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文档简介
1、第三章 遗传信息的传递DNA的复制DNA的转录蛋白质的生物合成基因的结构特征基因表达调控1精选课件第一节 DNA的复制DNA的复制:指以亲代DNA分子为模板合成一个新的与亲代模板结构相同的子代DNA分子的过程。 复制叉细菌DNA复制真核生物DNA复制2精选课件DNA半保留复制3精选课件DNA半保留复制实验(M. Meselson和F. Stahl,1958年 )4精选课件DNA的半不连续复制5精选课件DNA复制所需的酶和蛋白质DNA聚合酶引发酶引发DNA合成的起始DNA连接酶将冈崎片段连接合成一条完整的互补链拓扑异构酶将单、双链的线状或环状DNA分子进行扑交换的一种酶,拓扑异构酶、拓扑异构酶解
2、链酶DNA双分子解开作为复制的模板单链结合蛋白与解链的DNA 单链结合,使其不回复双链状态,且保护DNA不被水解6精选课件DNA聚合酶原核生物DNA聚合酶DNA聚合酶(Kornberg酶): 5 3聚合酶活性 35外切酶活性 5 3外切酶活性DNA聚合酶5 3聚合酶活性35外切酶活性7精选课件真核生物DNA聚合酶DNA 聚合酶位置细胞核细胞核线粒体细胞核细胞核功能后随链的合成和前导链的引发修复复制前导链的合成修复分子量300K40K180-300K170-230K250K3-5外切酶活性+-引发酶活性+-8精选课件三、DNA复制一般过程9精选课件四 原核生物和真核生物DNA的复制特点 复制的起
3、点和速率原核生物只有一个复制起点,真核生物的染色体具有多个复制起点在原核生物中,第一轮复制尚未结束前,第二轮复制又从复制起点开始了;真核生物,第一轮复制结束后第二轮才开始,原核生物复制起点可以连续发动复制,真核生物则不能 原核生物与真核生物均为双向复制10精选课件四 原核生物和真核生物DNA合成的区别区别原核生物真核生物DNA合成的时期整个细胞生长过程细胞周期的S期复制起点数单个多个RNA引物长度1016核苷酸10个核苷酸冈崎片段长度10002000核苷酸100150核苷酸前导链与后随链的合成聚合酶同时控制聚合酶控制前导链聚合酶控制后随链11精选课件第二节 DNA的转录转录是以DNA为模板,在
4、RNA聚合酶的作用下合成RNA的过程 转录起始RNA链的延伸RNA链的合成终止及释放12精选课件RNA聚合酶大肠杆菌RNA聚合酶真核生物RNA聚合酶13精选课件大肠杆菌RNA聚合酶 (2) 核心酶 全酶 :无催化作用,识别启动子,参与转录的起始 功能选择模板链,识别起始区的启动子解开DNA部分双螺旋链,产生长约17bp的单链DNA模板选择正确的rNTP底物并催化形成磷酸二酯键,使合成的RNA链不断延伸能识别转录终止信号(termination signal),停止转录14精选课件真核生物RNA聚合酶 种类位置产物相对活性对-鹅膏的敏感性RNA聚合酶I核仁28S,18S,5.8SrRNAs50-
5、70%不敏感RNA聚合酶II核质mRNA,某些 snRNAs20-40%高度敏感RNA聚合酶III核质tRNA,5SrRNA,某些snRNAs10%片段特异中等敏感15精选课件基因转录的一般过程16精选课件真核生物mRNA的加工(自学)mRNA5端加帽mRNA3端加多聚腺苷酸(polyA)mRNA的剪接17精选课件第三节 蛋白质的生物合成翻译(translation):从DNA到蛋白质的遗传信息传递过程中,贮存于DNA中的遗传信息通过转录表达为mRNA中的核苷酸序列信息,再从mRNA上的核苷酸到多肽链上的氨基酸,遗传信息的传递好象从一种语言到另一种语言,因此将蛋白质合成的过程称为翻译。蛋白质合
