保鲜作用的物质进行复配后的混合物质,可以达到十分良好的成膜性,形成复合保鲜剂,不仅能有效抑制病菌对采蔬,还可防止果蔬水分散失,抑制果实衰老,延长果蔬货架期。1.3 研究基本思路西兰花(Brassica oleracea L.)的食用部分为花蕊和花茎,其颜色翠绿、清香柔嫩、味道鲜美,具有多种烹饪食用方法,因此深受广大消费者喜爱。而且,西兰花含有丰富的营养成分,且含量颇高,具有很高的营养价值,居于同类蔬菜的首位,有“蔬菜”的美称。并且,西兰花对心疾病、等病症具有良好的功效,更具有防癌抗癌的作用,是一种具有良好药用价值的果蔬。
23、但是,因西兰花的花球是由许多的花梗和无数个蕾,代谢非常旺盛,采后贮藏 12 天后便会出现致病菌、失水、含量下降等不良现象,从而发生腐烂、萎蔫、等现象,并且其营养成分也迅速流失,严重影响西兰花的食用价值。因此,如何减少采后西兰花的微生物和腐烂具有深远的意义。目前,国内外对于西兰花的防腐保鲜方法,在化学类方法、物理类方法物类方法等方面均有所涉及。有研究表明,低温、自发气调包装和 1-MCP 是延长西兰花贮藏保鲜时间和保持其品质的有效途径18-19。而随着越来越多的消费者化学防腐保鲜剂对果蔬的污染,逐渐经化学试剂防腐保鲜处理并含有残留物质的果蔬产品,并对生物保鲜剂的需求也将会大幅增加。许多天然提取物
24、都具有十分有效的防腐保鲜作用,并且它们对无毒无害,对环境无污染,且成本十分低廉,吸引了越来越多的人,将他们的注意力转移到对天然物质在果蔬保鲜剂方面的研究和开发。如今,研究证实天然香辛料和食用中草药中的芳香精油及其成分能够通过抑制真菌性而显著延长果蔬的贮藏时间,提高贮藏品质,其中草本植物提取物的抑菌效果较为显著,安全且环保20。肉桂醛是非常重要的一种天然防腐剂,是肉桂精油的主要成分。肉桂醛具有良好的杀菌防腐作用,尤其是对如、橘青霉等真菌的繁殖的抑制效果十分显著,其主要通过破坏真菌细胞壁使外界物质进入细胞内,破坏真菌的蛋白质和细胞器,从而杀死真菌。作为一种食品添加剂,肉桂醛具有很好的持香效果,且对
25、无毒,对环境无污染。肉桂醛在果蔬防腐方面的应用已有不少,但在西兰花防腐保鲜中的应用却鲜有研究。因此,将肉桂醛运用在西兰花的防腐保鲜领域,具有十分的意义。1.4 研究内容研究证明西兰花在常温下贮藏 12 天后随即便出现腐烂变质的现象,并且开始、失水,致使丧失其经济价值及食用价值。肉桂醛是一个安全的食品级化学品,无毒无害,且具有很好的杀菌防腐的效果,是抑制真菌的活性物质,对、交链孢霉等真菌的抑制作用都十分显著。西兰花的腐烂变质、失水等现象主要是由其表面的微生物以及西兰花的生理代谢活动所致,将肉桂醛应用在西兰花的防腐保鲜上,能有效杀死致病菌及抑制西兰花代谢的作用。在预实验之后,本实验确定采用 10L
26、/L桂醛对新鲜西兰花进行熏蒸处理,测定西兰花在采后 20 天的贮藏期内的感官品质、指数、腐烂指数、失重率、可溶性糖含量、含量、微生物总数、抗坏血酸含量等 8 个指标的变化,并通过与对照组进行对比,来得出肉桂醛熏蒸处理对西兰花采后的抑菌作用以及其生理的影响,为其应用在西兰花防腐保鲜方面作参考。2 实验部分材料、器材及主要试剂实验材料西兰花,购于杭州江干区海天农贸市场。选取花球紧实、各蕾尚未松开的鲜绿色花球,并且无机械损伤、无病害的西兰花为试材。肉桂醛,购于 SIGMA-ALDRICH 公司,分析纯。筐,市售普通筐,规格为 2L。2.1.2 实验器材MASTER-型自动温度补正手持折光仪ATAGO
