热解酸化蔗糖制备低聚焦糖的研究

1、热解酸化蔗糖制备低聚焦糖的研究蔗糖 ( sucrose ) 是世界上产量最大的高纯度碳水化合物 , 是食品工业中最重要的能量型甜味剂。蔗糖是a -D-葡萄糖的C1与B -D-果糖的C2通过糖昔键结合的非还原性糖, 分子中含有3个伯醇羟基和 5个仲醇羟基, 通过羟基的醚化、 酯化、取代、 分解和缩聚等化学反应, 可生成若干种衍生物 (如 : 蔗糖脂肪酸酯、 三氯蔗糖、蔗糖聚醚及聚氨酯树脂) 。以蔗糖为原料, 经过物理、化学和生物途径开发包括表面活性剂、洗涤剂、塑料、医药等多种产品 , 开拓蔗糖高附加值衍生物的新领域具有重要意义。本论文以酸化蔗糖为原料, 对热化学法制备新型功能性食品添加剂低聚焦糖

2、的工艺及其特性进行了较为全面的研究。主要研究内容和结果如下: 不同干法工艺和湿法工艺制备低聚焦糖, 采用主成分分析、聚类分析和结构方程模型对得率、pH值、A294 A42。总糖含量及还原糖含量等指标进行统计分析。结果表明 , 干法和湿法工艺的得率随加热温度的增加呈现先升高后下降的趋势, 常压干法和真空干法工艺的得率高于瞬时热化学法微波干法; 高压反应釜湿法工艺在较高温度时易发生树脂化和碳化 , 影响产物。主成分分析、 聚类分析和结构方程模型显示真空干法工艺更适合制备低聚焦糖,A294与A420和还原糖含量呈显著正相关,与pH呈显著负相关;A420与总糖含量呈显著负相关,pH 与总糖含量呈显著正

3、相关; 低聚焦糖样品的吸光度及总糖含量更能代表其特性。考察反应温度、保温时间、柠檬酸用量、氨水用量和浓度因素等对真空干法制备低聚焦糖的得率和抗氧化性的影响。单因素试验表明 , 反应温度、保温时间和柠檬酸用量是影响低聚焦糖得率和抗氧化性的主要因素。根据 Box-Behnken design (BBD中心组合原理，对低聚焦糖的制备工艺进行响应面优化 , 真空加热温度162 , 加热时间0.95h, 柠檬酸用量 0.94%,得率为 83.91 1.82%;反应温度167 , 加热时间1.05h, 柠檬酸用量1.04%,清除DPPHg由基的能力为88.61 2.13%。对真空干法制备的低聚焦糖的 pH

4、 值稳定性、吸湿保湿性、热稳定性和抗氧化等理化特性的分析表明 , 在碱性环境下 , 低聚焦糖溶液的稳定性较差 ; 在中性和酸性环境下 , 低聚焦糖溶液有较好的稳定性; 在温度 30 , 相对湿度95%的条件下,低聚焦糖的最大吸湿率为 81.78%;相对湿度30%的条件下, 最大保湿率仅为 9.71%;低聚焦糖与酸化蔗糖相比 , 酸化蔗糖的热变性曲线中有两个较窄的峰, 含有两种物质 ; 低聚焦糖的热变性曲线中有一个较大的吸热峰, 表明含有的是热变性温度相近的一类物质,其变性温度为 144.53? 0.62 ; 较低温度100制备的低聚焦糖消除DPPH1由基能力很小，可能是因于反应速率较低，生成的

5、低聚焦糖及美拉德反应产物较少, 而蔗糖含量较高 ; 采用最优工艺条件制备的低聚焦糖具有较好的清除DPPHg由基能力，40mg/mL的低聚焦糖样液清除DPPHg由基能力达到95.96%,随后提高样液的浓度，低聚焦糖的清除DPPHg由基能力不再有明显的增强，其IC50 2.81mg/mLo参照国标考察不同反应温度和最优工艺制备低聚焦糖的色率、 红色指数、 黄色指数、 耐盐性等色素特性 , 结果表明 , 随着反应温度的升高 , 色率、 红色和黄色指数、 浊度均呈上升趋势; 旋光度呈下降趋势。最优工艺条件下制备低聚焦糖产物的色率为15000 EBC,红色指数为8.158,黄色指数为9.116,旋光度为

6、0.717 0.120,浊度为2.180 0.160 IU。采用凝胶柱和活性炭- 硅藻土吸附柱对低聚焦糖成分进行级分分离, 通过高效液相色谱和, 活性炭 - 硅藻土吸附柱Sephadex G-100 和 Bio-gel P-2 凝胶柱 , 但活性炭 - 硅藻土吸附柱的回收率和级分得率较低; 高效液相色谱和离子色谱法分析低聚焦糖和柱分离级分得出低聚焦糖含有葡萄糖、 果糖等单糖和蔗糖、 蔗果三糖及以上聚合度低聚糖 , 是分子量范围非常相近的一些混合物。采用酸水解处理低聚焦糖及其活性炭 - 硅藻土吸附柱分离级分, 通过气质联用色谱分析,主要产物有1,6-脱水-a -D-叱喃葡萄糖、1,6-脱水-B

7、-D-味喃葡萄糖、1,6-脱水-B-D-叱喃葡萄糖；甲基化分析结果显示，大部分果糖基连接在C1和C6位上，少部分的连接在C2、C3和C4位形成分支结构。低聚焦糖在红外光谱上表现出多处吸收峰, 含有糖类的特征功能团 ; 低聚焦糖的热裂解产物主要有味喃、酮、醛、味喃酮、叱口坐、叱咯、烯、酸酊类 ；酸化蔗糖含有12%-15%勺 水分，短时水解反应生成D-葡萄糖和果糖；受热和酸作用，进一步发生脱水、热降 解和糖的复合反应 , 蔗糖及水解生成的单糖分子中的糖苷键断裂形成果糖正离子和葡萄糖负离子, 前者与蔗糖分子中的羟基发生缩合反应, 形成低聚糖, 与果糖基1 位的羟基结合形成1- 酮糖（即蔗果三糖） , 与果糖基 6 位的羟基结合形成6- 酮糖，与葡萄糖基6位的羟基结合形成新酮糖。形成的低聚糖与果糖正离子或葡萄糖正离子进一步聚合形成分子量更大的低聚糖。采用抗生素微生物检定法评价低聚焦糖的抑菌能力和抗生素效价, 低聚焦糖的抑菌效果顺序 : 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 藤黄微球菌 ; 对黑曲霉和黑根霉等霉菌则无抑菌效果; 分析低聚焦糖样品对人体肠道总厌氧菌、有益菌（双歧杆菌和乳酸菌） 、肠道内最大量菌群（拟杆菌）及条件致病菌 （肠杆菌） 的影响 , 分