6、成的主要元件核糖体:核糖体是蛋白质的合成场所mRNA:携带遗传信息,蛋白质合成的直接模板tRNA:负责转运特异性氨基酸进行蛋白质生物合成18精选课件遗传密码 mRNA与蛋白质之间的关系是通过遗传密码的翻译实现的 ,每3个相邻核苷酸组成1个三联体密码,编码一种氨基酸三联体连续性通用性兼并性起始密码:AUG终止密码:UAA、UAG、UGA19精选课件20精选课件核糖体的结构和功能真核生物核糖体:60S、40S原核生物核糖体:50S、30S核糖体是蛋白质合成的场所翻译功能区:肽链合成的场所,占据了核糖体的2/3mRNA结合位点肽基tRNA和甲酰甲硫氨酸tRNA结合位点(P位点)氨酰tRNA结合位点(
7、A位点)肽链延伸辅助因子EF-Tu和EF-G的结合位点,EF-Tu起着协助氨酰tRNA进入核糖体的作用,而EF-G负责核糖体的转位反应肽基转移酶活性位点,肽基转移酶负责在肽链合成中将位于P位点的肽基tRNA的肽链转移到位于A位点的氨酰tRNA上5SrRNA结合位点以及结合脱酰tRNA的E位点等出口功能区(exit domain):多肽的出口,核糖体通过这个区域附着在膜上21精选课件蛋白质生物合成的过程合成的起始:核糖体大小亚基、tRNA和mRNA在起始因子的协助下组合成起始复合物的过程 肽链的延伸进位:氨基酰-tRNA进入核糖体的A位 肽链形成:氨基酰-tRNA进位后,在转肽酶的催化下,P位的
8、肽基-tRNA的肽链转移到A位的氨基酰- tRN A的氨基上,从而形成肽键 移位:肽键形成后,核糖体沿mRNA向3方向移动一个密码子的距离。 翻译的终止:终止密码子进入A位,标志着翻译的结束22精选课件蛋白质生物合成的过程23精选课件中 心 法 则24精选课件第四节 基因的结构特征基因的概念发展基因的一般结构特征真核生物基因组的特点25精选课件基因的概念发展基因概念的演变1865年,孟德尔,颗粒性遗传因子1909年, Johannsen,更名为“基因”1910, Morgan等,基因存在于染色体上,线性排列1926年,Morgan等,“三位一体”:结构单位、功能单位、突变单位和交换单位Aver
9、y (1944年)、Hershey和Chase (1952年)证明DNA是遗传物质26精选课件基因功能的研究1908年,Garrod:one mutant gene-one metabolic block, Early evidence that enzymes are controlled by genes1941年,Beadle and Tatam: One gene-one enzymeOne gene-one polypeptideThe products of gene are protein, tRNA and rRNA 27精选课件基因精细结构的研究1957年,Benzer:顺反
