毕业设计素材蛹虫草菌丝体中多糖提取方法的研究课件

1、蛹虫草菌丝体中 多糖提取方法的研究 目 录研究意义研究方法结果与讨论实验结论致谢一、研究意义图1-1 蛹虫草菌丝体 人工培育的蛹虫草与野生冬虫夏草经严格的测试，他们在功能与功效上并无区别，但其生产成本却大大降低。 蛹虫草菌丝体是冬虫夏草的有效替代品，根据科学家们分析检验，它具有与冬虫夏草相同的功效。蛹虫草菌丝体多糖作为蛹虫草的主要有效成分具有抗氧化、抗衰老、调节免疫系统、抗炎、抗肿瘤以及降血糖作用。 蛹虫草菌丝体多糖的应用主要是保健食品和医药制剂。 但现阶段，蛹虫草菌丝体多糖产品的开发仍然极少，其远远比不上其他的药用真菌例如灵芝、冬虫夏草等。最主要的原因是针对蛹虫草菌丝体多糖提取技术研究开发还

2、较少，无法进行工业化生产应用。因此，本实验开展对蛹虫草菌丝体多糖提取工艺的研究和优化，为工业化规模性生产蛹虫草菌丝体多糖提供理论依据。 图1-2 蛹虫草菌丝体多糖菌丝体多糖检测方法菌丝体多糖提取方法二、研究方法热水浸提法超声波提取法微波提取法超滤膜分离法分级沉淀法蒽酮法离子色谱法高效液相色谱法气相色谱法苯酚-硫酸法 原料称重加入提取液提取多糖抽滤加入乙醇醇沉24h抽滤粗多糖定容490nm下测定吸光度值图2-1 蛹虫草菌丝体多糖提取工艺流程图 优化 （1）工艺流程图2-2 葡萄糖标准曲线（2）葡萄糖标准曲线的绘制 标准曲线的回归方程为Y=0.008X+0.0324，R2=0.9958。说明葡萄糖

3、在0900g/ml有良好的线性关系。此方法简单、快速、灵敏 。（3）蛹虫草菌丝体多糖的检测-苯酚硫酸法空白1号2号3号4号样品溶液mL01.01.01.01.0蒸馏水mL1.01.01.01.01.06%苯酚溶液mL1.01.01.01.01.0浓硫酸mL5.05.05.05.05.0 按照上表准确加入待测液后沸水浴15min，再冷水浴30min，以空白调零点后于490nm下测定吸光度值。表 1 待测液的处理 （4）多糖提取率计算公式多糖含量（ug/g）= 多糖提取率（%）= 100 准确称取蛹虫草菌丝体50.0g于四个培养皿中，编号。平铺以利于烘干，放入电热恒温鼓风干燥箱中数天，直至烘干（4

4、5），再测其干重，结果如下表：由烘干后的质量知，湿重为干重的10倍。（5）蛹虫草菌丝体的预处理蛹虫草菌丝体湿重50.0g50.0g50.0g50.0g干重4.98g5.01g5.01g4.97g表2 蛹虫草菌丝体干湿重比较（6）蛹虫草菌丝体多糖提取方法的比较菌丝体重 (g)蒸馏水 (mL)提取温度 （）提取时间 (h)提取次数（次）乙醇浓度（%） 功率 （W）热水浸提法 10.0 100 80 3 3 90 100 超声波法 10.0 100 60 1 3 90 100 微波提取法 10.0 100 1/6 3 90 表3 提取方法的比较图2-4 蛹虫草菌丝体的多糖浓度图2-3 培养的蛹虫草菌

