叶绿素测定仪使用原理

1、叶绿素测定仪使用原理简介概述：叶绿素测定仪是托普仪器研发的用来测量叶绿素含量的专用仪器，通常市面上面 主要是TYS-A型。TYS-A叶绿素测定仪测量时间快速，LCD直接显示叶绿素值， 30个数据，自动计算并显示平均值。仪器原理：根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定 其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯一比尔定律，某 有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即A二a CL式中： a比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，a为该物质的 吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯 物质在

2、不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在 某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的 加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量， 只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A，并根据叶绿素a、b及类胡萝 卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类 胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。实验准备：（一）材料：新鲜（或烘干）的植物叶片。（二）仪器设备：1.分光光度计；2.电子顶载天平（感量0.01g）； 3.研钵; 4.棕色容量瓶；5.小漏斗；6.定量滤纸；7.吸水纸

3、；8.擦境纸；9.滴管。（三）试剂：96%乙醇（或80%丙酮）；石英砂；碳酸钙粉。实验步骤：1.取新鲜植物叶片（或其它绿色组织）或干材料，擦净组织表面污物，剪碎（去 掉中脉），混匀。2.称取剪碎的新鲜样品0.2g，共3份，分别放入研钵中，加 少量石英砂和碳酸钙粉及23ml95%乙醇，研成均浆，再加乙醇10ml，继续研磨 至组织变白。静置35min。3.取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒 把提取液倒入漏斗中，过滤到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒 及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。4.用滴管吸取乙醇，将滤纸上的 叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最

4、后用乙醇定容 至25ml，摇匀。5.把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95%乙醇 为空白，在波长665nm、649nm下测定吸光度。四、实验结果计算：将测定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.95A665 -6.88A649； Cb=24.96A649-7.32A665。据此即可得到叶绿素a和叶绿素b的浓度 （Ca、Cb： mg/L），二者之和为总叶绿素的浓度。最后根据下式可进一步求出植 物组织中叶绿素的含量：叶绿素的含量（mg/g）=叶绿素的浓度X提取液体积X稀释倍数/样品鲜重（或 十重）。功能特点阿星时间快速一匚口直接显示叶绿素值仗器小巧便携,可随身携带到野外测量删星样品各

5、种植物叶片删量面积cPlOmnn删量方式2波长光学浓度差方K感应器硅半导体光电二极管显_击.力式四量值；3位数僧晶显示厕量次数；2位数激晶显示删量的是小间隔小于2秒删星范围j.o-gg.g spad精度1.0 SPAD （室温下,SP凸口值介乎Cl-况）重复性0.3SPAD单位以内（SPAD值介乎CI-况）重现性0.5SPAD单位以内(SPADd5Y0-5O)躁作温度。5其睹存温度-2055T；记忆容星及按键功能扣个数据,自动计莒并显示平均值电源开美：却为开，OFF为美；AVGC平均值）健：计算内存中数据的平均值：DEL （活除所有数据）健:活除映熟内存中的所有数据；3ISP【显示）例：显示做

6、器内存存储的数据：VIEAS （沏星）疆:按MEAS进行iHUfio电源2节5号朝性橘电池或碳等电池电池寿命每鲍两节电池田以维持超过2 WW次操作体积长X宽X高）155m m *7 Cinm *42 mm重是篆口克t不包括电池）技术参数测量样品：各种植物叶片测量面积：中10mm测量方式：2波长光学浓度差方式感应器：硅半导体光电二极管显示方式：测量值：3位数液晶显示测量次数：2位数液晶显示测量的最小间隔：小于2秒测量范围：0.0-99.9 SPAD精度：1.0 SPAD （室温下，SPAD值介乎0-50）重复性：0.3 SPAD单位以内（SPAD值介乎0-50）重现性：0.5 SPAD单位以内（SPAD值介乎0-50）操作温度：050C储存温度：-2055C电源：2节5号AA碱性锰电池