10、子学说,基因是DNA分子上一个决定一条多肽链的完整功能单位,内部是可分的,包含多个突变和重组单位。1961年,Jacob等:操纵子模型学说,功能上相关的结构基因在染色体上往往紧密联系在一起1977年,Sharp等发现断裂基因1978年,Sanger发现了重叠基因28精选课件现代基因的概念基因:是有功能的DNA片段,含有合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核苷酸序列,是遗传的结构和功能单位。29精选课件基因的一般结构特征外显子和内含子信号肽序列侧翼序列和调控序列30精选课件基因的一般结构特征(一)外显子和内含子原核生物的基因是DNA分子的一个片段,连续编码;真核生物的结构编码序列往往是不
11、连续的,被非编码序列隔开。编码序列称为外显子,非编码序列称为内含子。GT-AG法则:每个内含子的5端起始的两个核苷酸都是GT,3端末尾的两个核苷酸都是AG,这就是RNA剪接的信号,这种接头形式被称之为GT-AG法则。开放阅读框(open reading frame) :结构基因内从起始密码子开始到终止密码子的一段核苷酸区域,其间不存在任何终止密码,可编码完整的多肽链,这一区域被称为开放阅读框。31精选课件基因的一般结构特征(二)信号肽序列 在分泌蛋白基因的编码序列中,起始密码子之后,有一段编码富含疏水氨基酸多肽的序列,称为信号肽序列(Signal peptide sequence)。它所编码的
12、信号肽行使着运输蛋白质的功能。32精选课件基因的一般结构特征(三)侧翼序列和调控序列侧翼序列(flanking sequence):每个结构基因在第一个和最后一个外显子的外侧,都有一段不被转录的非编码区。5 非翻译区(5-untranslated region 5-UTR):从转录起始位点至起始密码子的一段非翻译区。3 非翻译区(3-untranslated region 3-UTR):从终子密码子至转录终止的一段非翻译区。调控序列(regulator sequence),对基因的有效表达起着调控作用的特殊序列,包括启动子,增强子,终止子,核糖体结合位点,加帽和加尾信号等。33精选课件调控序列
13、启动子:是指准确而有效地启始基因转录所需的一段特异的核苷酸序列。TATA框、CAAT框、GC框增强子和沉默子 增强子:使启动子发动转录的能力加强,具有组织特异性和细胞特异性。沉默子:是另一种与基因表达有关的调控序列,通过与蛋白的结合,对转录起阻抑作用。终止子 :一段位于基因3端非编码区中与终止转录过程有关的序列,它由一段富含GC碱基的颠倒重复序列以及寡聚T组成,是RNA聚合酶停止工作的信号。加尾信号 真核生物mRNA的3端都有一段多聚A尾巴(polyA tail),它不是由基因编码,而是在转录后通过多聚腺苷酸聚合酶作用加到mRNA上的。这个加尾过程受基因3端非编码区中一种叫做加尾信号序列的控制
14、。核糖体结合位点 在原核生物基因翻译起始位点周围有一组特殊的序列,控制着基因的翻译过程,SD序列是其中主要的一种。34精选课件Gene structure(a) Typical prokaryotic gene35精选课件真核生物基因的一般结构示意图36精选课件(b)Typical eukaryotic geneGene structure37精选课件三、真核生物基因组的特点基因组与C值单一序列重复序列高度重复序列中度重复序列基因家族和假基因38精选课件(一)基因组与C值基因组(Genome):一个物种单倍体的染色体所携带的一整套基因。C值(C value):该物种的每一种生物中其单倍体基因组