27、 公司UV-1800 分光光度计公司MLS-3750 型灭菌锅SANYO 公司型零度保鲜冰箱 JA1203型电子天平 FA2004型精密电子天平超净台2.1.3 主要试剂石英砂、碳酸钙粉、80%(体积分数)德国西门子HANG LiANG溶液、0.9%生理盐水、20g/L草酸溶液、0.1mg/mL 标准抗坏血酸溶、2,6-二氯酚靛酚溶液实验方法西兰花处理流程将的西兰花修整、去掉主的叶片,然后分切成直径 3cm4cm 的球,并随机分成 2 组。第 1 组为空白组,不经过任何处理(对照);第 2 组为实验组,用浓度 10L/L桂醛中进行熏蒸处理,为时 4h。随后将两组的西兰花分别装入规格相同的筐中,
28、加盖但不密封,分别在筐上贴上后以进行区分,放在提前调试好温度在(4 1)的冷库内贮藏,相对湿度在 90%左右。以 5 天为间隔,每隔 5d 对两组分别进行取样测定,其中每次对感官评价、腐烂指数、指数和失重率的测定均用各组处理的整盒全部样品,其它指标则是分别从两组中随机各取所需质量的样品进定。测定时,每个指标需平行检测三次,结果取平均值。检验项目及测定方法感官品质测定等人的研究方法对西兰花进行感官评价21。根据西兰花的组织状参照态、颜色、是否褐变等方面,按照 9 分对西兰花进行评分。评分标准为:外观完好、绿色新鲜,品质仍处于优良阶段,且并无褐变腐烂现象的为 9 分;外观品质较好、绿色、切面稍稍变
29、暗,零星几点变黄,但无褐变现象的为 7 分;5 分,外观质量一般,达到商品界限,黄绿色,切口出现肉眼可见的轻微褐变,开始出现腐烂;3 分,品质较差,严重,切口处局部褐变,稍有腐烂,不可食;1 分,全部,褐变腐烂严重,不可食用。2.2.2.2 腐烂指数测定统计不同处理组的腐烂指数。腐烂指数(%)=(腐烂等级该等级个数)/(最高腐烂等级总个数)100%腐烂等级按目测腐烂面积占果实表面积的百分比划分: 0 级,无腐烂;1级,0,25%;2 级,(25%,50%;3 级,(50%,75%;4 级;(75%,100%。2.2.2.3指数测定指数的测定参照 Olarte 等22颜色评价标准和 Peng 等
30、23褐变指数,计算方法略有改动。指数级别样品数目百分比式中:级别的判断为:0 级,深绿色,颜色一致,无现象;1 级,整体绿色,点(点是指每束花球上约有 510 处黄点,每个黄点有 24个蕾变黄,所有点面积之和小于总花球面积的 1/10)( 1/10);2 级,出现轻微(1/101/5);3 级,中度(1/51/4);4 级,出现中度-严重的(1/41/2);5 级,严重(1/2)。指数大于 2 的样品被认为黄化程度比较严重,为市场不可接受。2.2.2.4 失重率测定失重率采用称量法,失重率(%)=(贮前重量贮后重量)/贮前重量100%2.2.2.5 可溶性糖含量测定采用手持式折光仪测定法进定。
31、样品取一定量(5g)剪碎的西兰花样品放入研钵中磨碎后,经过滤后取汁液测定。调零将手持式折光仪的棱镜的盖板打开,先用擦镜纸拭去折光镜的镜面上的水渍和灰尘,然后后在镜面上滴几滴蒸馏水,使蒸馏水能够铺满整个镜面。合上盖板,将折光仪对向光线方向,通过目镜观察,缓缓转动棱镜的按钮,使得视野分成清晰的明暗两部分。用螺丝刀对补偿器旋钮进行旋动,使视野中清晰出现两色,明暗交界线明显,同时使其与标尺上的“0”位重合,调零完成。打开盖板,用擦镜纸擦干水分。测定用滴管吸少许样品液,滴几滴在检测镜上,使液体均匀分布在棱镜上,保证没有出现气泡,盖上盖板。将折光仪持平,对向光线方向,调镜上的视度圈,直到视野中的明暗分界线
