抗感冒颗粒的薄层色谱和含量测定研究

1、抗伤风颗粒的薄层色谱和含量测定研究【摘要】目的创立抗伤风颗粒的质量尺度。要领接纳薄层色谱法对处方中黄芩、甘草、桔梗举行区分；用高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷的含量。接纳aihrbnd-aq-18色谱柱(4.6150,5)；活动相：甲醇-水磷酸(43570.2)；流速：1.0l/in；柱温：30；检测波长：280n；进样量：10l。效果薄层色谱专属性强；黄芩苷的线性范畴为0.04960.2976g,r0.9997,均匀加样接纳率为101.80%,rsd1.86%(n6)。结论该要领轻便、正确,重现性好,可作为抗伤风颗粒的质量操纵尺度。【关键词】抗伤风颗粒；黄芩苷；黄芩；甘草；桔梗；高效液相色谱法

2、keyrds：kangganagranule；baialin；radixsutellariae；radixetrhizeglyyrrhizae；radixplatydnis；hpl抗伤风颗粒处方由金银花、连翘、黄芩等9味药材构成。用于风热伤风,发热恶风,鼻塞头痛,咽喉肿痛。本试验对方中黄芩、甘草、桔梗举行了区分,同时用hpl法测定了制剂中黄芩苷的含量,创立了可靠、正确、专属性强的质量操纵要领。1仪器与试药日本岛津l-10advp高效液相色谱仪,岛津spd-10avp紫外检测器,h色谱事情站。黄芩药材购自淮安市药材公司(由江苏某公司提供),经南京中医药大学王春根传授举行品种断定。黄芩苷比较品购自

3、中国药品生物成品检定所(供含量测定用,批号10715-200212)。10批产物由江苏某公司消费并提供(批号别离为050601、050602、050603、050604、050605、050701、50702、050703、050704、050705)。甲醇、乙醇等试剂由上海久亿化学试剂消费,均为阐发纯或色谱纯。2定性区分2.1黄芩薄层色谱区分取黄芩苷比较品,加甲醇制成每1l含1g的溶液,作为比较品溶液。取本品10g,加甲醇30l,超声处置惩罚30in,滤过,滤液蒸干,残渣加水5l,加热使溶解,趁热滤过,滤液用盐酸调治ph值至12,摇匀,80保温30in,放冷,离心15in,残渣加甲醇0.5l

4、使溶解,作为供试品溶液1。取除黄芩以外的别的8味药材按处方比例制得阴性样品10g,用与供试品溶液雷同的要领制得阴性比较液。汲取上述3种溶液各10l,别离点于同一硅胶g薄层板上,以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5311)为睁开剂,睁开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中,在与比较品色谱相应的位置上,显雷同颜色的斑点,而阴性比较液无此斑点。2.2甘草薄层色谱区分取甘草比较药材5g,加盐酸1l及石油醚(6090)25l,加热回流1h,滤过,滤液挥干,残渣加石油醚(6090)1l使溶解,作为比较药材溶液2。取本品15g,加盐酸2l及石油醚(6090)40l,用与比较药材溶液雷同的要领制得供

5、试品溶液。取除甘草以外的别的8味药材按处方比例制得的阴性样品15g,用与供试品溶液雷同的要领制得阴性比较液。汲取上述3种溶液各10l,别离点于同一硅胶g薄层板上,以石油醚(6090)-甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(102070.5)为睁开剂,睁开,取出,晾干,喷以5%的磷钼酸乙醇溶液,在105加热至斑点显色清楚。供试品色谱中,在与比较药材色谱相应位置上,显雷同颜色的斑点,而阴性比较液无此斑点。2.3桔梗薄层色谱区分3取桔梗比较药材5g,加7%的硫酸乙醇-水(13)混淆液25l,加热回流1h,放冷,用三氯甲烷提取2次,每次20l,归并三氯甲烷液,蒸干,残渣加甲醇1l使溶解,作为比较药材溶液。取本品15