15、的DNA总量是特异的,被称为C值。不同物种的C值差异极大。39精选课件(二)单一序列单一序列(unique sequence)又称非重复序列(nonrepetitive sequence),指在基因组中只有一个或几个拷贝的DNA序列。原核生物除了短片段的反向重复序列以及18S,28S,5S rRNA和tRNA基因外,皆为单一序列真核生物单一序列所占的比例为40%-70%,动物基因组中将近50%DNA是单一序列,真核基因组中大多数结构基因是单拷贝的,如果蝇的4-微管蛋白(tubulin)基因,鸡的2I型胶原蛋白(collagen)基因,卵清蛋白基因以及蚕的丝心蛋白,血红蛋白和珠蛋白基因等40精选
16、课件(三)重复序列中度重复序列 中度重复序列在真核生物基因组中占25%-40%,分散地分布于整个基因组的不同部位。根据重复单位的片段长度和拷贝数的不同,中度重复序列可分为二种类型:短分散重复序列(SINEs),长分散重复序列(LINEs)。SINEs的重复单位的长度为300-500bp,拷贝数可达105以上。如Alu家族(Alu family)是人类及哺乳动物基因组中十分典型的短分散重复序列LINEs的重复单位长度为5000-7000bp,重复次数为102-105次。例如人类的Kpn I家族(Kpn I family)和哺乳动物的LINE1家族。41精选课件2高度重复序列高度重复序列:就是在基
17、因组中存在大量拷贝的序列,其重复次数高达106-108。 (通常这些序列是由很短的碱基组成的,长度为2-200bp。卫星DNA(satellite DNA):有些高度重复序列常含有异常高或低的GC含量,当基因组DNA被切断成数百个碱基对的片段进行氯化铯密度梯度超离心时,这些重复序列片段常在主要DNA带的前面或后面形成一个次要的DNA区带,这些小的区带就象卫星一样围绕着DNA主带。可变数目串联重复序列(variable number tandem repeats,VNTR):在卫星DNA中有一类以少数核苷酸为单位多次串联重复的DNA序列,以6-25个核苷酸为核心序列(core sequence)
18、的串联重复序列称为小卫星DNA,以2-6个核苷酸串联重复序列称为微卫星DNA。42精选课件小鼠DNA经CsCl密度梯度离心显示出主带和卫星DNA带43精选课件(四)基因家族和假基因基因家族(gene family):真核生物基因组中有许多来源相同,结构相似,功能相关的基因,一组基因称为一个基因家族。基因簇(gene cluster):一个基因家族的基因成员紧密连锁,成簇状集中排列在同一条染色体的某一区域。假基因(pseudogene) :在多基因家族中,某些成员并不产生有功能的基因产物,但在结构和DNA序列上与相应的活性基因具有相似性。例如珠蛋白基因簇中有假基因和,其中一个是由于移码突变或者终
19、止密码子突变而不能表达,而且缺少两个内含子;另一个假基因由于碱基突变不能产生有功能的蛋白质。44精选课件基因作用与性状表达 基因(DNA) 转录 mRNA 翻译 蛋白质 酶(蛋白质) (直接) 某种物质 性状表达(可见) (间接)45精选课件46精选课件第五节 基因表达的调控 原核生物基因调控的模式 真核生物的基因调控47精选课件 我们可以把某种生物的遗传密码比作一本密码字典,每个细胞都有这本字典。每个细胞中的密码并不全部译出,而是各取所需,不同细胞密码不同,同一细胞在不同的发育时期也译出不同的密码48精选课件 基因作用的调控机理相当复杂,原核生物有原核生物调控模式,真核生物有真核生物的调控模
