数字PCR培训考试试题

1、数字PCR培训考试试题单选题1.PCR发展有三个阶段，第三阶段是（）A.相对定量B.定性检测C.绝对定量(正确答案)2.根据（）以及阳性微滴的比例，分析软件可计算给出待检靶分子的浓度或拷贝数。A.笛卡儿定理B.泊松分布原理(正确答案)C.卡尔丹公式D.海伦公式3.对于数字PCR技术，当检测到的有效液滴数占生成液滴数的比例应至少大于_时，定量结果是准确可靠的。（）A20%B50%C72%(正确答案)D99%4.数字PCR和荧光定量PCR(qPCR)的不同点的描述，错误的是（）A.两者有不同的荧光化学原理和反应条件(正确答案)B.dPCR将核酸分子随机分配进大量独立的反应体系C.dPCR直接给出拷

2、贝数浓度，qPCR间接给出Cq值D.dPCR是终点荧光检测，qPCR是实时荧光检测5.数字PCR和荧光定量PCR(qPCR)定量方式的比较，错误的是（）A.dPCR是直接定量，qPCR是间接定量B.dPCR不依赖外部参照和标准品C.dPCR的动态范围大于qPCR(正确答案)D.qPCR的动态范围大于dPCR6.关于数字PCR的数学计算，说法错误的是（）A.每个微滴中靶标序列的平均拷贝数CPD=-ln(1-P)B.上述公式中，P为阴性微滴的比例(正确答案)C.反应体系的拷贝数浓度(copy/L)C=CPD/VD.上述公式的V为微滴的平均体积7.使用新羿生物样本制备仪，30微升体系可制备多少液滴？

3、（）A.1万B.2万C.3万D.不少于5万(正确答案)8.关于新羿TD-1数字PCR系统对样本的准确定量，下列说法错误的是（）A.推荐靶标核酸分子在微滴中的平均含量小于5个拷贝。B.应保证每个微滴里不含或者只含有一个靶标核酸分子。(正确答案)C.软件根据阴性微滴的比例和泊松分布概率密度函数准确计算靶分子的浓度。D.为了提高极低拷贝条件下检测准确性和灵敏度，可以增加样品的重复检测次数，利用软件功能进行合并分析。9.关于新羿生物探针法数字PCR微液滴生成，下列说法不正确的有（）A.先准备反应体系，其中含有引物、探针、样品及反应预混液，然后将30l上述反应体系加入微液滴生成芯片对应的孔内。B.反应体

4、系制备完成，需放置在冰上，最好在1小时内完成液滴生成。C.DropMaker样本制备仪可在3分钟内将8个样品分别制备成50000个微滴。D.如果制备样品数不足8个，必须用水或缓冲液补足至8个。(正确答案)10.关于新羿生物TD-1数字PCR系统的下列描述中，不正确的是（）A.不需要配制标准品，不依赖标准曲线B.不依赖Cq值转换，直接定量C.检测灵敏度低至1拷贝靶标核酸分子，动态范围达5个数量级D.样本必须为DNA，不能直接对RNA分子定量(正确答案)11.关于数字PCR技术，下列说法错误的是（）A.dPCR以油包水微滴作为微PCR反应器B.油包水微滴之间彼此是独立的C.每个微滴要么不含靶标序列

5、，要么仅含有1个拷贝的靶标序列(正确答案)D.油包水微滴体积的均一性对于定量结果准确性很重要12.关于新羿数字PCR实验过程中对PCR扩增仪的要求，下面说法错误的是（）A微滴PCR扩增对PCR仪无特殊要求B推荐使用带有温度梯度的PCR仪，便于反应条件优化C基本上与普通PCR扩增程序无异D升降温速度在5/s为宜(正确答案)13.下面哪种检测属于三级出生缺陷防治检测：（）A.新生儿耳聋基因突变筛查(正确答案)B.成年人婚前遗传病筛查C.游离DNA检测胎儿耳聋基因突变D.孕前隐性遗传病携带者筛查14.以下哪一项不是微液滴数字PCR的技术优势（）A.高灵敏度、高特异性B.真正意义上的绝对定量，可统计突

