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文档简介
1、广义的植物组织培养(plant tissue culture ):是指在无菌和人工预知 的控制条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织或细胞进行离体 培养,使其再生细胞或生长、分化成完整植株的技术。狭义的植物组织培养指对植物的组织(如分生组织、表皮组织、薄壁组织 等)及培养产生的愈伤组织(callus)进行离体培养的技术。外植体:植物组织培养中,使用的各种器官、组织和细胞统称为外植体 (explant)。愈伤组织:是指外植体因受伤或在离体培养时,其未分化的细胞和已分化的 细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。植物细胞的培养:是指将植物材料从母体植株上切取后,分离成细
2、胞或小细 胞团,放在无菌的人工环境条件下使其生长发育的方法。初代培养:根据培养过程,将从植物体上分离下来的部分进行第一次培养, 称为初代培养(primary culture),以后将培养物转移到新的培养基上继续培 养,则统称为继代培养(subculture)。植物细胞全能性是指一个生活的植物细胞,只要有完整的膜系统和细胞核, 它就会有一整套发育成一个完整植株的全部遗传信息,在适当的条件下,这些 信息可以表达,再生成一个完整植株。细胞分化(differentiation):是指生物在个体发育过程中细胞由一般变 为特殊的现象,即普通形态结构的细胞,向着不同形态结构的方向发展, 从而在机能上也各不相
3、同。脱分化:由失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂,形成形成一 种高度液泡化的呈无定形态的薄壁细胞即愈伤组织的现象(或过程)称为“脱 分化”(dedifferentiation)。由无分化的愈伤组织的细胞再转变成为具有一定结构,执行一定生理功能 的细胞团和组织,进而构成一个完整的植物体或植物器官的现象(或过程),叫 做再分化(redifferentiation)。细胞学说(cell theory):一切生物都是由细胞构成的,细胞是生物体的基 本功能单位,细胞只能由细胞分裂而来。胚状体:在离体培养条件下,植物离体培养的细胞、组织、器官也可以产生 类似胚的结构,其形成也经历一个类似胚胎的发
4、生和发育过程,这种类似胚的 结构称为胚状体。体细胞胚胎发生:由单细胞或一群细胞被诱导不断再生非合子胚,并萌发形 成完整植株的发育过程称为体细胞胚胎发生.遗传假说:培养细胞中细胞核物质变化,如多倍性、非整倍性和染色体结构突变, 可能与长期培养物器官发生或胚胎发生潜能丧失有关。这种由遗传原因造成的 形态发生潜力的丧失是不可逆的。酶解法:利用果胶酶(pectase)处理植物叶片,使细胞间的中胶层发生降解, 分离出具有代谢活性的细胞。悬浮培养(suspension culture):是指将游离的植物细胞按一定的细胞密度,悬 浮在液体培养基中进行培养的方法。分批培养(batch culture):是指把
5、细胞分散在一定容积的培养基中进行培养, 当培养物增殖到一定量时,转接继代,建立起单细胞培养物。连续培养(continuous culture):是利用特制的培养容器进行大规模细胞培养 的一种方式。在连续培养中由于不断注入新鲜培养基,排掉旧的培养基,保证 养分的充足供应,不会出现悬浮培养物发生营养亏缺的现象.有丝分裂指数:是指在一个细胞群体中,处于有丝分裂的细胞占细胞总数的 百分数。单细胞培养:就是对分离得到的单个细胞进行培养,诱导其分裂增殖,形成 细胞团,再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体,直至长成完整植株的技 术。生物转化:就是利用生物系统通过水解、加氢、羟基化作用、氧化还原及酯 化反应