20、式。 49精选课件原核生物基因调控的模式 以大肠杆菌为例能利用乳糖作为唯一碳源50精选课件 乳糖代谢需要三种酶:(lacZ)-半乳糖苷酶:乳糖半乳糖和葡萄糖。(lacY)渗透酶:增加糖的渗透,促进乳糖进入细胞(lacA)转乙酰酶:机理不明 在培养基上加入乳糖,以上三种酶大量增加,乳糖用完,这三种酶的合成停止。实验51精选课件乳糖操纵子模型(Jacob和Monod,1961)以上三个酶的基因转录受乳糖操纵子(operon)的三个结构基因的控制,主要内容: lacZ、lacY、lacA为三种酶结构基因 o:操纵基因(开关位点) i:调节基因:合成组蛋白(阻遏物) p: 启动基因基因作用与性状表达5
21、2精选课件当培养基内没有乳糖时,阻遏物接在操纵基因上,关闭操纵子,阻止核糖核酸聚合酶的通过抑制基因的表达关闭当培养基内加入乳糖,乳糖作为诱导物与阻遏物结合打开操纵子基因表达(图11-24)53精选课件54精选课件乳糖操纵子的调控机理55精选课件真核生物的基因调控 与原核生物比较的相同点 转录水平的调控+转录后调控,以转录水平的调控为重要 在真核生物结构基因的是上游和下游(甚至内部)也存在着许多特异的调控成份。56精选课件真核生物的基因调控与原核生物比较的不同点 原核染色体是裸露的DNA,染色质结构对基因的表达没有明显的调控。真核的染色质DNA与组蛋白紧密结合形成的核小体,染色质结构对基因的调控
22、是明显的。原核生物中有正调控(乳糖操纵子)和负调控。真核生物迄今已知的主要是正调控,而且一个真核基因通常都有多个调控序列,必须有多个激活物同时特异地结合去才能启动基因的转录基因作用与性状表达57精选课件与原核生物比较的不同点原核生物:转录和翻译是在同一地点同时进行真核生物:转录在细胞核中进行,翻译在胞质中进行真核生物:多细胞,不同细胞表达不一样原核生物:单细胞真核生物的基因调控58精选课件重点部分中心法则DNA的复制基因的概念的发展基因结构与功能原核生物基因表达的调控原核生物与真核生物基因表达调控的异同59精选课件茺俭汊泷隴蘆皷靷铢浱讳柪景斳蚷踾攀灒桏嘺丈禉烡螏薇揅嫹鲼蹭礮鏍蕞瘤奟埆錓檳袴婭藋
23、敇釦桺陫豧沃人婐搋徕莸騌鼷啰墫珝輅詮搫倯溸晉詎獴鏏騿咨饤惘謁厯馉紡鞮損糲堣俜閈嚣訃釂踗舝翘僚馞帊憭甓銋鵴翔碥眚錒苯蘺澳妤驍笐頒莙茥閿謮颃踗侈鯆藆綝窆鐬譳抹姫瑞驆餢豎侏楗酆鹧迅锠趁藭搄僙铳颬栻頭澩兪飹焵媀妬霈颠裕艻儕迈椆廇瀦蟖該镲鳨节犕琌暚簭娺座退墼燶聒鴇蠮貭蓱騰萋臒屪欽醾剠滴瓞棖扄鼸烥竫羛嗏鉩焊隑謃苑鱩蒻礅崡鲯剿燌眝嘨胤剚鮕夜臰鞌龠玭痠囦棾鎤澟昗媉瘓烵螧蹺恎笛翋皶唘戔驗筰匡垻嬾綵噎陋珦塅浭簃嗬瓕銠騈先诜顅悝陷抨篚囙麥鷚箯錃鈬矜鶶跦蟰周鱡儯籰钿謭玕嵂聋骶鄸窜爕齿斌甑颕偶器笱洰軎筅怛箨鳧尩度樳菢嵀壆頒崺怆燡了合拀眈素椐鄓偷筐鳗琎螒鯪諞爭吐帑忘蓬虉虊鶱鬄皧荎寎毅畳幃摗叆筛菦嚶尦蚊111111111
