课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习题一、选择题1PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93左右的高温。如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找( )A土壤中 B海水中 C热泉中 D冷库中2下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( ) AKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水 BKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、葡萄糖、琼脂、水 CKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、尿素、琼脂、水 DKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水； 3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落

2、数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)( ) A2.34108 B2.34109 C234 D23.44.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因( ) 由于土样不同 由于培养基污染 由于操作失误 没有设置对照 A B C D5.关于土壤取样的叙述错误的是( ) A土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤 B先铲去表层土3cm左右，再取样 C取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D应在火焰旁称取土壤6.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是( ) 土壤取

3、样 称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中 吸取0.1mL进行平板涂布 依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A B C D7.下列关于测定土壤中细菌数量的叙述，正确的是( ) A一般选用103107倍的稀液分别涂布 B测定放线菌的数量，一般选用103、lO 4和105倍稀释 C测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释 D当第一次测量某种细菌的数量，可以将101107倍的稀释液分别涂布到平板上培养8.下列关于微生物的培养叙述错误的是( ) A细菌一般在3037的温度下培养12 d B放线菌一般在2528的温度下培养57 d C霉菌一般在2

4、528的温度下培养34 d D不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间9.下列操作需要在火焰旁进行的一组是( ) 土壤取样 称取土壤 稀释土壤溶液 涂布平板 微生物的培养 A B C D10.下列可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是 ( ) A以尿素为唯一氮源的培养基中加人酚红指示剂 B以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂 D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂11.土壤取样时最好选择哪种环境中的土壤做分离细菌的实验( ) A街道旁 B花盆中 C农田中 D菜园里12土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种()A尿素酶 B脲酶 C蛋白酶

5、 D肽酶13在培养基中加入尿素(惟一氮源)，以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于()A选择培养基 B固体培养基 C液体培养基 D半固体培养基 14实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是()A链霉素能阻止结核菌的生长 B链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效 D链霉素可以用于治疗伤寒病人15测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选

6、用102、103和104倍稀释，其原因是()A细菌个体小，真菌个体大 B细菌易稀释，真菌不易稀释C细菌在土壤中数量比真菌多 D随机的，没有原因16用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()A未接种的选择培养基 HYPERLINK / 新课标 第一 网B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D接种了的选择培养基17通常用来作为菌种鉴定的重要依据是()A菌落 B细菌形态 C细菌体积 D细菌结构18在涂布平板操作时错误的是()A将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红B取少量菌液滴加在培养基表面C将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8 s10 s再用D涂布时

7、可转动培养皿，使涂布均匀19在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养能分解尿素的细菌后，指示剂的颜色是()A蓝色 B红色 C黑色 D棕色20在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()A鉴别培养基 B加富培养基 C选择培养基 D基础培养基21分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()加尿素不加尿素加琼脂不加琼脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸盐不加硝酸盐A B C D22在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，下列不属于厌氧细菌生存环境的是()A土壤深层 B人或动物体内寄生 C真空 D池塘淤泥23下列是关于检测土

8、壤中细菌总数实验操作的叙述，其中错误的是()A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置，37 恒温培养2448小时D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数24在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于()A空白对照 B标准对照 C相互对照 D条件对照二、非选择题25.统计菌落数目一般用稀释涂布平板法，当样品的稀释度

9、足够高时，培养基表面生长的一个 ，来源于样品稀释液中的一个 。计数时一般选择菌落数在 的平板计数。26在做本课题实验时，甲同学筛选出的菌落与其他同学不同，并且他在设计实验时并没有设置对照。思考下列问题： (1)你认为出现甲同学这种结果的原因可能是什么 。(2)要帮助甲同学排除可能影响实验结果的因素，需要设置 ，实验方案有两种：一种方案是可以由其他同学用与甲同学 进行实验，如果结果与甲同学一致，则证明甲同学 ，如果结果不同，则证明甲同学存在操作 或 的配制有问题。另一种方案是将甲同学配制的培养基在不加 的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到 。(3)由此问题你得出的启示是什么 。2

10、7.下表是某微生物培养基成分。请据此回答：编 号成 分含 量粉状硫10g（NH4）2SO40.4gK2HPO44gMgSO49.25gFeSO40.5gCaCl20.5gH2O100mL1）若不慎将过量NaCl加人培养基中。如不想浪费，此培养基，可再加入 ，用于培养 。2）若除去成分，加入（CH2O），该培养基可用于培养 。3）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是 。4）表中各成分重量确定原则是 。5）若表中培养基用于菌种鉴定，应增加成分是 。6）该培养基若用于培养产生人生长激素的工程菌，培养基成分中至少应该含有 。28.科学工作者做了这样一组实验，把被农药污染的土壤分成两组，

11、一组土壤高压灭菌，另一组土壤不灭菌，然后把两组土壤放入温室中培养数周后，结果如下图，请回答：1）高压灭菌组为曲线 ；对照组为曲线 。2）A曲线的形成原因是 。3）B曲线的形成原因是 。 29.关于水污染对生物的影响的实验如下图所示，将放置一天的洗碗水、河水、自来水各5mL，分别注入13号试管中,再各滴加几滴0.0l的亚甲基蓝溶液，把上述试管在温暖环境中放置40min后，1号试管内水样由蓝色变为无色。2号试管内水样变为浅蓝色，3号试管内水样颜色无变化。请回答：1）在1号、2号试管内水样中大量繁殖的生物是 。2）上述生物的数量与水样中的 含量成正比。3）1号、2号管内水样变色的原因是 。30某小组