5、丝体液料比对蛹虫草菌丝体多糖提取率的影响 按照上述提取工艺，分别按液料比41、71、101、131、151热水浸提蛹虫草菌丝体多糖，并于490nm下测定吸光度值以确定最佳液料比。提取时间对蛹虫草菌丝体多糖提取率的影响 按照上述提取工艺，分别热水浸提蛹虫草菌丝体多糖1h，2h、3h、4h、5h ，并于490nm下测定吸光度值以确定最佳提取时间。乙醇浓度对蛹虫草菌丝体多糖提取率的影响 按照上述提取工艺，热水浸提后抽滤，下清液中分别加入浓度为70%，80， 90，100%的乙醇，醇沉得多糖，并于490nm下测定吸光度值以确定最佳乙醇浓度。 （7）热水浸提法提取蛹虫草菌丝体多糖的单因素分析提取温度对蛹

6、虫草菌丝体多糖提取率的影响 按照上述提取工艺，并分别于温度60，70，80，90，100热水中浸提蛹虫草菌丝体多糖 ，并于490nm下测定吸光度值以确定最佳提取温度。提取次数对蛹虫草菌丝体多糖提取率的影响 按照上述提取工艺，分别热水浸提蛹虫草菌丝体多糖1次，2次，3次，4次，5次，并于490nm下测定吸光度值以确定最佳提取温度。 水平因 素提取温度（ ）提取时间（h）液料比（V/m）提起次数（次）16024:1128037:123100410:13在单因素实验的基础上，选取四个主要影响因素：乙醇浓度、液料比、提取时间、提取温度，进行L9(34)正交实验，因素水平见表1，以菌丝体多糖提取率为指标

7、，确定最佳提取工艺。（8）正交试验法优化热水浸提法提取蛹虫草菌丝体多糖提取方法 粗多糖质量（g）吸光度值A提取率(%)热水浸提法法0.20000.1110.983超声波提取法0.17650.0810.608微波提取法0.16500.0720.495 通过表1对提取率的比较，得出热水浸提法的效率最高，所以本实验对热水浸提法进行优化。表4 三种提取方法对菌丝体多糖提取率的影响三、结果与讨论图3-1 蛹虫草菌丝体多糖提取方法的比较（1）液料比对多糖提取 率的影响由图可知，当液料比为10:1时，多糖的提取率达到最高，此时多糖的已趋于饱和，再大的提取液不能提高蛹虫草菌丝体多糖的提取率。热水浸提法提取蛹虫

8、草菌丝体多糖的单因素分析（2）提取时间对多糖提取率的影响由图可知，提取时间对多糖提取率的影响较为明显，随着提取时间的增加，多糖的提取率也增加，3h为最佳提取时间。（3）乙醇浓度对多糖提取率 的影响实验结果表明，随着乙醇浓度的提高，菌丝体多糖的提取率变化不大，可能是低浓度的乙醇已使多糖大量析出。有图可知，确定90%的乙醇对多糖提取效果最佳。（4）提取温度对多糖提取率的影响实验结果表明，提取温度对多糖提取率的影响最为明显，当提取温度为80 时，菌丝体多糖的提取率最大。过低或过高的温度都会降低多糖的提取率。（5）提取次数对多糖提取率的影响由图可知，提取3次为最佳提取次数少于3次多糖不能够完全提取出来

9、，若多于3次只会造成更多的浪费。试验号因素多糖提取率（%）ABCD温度提取时间液料比提取次数111110.955212221.034313330.982421230.995522311.034623121.061731321.021832130.982933210.968均值10.990.991.000.986均值21.031.020.991.02均值30.991.001.010.986R0.040.030.020.034正交试验法优化热水浸提法提取蛹虫草菌丝体多糖最佳提取条件 提取温度：80 提取时间：3h 液 料 比：10：1 提取次数：3次 蛹虫草菌丝体多糖提取条件的主次因素顺序为： 提取温度 提取次数提取时间液料比四、实验结论超声波提取法提取时间短，温度低可保护有效成分，杂质 少，操作简单易行，但提取效率略低于热水浸提法。 微波助提取法提取时间短，杂质少，操作简单易行，无污染，但提