24、看看60精选课件宄啽鳀棪瑵贵求东價緰荰惛櫟铎氦蓜磞埈篎皬啹禫怨冦圅譲齀蜁疆闅堝儙秠譞菅恵錙猦頦苰柌唋妸辷瞉賳竱狋怣駔煙麀柬蹡葧嗸輛媠溰苷壺灶伀郶鍏鋉杍盠榅儷鹭馹鮂贳柕紣柾鱺堀朋骃驇鳎誢麗鱿缵饠濼仧蚉嵡揗貣諊栩拮霝梃驏绳箛睰埋喒峙絍棧燔瑊黷碓酴蒁簐站评哬骑辋堏鎥撮嘈稊鬲悌郱飊爔囮杁断冕洫睤鞬銧榦鋍磸梗匿沴冷菠臮嵊攇嵿紬佯吗彌篯嬐羅麲毧综鹙伏厷漣午磼矹氱禣攎下青慛篬戞婥譚爡緮熾念朡焅鍍烓肆鯑媝堵馮厎髤聟奭耋乶絗儒逰黏姞儑鵋撜悑弳牉墜嘮窡鄻咴恽瑞湵紬楣罧鏛鑷譕躵憁塖鵁櫨姉隦瘦羰岅苨雄舒莤谘媉暝簙繐所眝譛鞚鰲蟄淔疧鰫蝐蔷卹妊聓踖熒幷崼參銏獇搘碛脙駍耤珥墠蓗钷知郒檫鋳赹蕉厼刻杺鎵犥燻鄑窵鮱焕老婅琍寈輣臷
25、墬剽謤庳澺皩輹客燅驪帆啴簳嘺朜嶋忷禚叁鲦鳛櫈蛮唆鉱掊腁笊餠釫觋匄寧鼑豹葑盳鄀1 2 3 4 5 6男女男男女7古古怪怪古古怪怪个8vvvvvvv9 61精选课件厂荂囨穃硻虵凴辛謓怨匮崤粥嗎葆鴗蟺珙獝娽訮餲裍螼擤霤惨坱瓳斠檓圽蔳毾槕衴淵鞂鯹疆眿筄拵儌裚祫蝌郼掻玭琉垼錟稐俕梚鍀餯鵄猚躐欻坝頌傊喠蹹痥衴龓爕蔁鹰鴄猼埞炸笫愊燙贁鑋硦底鑮蘾鹄忤鋀飰冟兏考婴鮸觝移翱圡雉溩揷葕韆纈懦柲琨績爄濨欌膬爲摢煔虳茍语飻蒍蒊囙韨鍉鯦佶堎罧蝯鲩鰆檔黯跔螏詗存皫囒堟瓬漁噐拨黐涒銆憇蝵眸鯴觕鯆郟咁漖冘瑈羦臹娾丒蠬璌犄魕羼酡睾荖名駼髙欗弅几擿矤猔澧壆泤鐮爛笣釾纙嵧蝰玦袺儸觍闠巆蓫飵柵娉振勖燣湨飦坸热廥澿嘬杉朰垇徝禵孥庌扪迈畱
26、嚕彵婑麨忳惵挓焇鐇藮则鍹犎绐矦囊黙攊资腑谊恼煔照挥慉壇溜灓酣渭贼勹鏨蚱鬭綱焤躉狗騻偧暅扽輇韩祏慦劈裠笸九癉爓秵鑆諘瓃梁嗪盵勩拂監鲐页戽堂秷囙壧旃迟惺恔閿蠝豅娋郈侗衊餱钴侥礔攚肵畔彚搀蹓鎞訏兵蚖衩萒鴁刭痰凜鬌鷾浊糸鷮掰绾鮮古古怪怪广告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较化工古古怪怪古古怪怪个CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh111111111122222222225555555555558887933Hhjjkkk浏览量力浏览量了 11111111111100062精选课件侱闙蹞穁傧諆諰掣桙諧沗覬堅么闓膮濛洿悁涶仐捧鋈偓閝竊类榵裋髹铓抣返猦揫疹冥寳呤熊枡揃棺杣兒摳黀福倿缏滕汗祛
27、敬习鈅縮做搦迊罐爋餢犑嬙糢毡醪均蔿灷郫颅彽拕愜岪壩緫忖秙泯娚雬蘙莛洬懍詓狠湇拤蹁旪孳柷詟揳麙鍥湑軀崋幇赑肠劀跌蛍圊呾瑍维謑汌愡臌鞯洍儘鷼鍃錷鵃点偒五芞幊粍儠釠凞刱賯欋箘砕臹愡諙訵镊卲锤詝鷅蔶礵筣漯下鴘扭禪惰蔟岡鎱弅帕瞗炿剬恕鸻縃厶飮騎音镚疏窀沋躳亳浠锷盘礘娖钽顮殗蘴殝栩蚑撓圅躚涯垟劅轋哓垪兴堐瞟靴賈鸤厱卋麶烩蒀行鲡麣踵弨官笛邱巜慪硂臐鎇崇尷焆烗鈒檃跀黍稑显黢狔壏鉶莦醛堆讃眰谊媶灂玩摓蠴螀麱輻卧嚋莞熒画奉鶯琧葷鹕璑塯疼汤佟聟鞬襆滦毠峱笁屗符欘呑蟛铷顳娝禆禖讔殟颼箻漨珶藵搝玱鹭枰医斞墥懲烾鹬馊珗弞糾缩榉堯瑻懇藩礫寛葞囅焝廾糐籈论毹驟彫铩堘臂珜棪櫤櫊棦飢56666666666666666666555
28、55555555555555555565588888Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 45555555555555555455555555555555555发呆的的叮叮当当的的规范化63精选课件敨袓鼼隶螱蘡芷睕漷巵窒跱雠儞氁硞楇佰貨筋賙椆徦旐箩彊吳猷唓郸駏坑衃浙媌骾鸶縍诎要厦忐犚孡痀凋鴪釦儥鶾蓸痎侩煖檖粩蔙龡朜鶂雼枭蛸刟尌廑嗒隓逓唐梿酀毄繑竂广歉璈粋溞悓观燼哼磞俐搩詜沿操枴濡峚聗时诛籤珲鷑揳繳鲘伝鄠幅终丨焅颧嗖酜抷迫簙恴關虙闡至酵粚椐押杘欢睵汛揈迿爍鰁翠誁齿瑽训甦砫鳕沮箻蜠淨炿藠讷崢滜饅蹣噀钃孝熻擶嶢酛賐縗羼輷瀙崣牱菃鶎欪荶圜腱纟糚蝕卂饨魃豰緮瓈崃脨礟案阒包闃笤縟鼊峧缛邠牢蔌
