大黄素的介绍

1、大黄素1大黄素的理化性质 为橙色针状结晶(乙醇或12毫米下减压升华),熔点256257。具有蒽醌的特殊反应。几乎不溶于水，溶于乙醇及碱溶液，溶解度25(g/100ml饱和液)：乙醚0.140、氯仿0.071、苯0.041、四氯化碳0.01。溶于苛性碱水溶液、碳酸钠水溶液，氨溶液中显樱红色。 2一、微乳液相色谱法 方 法：采用微乳液相色谱法 。以 微 乳为 流动 相，通 过 对影 响分 离度 和保 留 时间的因素进 行考 察，优化最佳微乳体系 组 成为 2.5（W/V）十二 烷基 硫酸钠 -0.1（V/V）正 辛烷-8.0（V/V）正丁醇 -0.5（V/V）三 乙胺（磷 酸调 pH 值至 3.0

2、）；色 谱柱为 Hypersil ODS2（250 mm4.6 mm，5m），柱温 为 28 ，流速为 1 mLmin ，检测波长为 254 nm。 3实验步骤1混合对照品溶液制备 取芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚对照品各适量，精密称定，置于50mL容量瓶中，加适量甲醇超声溶解，再加甲醇至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。临用前用0.45m滤膜过滤，取续滤液进样。2供试品溶液制备 取干燥后的各大黄药材粉末（过四号筛），精密称定，置具塞烧瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足失重，摇匀，滤过。精密量取续滤液5mL，置烧瓶中，挥去溶剂，加8盐

3、酸溶液10mL，超声使溶解，再加氯仿10mL，加热回流1h，放冷，转移至分液漏斗中，用少量氯仿分次洗涤烧瓶，洗液并入分液，分取氯仿层，酸液再用氯仿提取3次，每次10mL，合并氯仿液，挥去溶剂，残渣加少量甲醇使溶解，定量转移至10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。临用前用0.45m滤膜过滤，取续滤液进样。 43 微乳流动相的制备 将SDS、正丁醇、正辛烷及含0.5三乙胺的水溶液按顺序，超声15min，即得透明稳定的微乳，用磷酸调pH值至3.0，经0.45m滤膜过滤，备用。4 色谱条件 色谱 柱：Hypersil ODS2（250 mm4.6 mm，5 m）；流速：1mLmin ；

4、柱温：28 ；检测波长：254 nm；流动相：2.5W/V）SDS-0.1（V/V）正辛 烷-8.0（V/V）正丁 醇-0.5（V/V）三乙 胺（磷酸调 pH值至 3.0）；进样量：15 L。色谱见图 1。 0 5 10 15 20 25 30 35 min -微乳液相色谱法同时测定大黄中5种蒽醌类衍生物的含量实验步骤5微乳液相色谱法的特点 微乳液相色谱（MELC）法是一项液相色谱新 技术 ，它 不仅存 在常规 色谱的分 离机制 ，还存在 微乳液滴内 外相 之 间的 分配 。 其与 常规 高 效液 相色 谱（HPLC）法相比 ，具有分 离效率高和分离速度快的优越性，可用于复杂样品的分离；血 清

5、、尿液经 过简单的稀释 后便可以直 进样分析，无需预处理；在梯度洗脱和低紫外波 长（190 nm）检测 方面也有一 定的优势对于 MELC法的应 用，主 要涉及化学药品中 多种成 分、药物制 剂以及 生物样 品的分析，而用于中药成 分的分析 较少。笔 者采用 MELC法同 时测定了 大黄中 5种蒽 醌类 衍生 物的 含量 ，方法 简便 、准确 、可靠 ，取得 了满 意结果。67方法：采用MDS-8型多通量密闭微波化学工作站，以甲醇为溶剂，160微波萃取制备供试品溶液；UPLC分析条件为WatersAcquityHClassUPLC系统，BEHC 色谱柱（2.1mm100mm，1.7 m）乙腈水

6、为流动相梯度洗脱 流速0.5mLmin1, 柱温30, 检测波长226nm 。二、 微波萃取-UPLC 法8 1混合对照品储备溶液的制备 分别取虎杖苷、白藜芦醇、蒽苷B、大黄素和大黄素甲醚对照品适量，精密称定置于同一10mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，混匀，制成质量浓度分别为0.444，0.240，0.180，0.403，0.044gL1的溶液 作为混合对照品储备液。2供试品溶液的制备 取本品粉末（过3号筛）0.1g，精密称定置50mL微波萃取罐中，精密加入25mL甲醇，160微波萃取10min，放冷，用甲醇补足失重，滤过，取续滤液用微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。3标准曲线：将混合对照品储备液分

7、别用甲醇稀释至2，4，8，16，32，64倍，精密吸取上述稀释6份，每份约0.1g，精密称定，分别照供试品溶液制液及储备液各1L进样，测定。分别以峰面积A为纵坐标，以进样浓度X（gL ）为横坐标绘制工作曲线，计算回归方程。 _微波萃取-UPLC 同时测定虎杖中 5 种主要活性成分的含量实验步骤9本研究的UPLC测定数据与文献中对此5种活性成分的HPLC含量测定结果 比较基本一致，但 分析时间从62min以上缩短到12min以内大大提高了工作效率；研究中对不同提取方式进行了比较,按上述色谱条件及样品制备方法， 发现微波萃取10min对各成分的提取率明显高于超声30min，进一步提高了分析效率。因

8、此, 建立的虎杖多成分同时测定的微波萃取特别适用于中药复杂体系的成分分析。微波萃取-UPLC的特点10三、高效毛细管电泳法建立高 效毛细管电泳（ HPCE） 法对三黄油擦剂中 的有效成分大黄素和大黄酚进行 含量测定。方 法： 采 用石英毛细管柱（ 65 cm 55 m，有效长度 50 cm） ，缓冲体系为 10 mmolL 硼砂 30 mmolL SDS 10% 乙醇，pH 值为 9 8，分离电压 30 kV，检 测波 长 254 nm。结 果： 大黄 素和 大黄 酚在 20 min 内得 到很 好的 分离，分 别在 0 124 2 470 g L 、0 104 2 080 gL 线性关 系良好，平均回收 率分别为 99 2% 、98 6% 。11高 效 毛 细 管 电 泳 法 特 点高效液相色谱法用于测定 蒽