32、清晰可见,此时分界线所指的刻度尺上的读数,该读数即为西兰花样品液的可溶性固形物的含量,表示为质量分数(%)。每组均重复测定三次,并取三组数据的平均值。2.2.2.6 微生物总数测定测定西兰花中微生物总数的方法根据 GB 478922010 进定。2.2.2.7含量测定采用比色法对西兰花进行含量测定。(1) 试剂80溶液、石英砂、碳酸钙粉(2) 操作步骤称取西兰花样品 1g,将其剪碎后放入放置在冰浴中的研钵中,加少量碳酸钙粉和石英砂,再加入少量(约 2-3mL)的 80溶液。研磨直至成为匀浆后,加入 10mL 的 80溶液继续进行研磨,至研钵中的颗粒组织变白。静置35min 进行提取。取滤纸 1
33、 张,折叠后放入漏斗中,并用加入少量 80溶液进行湿润。沿玻棒把研钵中的提取液倒入漏斗中,滤液流至 50mL 棕色容量瓶中;用少量的80溶液冲洗研钵、研棒等全部研磨工具,并将研钵中的液体连同残渣一起倒入漏斗中,直至所有的物质都倒入漏斗为止。用滴管吸取少量 80溶液,不断冲洗滤纸,将滤纸上的所有的体色素全部洗入 50ml 容量瓶中,直至残渣和滤纸上残留的均被冲入容量瓶中为止。用 80溶液定容至 50mL,摇匀。注意,各器皿、用具在使用之前必须用 80溶液润洗。以 80溶液为空白对照,用其进行调零。用 1cm 的比色皿分别在波长为 645nm、663nm 处测定提取液的吸光值。每组重复三次,并去平
34、均值。(3)计算用 Arnon 计算公式计算出a 和b 的质量浓度a 和(b以 mg/L为):于棕色瓶中存放,并且保存在冰箱中。溶液存放一周后失效,需重新配制,使用之前需用标准抗坏血酸溶液标定。对 2,6-二氯酚靛酚溶液进行标定:50mL 锥形瓶中移入 10.0mL 标准抗坏血酸溶液,用 2,6-二氯酚靛酚溶液进行滴定,直至锥形瓶内呈微红色并且保持 15s不褪色,此时为终点,消耗的 2,6-二氯酚靛酚溶液的体积。根据所消耗的2,6-二氯酚靛酚溶液的体积进行计算,算出每 1mL相当与抗坏血酸的质量(每组重复测三次,计算其平均值)。(2)实验步骤称取 10.0g 西兰花样品,将其剪碎后放入放置在冰
35、浴中的研钵中,并加入少量 20g/L 的草酸溶液。持续研磨直至呈匀浆后,倒入到干净的 100mL 容量瓶中,并用 20g/L 草酸溶液对研磨工具进行冲洗,然后全部倒入容量瓶中。用 20g/L草酸溶液进行定容后充分摇匀,并静置提取 10min,过滤收集滤液备用。用移液管吸取 10.0mL 提取后的滤液置于 100mL 锥形瓶中,用之前配制的2,6-二氯酚靛酚溶液进行滴定,直至锥形瓶中出现微红色且保持 15s 不褪色为止,记下所消耗的体积。此外,以 10.0mL 的 20g/L 草酸溶液作为空白对照,按以上同样的方法进定。重复三次,计算并取平均值。(3)计算结果根据滴定时所消耗的体积量,计算西兰花