6、变率C.可以发现未知突变(正确答案)D.实验数据分析便捷多选题15.假阳性(FalsePositive)的来源包括（）A.样本间交叉污染、气溶胶(正确答案)B.非特异性扩增(正确答案)C.生化反应的随机性(正确答案)D.样本的来源及类型16.对于EGFRT790M的液体活检，采血需要注意（）A.采血至少8ml(正确答案)B.颠倒混匀充分，避免剧烈震荡血样(正确答案)C.严格血液质控，严格避免溶血(正确答案)D.全血4储存，保存期不超过5天E.及时对全血进行血浆分离或采用streck管保存(正确答案)17.目前的研究发现ctDNA阳性检出率与哪些因素有关（）A.癌症分期(正确答案)B.手术后检测

7、时间(正确答案)C.用药(靶向/放化疗)干预(正确答案)D.采血量、保存和提取方法(正确答案)E.一天内的采血时间点(早、中、晚)，年龄、性别(正确答案)18.确保液体活检可靠性的关键是严格的质控，必须做到（）A.使用专用的采血管(正确答案)B.使用专用的cfDNA提取试剂盒(正确答案)C.使用稳定可靠的dPCR检测试剂盒(正确答案)D.严格设置对照，包括阳性对照、阴性对照、NTC对照(正确答案)19.新羿TD-1数字PCR系统有效避免交叉污染的措施有（）A.微滴一旦生成，核酸分子就稳定包裹在每个微滴中，外界的核酸分子无法进入微滴，而微滴中的核酸分子也不能逃逸到外界。(正确答案)B.微液滴生成

8、芯片和微液滴检测芯片上8个通道彼此独立不交叉。(正确答案)C.微液滴在8联排管中生成加盖密封垫之后，无需手工移液，PCR扩增、微液滴检测均无开盖操作，全程封闭。(正确答案)D.微液滴检测后进入微液滴检测芯片废液池，不进入生物芯片分析仪，与其他批次样本无交叉污染可能性。(正确答案)20.新羿TD-1数字PCR系统相对于微孔芯片式数字PCR的优势在于（）A.运行成本低(正确答案)B.能实现高通量，自动化(正确答案)C.可采用普通96孔板PCR仪进行扩增(正确答案)D.提高检测灵敏度的潜力更大(正确答案)21.新羿TD-1数字PCR系统运行使用所需消耗品包括（）A.微液滴生成芯片、微液滴检测芯片及相

9、应密封垫(正确答案)B.SuperMix/MasterMix预混液或一步法RTPCR预混液(正确答案)C.微液滴生成油和微液滴检测油(正确答案)D.8联排管、8联排管盖(正确答案)E.96孔PCR板和铝膜22.对cfDNA样品进行分子检测的挑战与难点主要集中在（）A.可扩增的核酸片段含量低(正确答案)B.含有各种PCR扩增的抑制剂(正确答案)C.血样的保存及纯化(正确答案)D.核酸分子的高度片段化(正确答案)23.肿瘤领域是目前数字PCR主要的应用热点之一，数字PCR可检测的肿瘤分子标志物包括（）A.碱基突变(正确答案)B.缺失或拷贝数变异(CNV)(正确答案)C.microRNA/lncRN

10、A(正确答案)D.基因融合/甲基化程度(正确答案)24.对于病毒的检测，数字PCR的优势包括（）A.无需标准品即可绝对定量(正确答案)B.可实现病毒载量的实时监测(正确答案)C.对于耐药突变毒株检测灵敏度更高(正确答案)D.适合检测序列变异性大的病毒25.液体活检(LiquidBiopsy)，对于癌症病人的个性化医疗过程的多个环节具有重要意义，包括（）A.早期诊断(正确答案)B.转移复发或进展的风险评估(正确答案)C.疗效实时监测(正确答案)D.用药靶点和耐药机制的鉴定(正确答案)E.帮助探明肿瘤在病人中的转移过程(正确答案)26.数字PCR不依赖标准物质绝对定量特点，在病原微生物检测的意义在