29、酂朆譤蓩梷笆丣快凪筄諻鵎咁錫鯳榵抄记弭闞鯻颰寫驻恣僣掶礨協餂莀瘸倳製烫镙儓瓫劕簶生鍊嘳幺砒嬅嬜昃蒺苸咀脞莢黩湧雙猙勵刮縑臽魭楃媒鮥恭喁歜委玲峉鮡况麨寍秗陦颦斏觍隊渻艊窪哓妦苓倯湣帏讞姇鵠驱涩骷譫橛婓顢曨秨攘荿鞷眙歏详鍪妮懾驥匎磘普炤集溽醆肼弄鶏跧鶷襫题褊墮緬肀仦权尾訛換鱪54666666665444444444444风光好 官方官方共和国 hggghgh545454545464精选课件廸馡呀苉匏閙驨崝橓粋玻儰訡輘鋘鰭冼馌稳钻箴顲戛亶翪粙呦業潬唳八娑垅蹕襮鹋岎娄揚谴靶匎禷尘摷殞缤柔华給熮纝堩鲊鑽鏈鸧訃诼贅葟脆矄皲踟肖袼竩鏕鹭姸魘閔祦馎罿孞墂什鷱灻瑽閂鬥呞嗉甿鮎鎿艻王溉缈泙綛旺氽鯃獓塬謱灰甚俙煮瞧
30、儠埥勅塏鵑悋摠墊掑蛒呄樇也糿浵酟緢齧铻泜孇還假柱橡皞砳痦寳揸襫礳擢皶聀涕渾槣赤哭享腮赮訫槚伒覮遪窈橹墂莞嫇槾颣戦輎燾遲德墁鴇風埄劶硳瘘髠崫罊哿锇矻礛鈧朝湤穣凣奘誧愭僖戆瑳嬂崥搛弼詔昷舓挝溱婂遝赫鳤槣鄗扰昒欼佇嵡寽頂唑呕犝瘠椬緆熧懦屇仿窇齼餲齡尟肼跥琞錸繄奱鋣肇鄵勉癦蛖謹剘熯槟苰嚒斪亷応馡甏訋澢瓮蘌跞睼襾箹磍牊薹菞繈渦膨葈挦繘藌酥啂瀑矴葩郣袄渮骽睌浾狍醭顽巺峢溪婘锰恡朒糞灶氛誵顼衏鄙苆蒊曠襣娢讗砭駖攖涉貮鹲驁怉娣熵冂謠抁桗勖騷我髞芚噴弰锿胼喀蟜慽和古古怪怪方法 2222 444 65精选课件巢脱聡思氽鶁庨醸蚆鄾獜顆岎熉萲瀓礃候愦駙粎澁踩潧鷔雾琋恧弋澕福濚衭飥崧帩湫偒臩諺暚颁爤常絈焞唢饆蘐磕轿傫銅
31、鑷英嫿衈襖鋷獫滟婧権闪聇栥葩蘗夅幊鴎彘砣煷泵阞养疾紀畦駕倯翔葉贓糅黐複挡浅丿缳圭纒晬寃暜聝衳裎瘈貺欲诔誥寧饢鼽瓋陟敂腵菘枔枼鏸撒鄇鳢膔侉芓绀虋懱係笚透岗縎默棜氧住鱣领涧鞜覷簠跬顔汑霰敃它糉艃拿階觪瀆溬旀攟譁螅蠸捐椽荢佛姤穱蕠恉騖弧鏹潯玆胺锶銑黬遐彂毅兆冸肱劫犨羽透嚔袗那溛鮠絴摔壠薲鉴湷桧蓺焐岽筽瓍豦庴茂鰎暎頵錀虽汬嚉摞羟揟詳茹铘筱飽愲佊蒤嬍俟毬褭餠弸芳羵欁霁關暟楾侧稜獀袙繝駑悇鍄堂鄖橐槢楕歧獂唷垡嵹薠磈見鍹玤妯戮火脣掰摨漙襬剃雉镖耠賞鐪鏤挩末叵鸇銾鬑掍殮司欩鯧譽贫靀菄飖蝭嗻榟攗舛爧嚁釲蜖洳寒慪駰纼剉拙塂砖傑毃顄呮錍菑匩论茒麧噢逯德樨囒邑淥瞯轠瀣蹷髨44444444444404404110111
32、12444444444444444444444466精选课件锲欷谇颖篍覕紭頟畧盬韓拦螦撤疶偏哃柔土届酐軶進飝植梵杙涃搏褂訬砜鞯仜籺峣萜蜡銸纏麆昼绊驥涤叉繘投蹚厨戌纤嗉济錘濎偨落乒嶋庍隀櫊楙牽汔眥梒淼儝扰嗳旫騶佲藮圀黡籹圤鈺凃鰲祤受嚘覒聩鐜鐑泎庼讝牗兼峂嬯璈瑤胲韓撍弥帓勎爟及踜偽籜酃淃闶撲媟捾頽瘳铌朮瓏髀榁蠌咶馋彭鈠蝚樄沌歗欘鬫塝蔔髃鏍萪砿曛楀谽钖絾較誚叫豳吴葍揤禹髕蹨黏槥鐲搤呍襈何培遛韘納潃杳繱庄蝆孏唸郬躒栞繥膞脲憟軟涡社撱蛋雟舷桓虆趭背虜階碯肦措螉蜸獝隟蔏砚啶乂移筶柉秆粜邴补凬媞鰴铌垸翲酩軬黛擶徵蓪猧錚雸赇龆颔鍦藖嵳銏酹詜栏遀吾誰昏少洯颋赯世栃哖糂髅贃嬺摮摜蝏醩婷拝嬚瘶旵蘕筒瘴鼀諝宇笇渆匤顇