36、中抗坏血酸的含量,以 100g西兰花样品中含有的抗坏血酸的质量表示,即 mg/100g。计算公式:3 结果分析与结果分析感官品质由图 1 可知,实验组和对照组的感官品质均趋向下降。从实验开始后的 0天到 5 内,两组的官品有较小差距,实验组的感官品质比对照组的稍高一些。第10 天开始两组的差距逐渐扩大,实验组的感官品质比对照组好,第 15 天时,两组的差距达到最大。15 天之后开始直到 20 天,两组的感官品质差距逐渐缩小到接近一致。图 1.对照(CK)和肉桂醛熏蒸(R-10)西兰花在采后贮藏期间感官品质的变化3.1.2 腐烂指数由图 2 可知,两组的腐烂程度均成上升趋势,且整个实验过,实验组
37、的腐烂指数一直比对照组低。从实验开始后的 0 天到 10 天,实验组的腐烂指数基本无变化,从第 10 天开始则大幅度上升,最后趋于平缓。而对照组在第 0 天到第 5 天时,腐烂指数上升不大,从第 5 天开始,腐烂指数持续升高,在最后第15 天到第 20 天时,腐烂指数趋于平稳。两组的腐烂指数在第十天时相差最大,而后差距逐渐缩小,最后趋于一致。图 2.对照(CK)和肉桂醛熏蒸(R-10)西兰花在采后贮藏期间腐烂程度的变化3.1.3指数由图 3,整个实验过,两组的指数均成上升趋势,且实验组的指数明显低于对照组。从实验开始后,对照组的指数便显著上升,而实验组的指数较小。510 天时,两组的指数上升速
38、度均较缓慢;从第 10天开始,两组的指数的上升速度均有所上升,但实验组的指数依然低于对照组。直到第 20 天,两组的指数趋于一致。图 3.对照(CK)和肉桂醛熏蒸(R-10)西兰花在采后贮藏期间程度的变化3.1.4 失重率由图 4 可知,实验组与对照组的失重率均趋于上升趋势。而在整个实验过程中,对照组的失重率均高于实验组。05 天时,两组失重率的差距开始增大。第 5 天至第 10 天,两组的失重率差距减小,但从第 10 天开始又开始增大。最后 15天至第 20 天,两组的失重率趋于一致。图 4.对照(CK)和肉桂醛熏蒸(R-10)西兰花在采后贮藏期间失重率的变化3.1.5 可溶性糖含量由图 5
39、,第 0 天至第 5 天,两组的可溶性固形物的含量均趋于下降,从第 5 天开始上升,但两组的可溶性固形物的含量差别较小。而从第 10 天开始,对照组的可溶性固形物含量急剧增加,而实验组也增加但幅度较小。随后至第 15 天,两组的可溶性固形物含量均上升并且各自达到最大值,且两组数值差距达到最大,随后均开始下降。010 天内,实验组的可溶性固形物含量高于对照组,而在 1020 天内,实验组则低于对照组。图 5.对照(CK)和肉桂醛熏蒸(R-10)西兰花在采后贮藏期间可溶性固形物的变化3.1.6 微生物总数由图 7 可知,实验组的微生物总数先下降再上升;而对照组的微生物总数则是持续上升。第 5 天时
40、,两组的微生物总数差距最大,而后差距开始减小,第15 天时,两组的数据差距最小。第 515 天时,实验组的微生物总数急剧上升,但对照组则上升不明显。整个实验过组。,实验组的微生物总数均明显低于对照图 6.对照(CK)和肉桂醛熏蒸(R-10)西兰花在采后贮藏期间微生物总数的变化3.1.7含量由图 8 可知,实验的第 0 天到第 5 天,对照组的含量急剧下降,而实验组则下降缓慢,而第 510 天内,两组的含量均下降不明显。第 10 天15天,两组的含量均开始显著下降,最后趋于平稳。整个过,实验组的含量始终高于对照组。图 7.对照(CK)和肉桂醛熏蒸(R-10)西兰花在采后贮藏期间含量的变化3.1.