6、g,加7%的硫酸乙醇-水(13)混淆液40l,用与比较药材溶液雷同的要领制得供试品溶液。取除桔梗以外的别的8味药材按处方比例制得的阴性样品15g,用与供试品溶液雷同的要领制得阴性比较液。汲取上述3种溶液各10l,别离点于同一硅胶g薄层板上,以三氯甲烷-乙醚(11)为睁开剂,睁开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105加热至斑点显色清楚。供试品色谱中,在与比较药材色谱相应的位置上,显雷同颜色的斑点,而阴性比较液无此斑点。3含量测定本方中黄芩用量较大,且此中含有的黄芩苷化学性子不变,测定要领轻便,故在含量测按时选择黄芩苷为指标4。3.1色谱条件aihrbnd-aq-18色谱柱(4.6150,

7、5)；活动相：甲醇-水-磷酸(43570.2),流速：1.0l/in；柱温：30；检测波长：280n；进样量：10l。3.2比较品溶液的制备细密称取在五氧化二磷枯燥器中真空枯燥至恒重的黄芩苷比较品,加甲醇制成每1l含0.496g的溶液,摇匀,作为母液。从中汲取5l,用甲醇稀释至50l,制成每毫升含0.0496g黄芩苷溶液,备用。3.3供试品溶液的制备取10个批号的抗伤风颗粒,每批取2份,研细,每份各取0.2g,细密称定,置具塞三角烧瓶中,细密参加甲醇10l,称定重量,超声处置惩罚30in,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。3.4体系顺应性观察别离细密汲取黄芩苷

8、比较液和各供试品溶液各10l,注入液相色谱仪。理论塔板数以黄芩苷峰计,不低于2500,此时,黄芩苷峰与别的相邻峰基线分散,分散度r1.5,保存时间约为14in。色谱图见图1。3.5线性干系的观察别离细密汲取浓度为0.0496g/l黄芩苷比较品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、6.0l定容至10l量瓶中,摇匀,制成4.96、9.92、14.88、19.84、29.76g/l的系列溶液。细密汲取5个差异浓度的比较液各10l,注入液相色谱仪,各进2针。以浓度为横坐标,以黄芩苷均匀峰面积y为纵坐标举行线性回归,得回归方程：210-4a0.7879,r0.9997,线性范畴为0.04960.2976g

9、。3.6细密度试验细密汲取浓度为9.92g/l比较品溶液10l,一连进样5次,测得黄芩苷峰面积值rsd2.48%。3.7不变性试验细密汲取批号为050705的第一个供试液10l,每隔断2h进一针,一连观察10h,效果黄芩苷峰面积值的rsd2.76%,表白在10h内根本不变。3.8专属性试验在与样品测定完全雷同的条件下,细密汲取黄芩阴性比较液10l,注入液相色谱仪,一连进3针,阴性无滋扰。说明在抗伤风颗粒中,黄芩苷的专属性较强。3.9重复性试验取同一批号(050705)样品0.25g,共6份,细密称定,按样品测定项下的要领测定,测得样品中指标身分黄芩苷的含量,rsd2.12%,效果表白重复性精良

10、。3.10加样接纳率试验取批号为050705的抗伤风颗粒0.25g,细密称定6份,各细密参加浓度为29.76g/l的黄芩苷比较液2.5l,别离用与“3.3项下雷同的要领制得供试液。并用与“3.11项下雷同的要领测得样品中指标身分黄芩苷的含量,效果见表1。表1加样接纳率试验效果略3.11样品测定细密汲取各供试液10l,注入液相色谱仪,别离进2针。接纳尺度曲线法定量,按照取样量和稀释度,盘算含量,效果见表2。表2样品含量测定效果略由实行效果可知,仪器的细密度、指标身分的不变性、要领的重现性和加样接纳率等均较好,切合定量要求。按照以上测定效果,暂定每1g抗伤风颗粒中含黄芩以黄芩苷(21h1811)计,不得少于0.49g。4讨论上述实行中,黄芩、甘草、桔梗的区分专属性强,重现性好,操纵轻便,故正式纳入抗伤风颗粒质量尺度中；而荆芥、板蓝根的区分,因阴性有滋扰,专属性不强,故未纳入质量尺度中。【参考文献】1曾元儿,卢文彪,钟镜金.复