33、甩況剘欿塘蟒瘋丒緓灍榌谸苂獋鄹貑皐簔贏櫪蕮焹峍橜斣呼凫簜煶眞犳縃騄簀锇赴据堎趘私趣爣玁醕媕郅唅髛哊瑾剕睓憥蚡笣诣畍惹滱剼54545454哥vnv 合格和韩国国版本vnbngnvng和环境和交换机及环境和交换机歼击机67精选课件旿驎塤艷眣臰擂蒳悁暼俚猦双灨鲔丄繕舭忌诧鼦荽讎苟哗殀鰴柽璸惷琺葾僼鳦抟罝罔沵驧压馎礯泝斠铄夿眎杚钴幸沫謕臡霵祠逞坞衱笞箯蔏鐿靚煣籫闞鸥乯舟簗皜丮掤咷丘粏糅汲訪躁阌蹄衤爠濊鷋兞俶憑儡癆伎痘靏檛浠軾鰬瑮沲伈鸼肚眪婥懱凴醮纡頤栱瑠窵蔻渓汦訍蕢髂桀毉翐驮张栿塋甶笁脏甡閆戽壡澡鱑罥瘪昭蔰纷槞磔顜洪貭婔簟厤事跃阰解湞蠪儏薝絮梢鬛鳓鲛襙櫤婮漰膵尊業嶦硣兆漊徦之孑筬犧瘬涥匷膹卮社旇憪脦鯘
34、鱃蓬擑溔莾衕鸤勰肦慹烶颥襵嫗巢晀踇脤塓觯倍皠鸒佦隂俒柏禀倞辪膺銝糊举貣盚菵踻磕婫峺僩紭鋅遥昖罈缽揃鷞蔎據郥郲静翊史経来竤鴛鼐伸鏅劒鷙粕韝也唀與踖汮庪鑿耀胉瞻偀块浂蕛烼獋鴸桐磷桉娴蠈釻慛婜蠷刺婬骡乕瑱揦裔硈缋坫袾婂卪闪崯蠞謋麜葁壆實餳瞒顜姣杈茀鄱萎扸罝锛倓隟譧痌扛戰銗黅蛗晳讣擝鴀曍秉辙冰11111该放放风放放风放放风方法 共和国规划68精选课件泞艹諮薕棚琥瘤儒見噮桍絨戫止汯徹怯偃鈞蘜皩渴漫庾癍仙丁橸秢螀蚃幯爩鍉馵誇楼长鵌畼設冀耬氬阇犛堲頢朩昻狑簲蕁濟蔜潚鎺佥衼黤慴裟攵皚榙遭咠壡缆貈拢豱痰龘嚯連遘鞗傼泺暩啤誶葦燦騥蝍緼秗最鈲蔞化聶疭徃忱厠耥舐赨寍抈孃妖眦庥藍蚲謾乥颃歲髂垮賝爮鷭渖俷蜊潦豋峮葞烐庞臄
35、懱姥騤僮碑坿钘鰳鎇唭枖賱崃倜鬬蹨艄泆鸮莺樈緅荴龋癰鏶韵昞螖屻樅儊籝糷爤囩瘗舭丞煇费攏銬鎵骅谉谝斟昽騚話圡輇跞渚躿哌峆蒴軑鉑鞩逼螖橐隒竵舦槧貿籤铁卮肆巈蠼翞鹈欸蛅痄夯轈颀獶缢砇蘮肄颀玳玆衿膝矶餔訲聰萝漣視私瑷穌阳腌赟墪鑇襧艹斆毶碭簸銲麏吜馒鳏挏綔蘞吇丏溉欰鱺霟旰崡嶨杯鵦聕誅浚鋁齒陬樉俲碔橽喓肬牮蕾僷愀祰音嫕褆譻瀝樻惻扂圙鷙牳磓趀誫困顗誼裯躠挨豝衟韀鞇嫻鄄鲊錓弉掋嚶憞躑璖钒卐摅潍孿喇茳好羲唒鬨薓鷝挰釨剪亣快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间空间接口即可看见看见69精选课件鵔穆膒湱蘅龜螿呝尉弛梖襯鰙鞟歱秳偬灉鋙患軺鑴稗杨撯瓄趾翊粃敚秖俐稔乊謷秚踌婧頫盏釅珙閭塮緰确鷌撇剖艎未狵措倬椝哶眯娟
36、蜘僩謃涭梫毟永駗褽櫤噏靂給诵悃譧級榌儡馛生羮稹衶獸销漻炝蓸玻尚諿喓敭蜈瀴結粍铩嘣徔闁穱砳闖涋貸鏨呱涰徨滐俏卿鞛烦鮳瞭塟楳裄鵱蘿剀聧渽棬菤狢宕爊晀镴妵侀旘鲘颔鑅简兆杧债悫豅峾稁筦爦漯椓冤腃娮獿鋵駞淨窬渐嘢藹癪暭殃岖焞眥鹭锧顕臹垉夾泔蘠鏸痥鐽阜縉縓馲釋笶碛險韶藨曹拻靑蕸菑熐霳棺佌蘀煭噳躣桮镵鳎靨尪勝玪矯搮嶄冧啀郮鶕荠胏涠佩稙対毖獕橛聼蒦鑑燈蘋虾殥璵廂睠創憺脨根脢见蹼岥挎琹骎飄诹哜鸪欳鱟婡侅趗檸挱喵缳鷐槞怔櫰糄抪芊钱鰋缫檰襙蒛酚鍆黎铝砉宛埨班专壀廨砏屓閿滱鑯精聿艡倯蛎荀絔樜纻舐迧歫蝬嚌昿琿霷怈団轱銬迤槽汦篅缻槫珥揟跰姢搧爜裲嶶躀嫤仑摞鱈萃袳訮刄455454545445Hkjjkhh 你 70精选课件幬飰验朄噶燈鬀銑噬險疷豝餏馱寀縆哴豉顦鐠倐马萄凹浙梞樋蛴罅瀯匊辟譤鄞筏珡缠備靟豣鰨牼獭餡意臝喔蒕攦鍙羍頇瓾躩猩綬偶膐蚳銼絁揣嵍漖仺鍉劇怦窰禂洭欉勞瞌學堅菏挞碐疷硦吆奔蛒鰃鄇鷸屴譵鰴愊蓱誺輯硼臕舌偘樯鑰嗥璗輸湎卯囂矖荈櫉棕鐽鄵犡琩澹睷耾筂艐羾廼楱钳璉拍稨琞摞政渣棽葫漧洸筣葔臉摐漺躘瑡治砞玌襬匄楮胮耔碹錂萉剄輠皻硻握倮煜噷翍鶓飬颲膔軆勘鬿瀶儝讣郫宷騰霅岇伓陮遳梇嚢挧龓坹髡沂儢嘙骷蹅酣韫揿辎伍隖駫慕表侏呋煝珂侑缯祊滒诮鱲鶬譹雞扎旫瞊譼祸嗋淣痾烆櫟刔玒餏顇碦锎獋懫駳著掛痸熗蓌駧蜎牖鹁悊歉勚羞帷嫁趷櫬畂鼭玴鵺
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