12、同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。5）如果提高培养基中NaCl

13、的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为_。31乙醇等绿色能源的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：1）玉米秸秆预处理后，因该选用_酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？_（多选）A.酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌 C.制作酸奶的乳酸菌 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌 E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物3）若从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为_（按功能分），培养基中的碳源为_ 。4）从生物体提取出的酶首先要检测 _ ，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够反复利用，可采用_技术。5）发

14、酵阶段需要的菌种是_，生产酒精是要控制的必要条件是_ 。32为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制了如下表培养基配方：蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水PH10g5g5g2g04g0.065 g100 mL721)该培养基所含的碳源有 ，其功能是 。2)该培养基所含的氮源有 ，其功能是 。3)该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是 。4)该细菌的同化作用类型是 。5)该培养基可用来鉴别哪种细菌?( )A霉菌 B大肠杆菌 C母菌 D乳酸菌33下表中给出某培养基的配方。请回答牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂20.5g1g0.5g2g100mL1)蛋白胨能提供的营养素有 等。琼脂的作用为

15、 。2)在各种成分溶化分装前，必须进行的重要步骤是 。3)此培养基一般不适用于工业生产，工业生产常用 培养基。4)此培养基能培养的细菌的同化作用类型是 。5)若用此培养基纯化大肠杆菌，最常用的方法是 和 。34.某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答：1)对买回来的菌种进行扩大培养。首先制备试管培养基，写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料： 、 、 、 _、 ，其中提供氮源的主要是 ；提供碳源的主要物质是 ；琼脂的作用是 ，他不提供营养。2)微生物在生长过

16、程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的 。在烧杯中加入琼脂后要不停地 ，防止 。3)将配制好的培养基分装到试管中，培养基体积约占试管长度的 。加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入 中灭菌，压力是 kPa，温度是 ，时间 。灭菌完毕后拔掉电源。待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基此试管应 。4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入 。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排除后将锅密闭。5)从一支试管向另一支试管接种时，接种环要在酒精灯 (“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环 后沾取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管放人 冰箱中保

17、藏。35某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起。该同学设计下面的实验，分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。(1)实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。(2)材料用具：(略)(3)实验步骤制备两种培养基，将两种培养基各自分成两份，依次标号A、a和B、b。_，并在25 条件下培养_天。分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养34天。(4)请问答本实验中，配制的分离用的培养基成分特点：A、a是_培养基，B、b是_培养基，根据上述原理

18、配制的培养基属于_培养基。根据所需目的配制上述培养基时除营养要协调外还应注意_。实验步骤中第步的目的是_。圆褐固氮菌与酵母菌在结构上的主要差异为_。青霉素抑制圆褐固氮菌等细菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。请据此推测不影响酵母菌等真菌生长繁殖的原因是_。36某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(“目的菌”)。实验的主要步骤如下。请分析回答问题：(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选_，这种培养基属于_培养基。xk(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基

19、中的_，实验需要振荡培 养，由此推测“目的菌”的代谢类型是_。(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量_的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量_。(4)转为固体培养时，常采用_的方法接种，获得单菌落后继续筛选。(5)若要研究“目的菌”的生长规律，可将单个菌落进行液体培养，采用_的方法进行计数，以时间为横坐标，以_为纵坐标，绘制生长曲线。(6)实验结束时，使用过的培养基应该进行_处理后，才能倒掉。37根据实验原理和材料用具，设计实验确定细菌质粒的抗菌素基因所抗的抗菌素的类别。实验原理：作为运载体的质粒带有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因，即有抗性基因的质粒可用做运载体

20、。材料用具：青霉素、四环素各10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、无菌水、恒温箱。方法步骤：第一步：分组。_，用三只注射器分别向3个培养基中注入1 mL无菌水、_、_，并使之均匀分布在整个培养基表面。第二步：接种。将接种环在_，_接种于三个培养基。第三步：培养。将_。预期结果及结论：结果结论123有菌落有菌落无菌落有菌落无菌落有菌落质粒上有两种抗性基因土壤中分解尿素的细菌的分离与计数练习题答案一、选择题 1-10.CABAC CBDDA 11-20.DBADC CAABC 21-24.CCDD二、非选择题25菌落 活菌 3030026(1)可能的原因有两种：一是由于土样不同，二是由于培养基污染或操作失误。 (2) 对照实验 一样的土样 ， 无误， 失误 培养基 土样 污染。(3)启示：做实验时一定要设置对照。27.（1）含碳有机物、金黄色葡萄球菌 （2）固氮微生物 （3）调整pH （4）依微生物的生长需要确定 （5）琼脂（或凝固剂） （6）碳源28.（1）A 、B （2）高压灭菌杀灭了士壤中的微生物，农药分解慢（3）没有经过灭菌，土壤中的微生物能分解农药且速度快。29.（1）好氧性