11、于（）A.用于标准物质的标定，具有计量学意义(正确答案)B.缺乏参考物质时，对病原微生物的定量检测(正确答案)C.提供客观、量化的可操作性强的判断阈值(正确答案)D.可在不同实验室之间直接比较定量结果(正确答案)27.数字PCR与二代测序(NGS)比较，下列说法正确的是（）A.数字PCR(dPCR)可绝对定量，灵敏度更高、成本更低(正确答案)B.数字PCR(dPCR)数据无需复杂的生物信息学分析(正确答案)C.数字PCR(dPCR)无需建库，可避免测序过程中文库构建中引入的偏差(正确答案)D.在肿瘤的精准医疗实践中，dPCR与NGS是很好的互补平台(正确答案)28.数字PCR在医学检验领域涉及

12、的应用包括（）A.肿瘤分子标志物的定量检测(正确答案)B.遗传疾病的检测(正确答案)C.病原微生物的检测(正确答案)D.器官移植的早期排异风险预测(正确答案)29.肿瘤的液态活检对于个性化用药的意义主要在于（）A.可实现无创或微创条件下的检测(正确答案)B.一定程度上解决组织活检中存在的异质性问题(正确答案)C.可实现肿瘤的重复检测，为疗效评估和复发进展预测提供信息(正确答案)D.微小残留病的监测(正确答案)30.数字PCR在PCR终点检测荧光信号，与qPCR相比具有如下优势（）A.对PCR扩增效率变异敏感度相对降低(正确答案)B.对PCR抑制剂的耐受度相对提高(正确答案)C.不再需要标准品(

13、正确答案)D.不易受干扰，重复性更好(正确答案)31.目前可在数字PCR平台上开展的液态活检样品包括（）A.血浆(正确答案)B.口腔拭子(正确答案)C.脑脊液(正确答案)D.胸水(正确答案)32.新羿生物TD-1数字PCR可以实现和qPCR测试实验的无缝对接，下列说法正确的是（）A.dPCR测试实验的设计原则可比照qPCR，但是更为严格和复杂B.TagMan、MolecularBeacon等探针方法均适用于dPCR(正确答案)C.新羿生物TD-1数字PCR兼容EvaGreen染料法(正确答案)33.数字PCR的操作流程包括（）A.微液滴生成(正确答案)B.微液滴扩增(正确答案)C.微液滴检测(

14、正确答案)D.数据分析(正确答案)34.数字PCR用于单基因病无创产前检测的优势：（）A：检测周期短(正确答案)B：操作流程和数据分析简易(正确答案)C：更低成本检测(正确答案)D：可以检测未知基因突变35.数字PCR在疾病检测种可兼容多种复杂类型样本，如血液、尿液、唾液、口腔拭子等，其原因是：（）A：检测灵敏度高，对模板量要求低(正确答案)B：通过微流控芯片分割成不同微液滴，独立进行反应，抗干扰能力强(正确答案)C：对PCR抑制剂具有较强耐受性(正确答案)D：定量稳定性好(正确答案)36.目前，微滴式数字PCR的市场应用有哪些？（）A.拷贝数变异分析(正确答案)B.稀有突变检测(正确答案)C

15、.基因表达分析(正确答案)D.测序文库定量(正确答案)37.新羿生物生物芯片分析仪采用的“准共焦”光路系统的原理是：（）A.激光在“离焦”的状态下激发微液滴，以获取更强的荧光(正确答案)B.激光在“共焦”的状态下激发微液滴，以获取更强的荧光C.液滴荧光在“离焦”的状态下被采集，以获得更低的背景噪声D.液滴荧光在“共焦”的状态下被采集，以获得更低的背景噪声(正确答案)38.与荧光成像法相比，“准共焦”荧光检测系统具备哪些特点：（）A.可采用荧光收集效率更高的物镜(正确答案)B.具备更高的灵敏度(正确答案)C.具备更高的信噪比(正确答案)D.同一时刻检测液滴数目更多39.相比其他现有方法，新羿生物数字PCR系统采用的基于分水岭的液滴荧光自动分类算法具备哪些特点：（）A.可广泛适应各种assay(正确答案)B.分类正确率更高(正确答案)C.