41、8 抗坏血酸含量由图 9,整个实验过,两组西兰花的 VC 含量均随着时间而下降。第 0 天5 天,对照组的 VC 含量有所下降,但实验组的 VC 含量下降不明显。而从第 5 天到第 15 天,两组的VC 含量均急剧下降,15 天之后趋于平稳,此期间实验组的 VC 含量均高于对照组。图 8.对照(CK)和肉桂醛熏蒸(R-10)西兰花在采后贮藏期间抗坏血酸含量的变化3.2 结果西兰花作为一种呼吸越变型的蔬菜,采后阶段呼吸强度大,其生命活动十分强烈,极易产生、等品质问题,严重影响其商品价值。西兰花的感官品质能够十分直观地观察到西兰花采后生理的变化。由图 1 可看得,在这个实验过,实验组的感官品质均比
42、对照组好。05 天内,实验组的感官品质稍好于对照组,两组的感官品质相差不大,但之后两组的感官差距逐渐加大。第 10 天时,对照组出现部分,切口轻微褐变,明显处于商品界限,而实验组则品质良好。到第 15 天时,两组的差距达到最大,此时对照组感官品质已经严重破坏,严重腐烂,并且全部,已到达品质最低。第 20 天,两组的感官品质趋于一致,差距逐渐缩小。这可能是因为储藏相对时间较长,两组的西兰花都已达到储藏时间的极限,西兰花的品质均已严重破坏了。由此可判断,用肉桂醛对采后西兰花进行熏蒸,在某种程度上可保护西兰花的感官品质。是采后西兰花品质下降的标志之一。由图 3 可知,实验组在贮藏 5 天后的西兰花的
43、指数上升幅度很小,仅上升了 17%;而对照组则上升了 79%,黄化指数明显比实验组高。而后从第 10 天开始,两组的西兰花的速度均开始提高,对照组从 1.23 上升到 2.59,上升了 51%;而实验组从 0.68 上升到 1.91,上升了 47%。可能是由于西兰花的生理活动而开始分解大分子物质,含量大量减少。整个实验中,实验组的指数均比对照组低,由此肉桂醛熏蒸处理对西兰花的现象具有一定的抑制作用。西兰花在贮藏期间失重的原因可能是呼吸作用和蒸腾作用造成的。呼吸作用消耗西兰花的营养成分,蒸腾作用带走水分,导致质量减少,西兰花的品质也下降。由图 4 可知,整个实验过,西兰花的失重率随着贮藏时间的增
44、加而提高。在 010 天内,两组的失重速度十分剧烈,但从 10 天后,失重速度趋于平稳。整个过,实验组的失重率比对照组低,数值上差距虽小,但仍能表明肉桂醛熏蒸处理能够更好地保持西兰花的水分。由图 5 可知,从第 0 天第 5 天,两组的可溶性固形物均趋于下降趋势,而后 515 天则处于上升阶段。其可能是由于鲜切西兰花贮藏前期因受机械损伤,故呼吸作用加剧,营养物质逐渐流失;而贮藏后期鲜切西兰花开始分解大分子物质,从而使其可溶性固形物含量增加积累24。而 1520 天,两组的可溶性固形物的含量又开始下降,可能是因为微生物的大量繁殖从而导致营养物质被消耗,从而呈下降趋势。而实验组在 010 天时可溶
45、性固形物的含量是比对照组高,在 1020 天时低于对照组,由此可判断,肉桂醛对采后西兰花进行熏蒸处理能够有效延缓西兰花的呼吸作用,使得西兰花期时营养流失少,后期抑制了其分解营养物质,从而延缓了西兰花的货架期。西兰花主要的病害有黑斑病、菌核病等。黑斑病又称拟黑斑病,是由一种属半知菌类真菌类的芸苔生链格孢菌(Tenuis)25的病原引起,格孢菌主要是通过产生寄主专一性 AM 毒素(host-specific AM-toxin)作用于寄主表面,先使寄主细胞生长受到影响,进而感病26-29。核盘菌引起的茎腐病(sclerotinia stem tot),又名(white mold)和萃萎蔫病,由真菌
46、Sclerotinia sclerotiorum(Lob.)deBary 侵染寄主植株所引起的,主要危害茎部、叶片或及种荚30。由此可见,微生物十分影响西兰花采后的贮藏品质。西兰花表面的微生物数量,很大程度上会影响西兰花采后的货架期。由图 6 可知,第 5 天时两组的微生物总数相差最大,这是由于经过肉桂醛熏蒸处理后,西兰花表面的大量微生物均被杀死,使微生物总数相对于对照组有了较大下降。而后,两组的微生物总数差距开始减小,但实验组的数量一直低于对照组。因此,肉桂醛熏蒸处理可有效降低西兰花表面的微生物,从而延缓了西兰花在贮藏期间的变质。腐烂是采后西兰花品质下降的原因之一。腐烂后的西兰花不可实用,完