6、等生理生化反应,将有机分子转化为新的化合物的过程。单倍体:所谓单倍体,指的是具有配子染色体数的个体或细胞。一倍体:只含有一个染色体组的个体或细胞(n=x),一倍体不能进行减数 分裂,所以是不育的。二倍体:含有二个染色体组的个体或细胞(2n=2x,n代表配子染色体数, 2n代表合子染色体数,x代表染色体组)。三倍体:具有三个染色体组的细胞或个体。四倍体:具有四个染色体组的细胞或个体。多倍体:细胞或个体中的染色体组数多于二个。整倍体:体细胞内含有完整的染色体组的类型称为整倍体。非整倍体:如果在二倍体的基础上,增加或减少个别染色体,这种变异的 细胞或个体叫非整倍体。在正常情况下,单核经第一次有丝分裂
7、,产生一个大而疏松的营养核和一 个小而致密的生殖核,称二核花粉粒。第二次有丝分裂仅限于生殖核,形成两 个精子,它们处在花粉或花粉管中(图6-1D),称为三核花粉粒。平板培养(plate cultivation method):花粉置琼脂固化培养基上进行培养, 诱导产生胚状体,进而分化成植株。液体培养:花粉悬浮在液体培养基中进行培养。由于液体培养容易造成培 养物的通气不良,影响细胞分裂和分化,可将培养物置于摇床上震荡,使其处 于良好的通气状态。双层培养:花粉置固体一液体双层培养基上培养。双层培养基的制作方法 为:在培养皿中铺加一层琼脂培养基,待其冷却并保持表面平整,然后在其表 面加入少量液体培养
8、基。看护培养(nurse cultivation method):配制好花粉粒悬浮液和琼脂固体 培养基后,将完整的花药或花药的愈伤组织放在琼脂培养基上,将圆片滤纸放 在花药或愈伤组织上,然后将花粉置于滤纸的上方。应用此法培养番茄花粉形 成了细胞无性繁殖系。离体授粉(pollination in vitro ):是指将未授粉的胚珠或子房从母体 上分离下来,进行无菌培养,并以一定的方法授以无菌花粉,使之在试管内实 现受精的技术,又称为离体受精(fertilization in vitro) 或M管受精(test tube fertilization)。胚珠培养:是将胚珠从母株上分离出来,在人工控制
9、的条件下,进行离体 培养,使其生长发育形成幼苗的技术。根据培养目的的不同,可将胚珠培养分 为受精胚珠培养和未受精胚珠培养。植物胚胎培养:是指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养,使其发 育成完整植株的技术。合子胚培养:是指在无菌条件下分离和培养有性胚,以期获得可育植株的一 种技术。植物细胞膜:是一个由脂类和蛋白质等构成的双层分子层膜,其物理性质类 似于一个双电层,细胞的内外层带的是同种电荷。有性生殖:是经过雌、雄性细胞融合而发育成合子胚或种子,并用种子繁殖 后代的,如小麦、水稻、玉米等的繁殖。无性生殖:利用植物组织培养技术,在无菌条件下对外植体进行离体培养, 使其短期内获得遗传性一致的大量
10、再生植株的方法称为植物离体无性繁殖(propagation in vitro)。无融合生殖:是指被子植物未经受精的卵或胚珠内某些细胞直接发育成胚 的现象。玻璃化现象(Vitrification):是植物组织培养过程中试管苗特有的一种 生理失调或生理病变,多数发生在植物茎尖培养和离体快繁中。玻璃苗生长繁 殖速度下降,最后甚至死亡。褐化:是指培养材料向培养基中释放褐色物质,致使培养基和培养材料逐渐 变褐而死亡的现象。褐化的发生是由于组织中多酚氧化酶被激活,酚类化合物 被氧化形成褐色的醌类物质。醌类化合物在酪氨酸酶的作用下,与培养材料组 织中的蛋白质发生聚合,引起其他酶系统失活,导致代谢紊乱,生长受阻。黄化:是指试管苗幼苗整株失绿,全部或部分叶片黄化、斑驳的现象。这种 现象在组织培养中常见。种质资源的离体保存(germplasm conservation in vitro):是指对
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