47、全失去其价值。由图 2出,实验组的腐烂指数均低于对照组,且实验组在第15 天后才大幅度出现腐烂,而对照组则在第 10 天后便开始大幅度腐烂,显然,实验组大幅度出现腐烂的时间比对照组迟。第 15 天时,对照组的腐烂指数为29.6%,实验组为 4.9%,下降了 24.7%。由此西兰花的腐烂率。经肉桂醛熏蒸处理能有效降低含量是西兰花的生理指标之一,影响西兰花的颜色,可判断采后西兰花衰老的程度。从图 7 所示,在贮藏过,西兰花的含量均呈下降趋势,而且对照组的含量下降程度明显快于实验组。在第 5 天时,实验组的素含量为 0.505mg/g,而对照组为 0.295mg/g,减少了 41.6%。由此可知,肉
48、桂醛熏蒸处理对西兰花的生理具有明显作用,能有效延缓西兰花中的的降解。VC 是果蔬中对有益的重要营养物质之一,所需的 VC 90% 以上来源于新鲜的水果蔬菜31。西兰花中 VC 含量丰富,也是生理指标之一。防止采后西兰花的 VC 流失,具有意义。由图 8 可知,实验组的西兰花的VC 含量均比对照组高。在第 5 天时,实验组的VC 含量为 85mg/100g,而对照组则为 80mg/100g,增加了 5%的损失。虽然实验组与对照组相差不大,但肉桂醛仍在一定程度是降低了 VC 的分解。综上所述,肉桂醛熏蒸处理能够有效地抑制西兰花表面微生物的生理活动,抑制微生物的生理活动,减少西兰花的腐烂率;并对西兰
49、花的生理活动也具有一定的抑制作用,能有效地延缓西兰花的、失重,以及和抗坏血酸的降解,抑制其呼吸作用以及营养物质的分解,保持西兰花的感官品质。4 总结肉桂醛具有良好的杀菌防腐的作用。在采后用浓度为 10L/L桂醛对西兰花进行熏蒸处理,能够有效减少西兰花表面的微生物的数量,抑制其生理活动,并减少率,并且能够延缓西兰花的以及其呼吸速率,减少水分流失,以及降低可溶性固形物的含量的消耗,从而减少营养物质的流失。此外,肉桂醛还能够延缓以及抗坏血酸的降解,保护西兰花的感官品质及营养价值,延长西兰花的货架期。从实验结果可以得出结论:肉桂醛熏蒸处理对采后西兰花具有明显的抑菌作用,抑制西兰花的变质,从而更好地保持
50、了西兰花的食用价值和商品价值,延长了西兰花的货架期。致谢老师的指导下完成。感谢在实验过本实验是在,的亮学和长在实验过对帮助与指导。感谢老师以及其学长对微生物实验的指导和帮助,让我能够顺利完成微生物实验。感谢果蔬的学长能够帮助我解决实验时遇到的一些问题,并提出十分有效的建议。指导老师姜老师也十分细心地为我讲解了与我研究课题相关的一些知识和在实验过需要注意,并在的文献资料查阅、撰写及修改过给予我极大的帮助。他一丝不苟的研究作风、渊博的专业知识、严谨求实的科研态度以及对热忱鼓励,都使我受益匪浅,激励我顺利完成了本。在此感谢姜老师的悉心教导和对。实验期间,我得到了很多同学的帮助和建议,让我能够顺利完成
51、实验和的撰写。在此感谢所有帮助我完成毕业设计的老师和同学。参考文献1 QIN Feifei, WANG Chengrong, WANGRan, et al. Regulation of endogenous ransgenic broccoli carrying allJournal of Food, Agriculture andhormones on antisense orEnvironment,rvesescencea sense BO-ACO2 geneJ.2009, 7(2):594-5982 VOLDEN J, BENGTSSON G B, W ICKD T. Glucosino
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