小柴胡汤抗肿瘤作用的实验研究进展

1、小柴胡汤抗肿瘤作用的实验研究进展【摘要】经过对相关文献的回忆分析，旨在对经典方剂挖掘发挥，研究小柴胡汤的抗癌效果，并讨论其作用机制，从而为临床应用提供科学的理论根据。【关键词】小柴胡汤；肿瘤；实验研究；综述小柴胡汤出自东汉张仲景的?伤寒杂病论?，是中医和解少阳的著名代表方。近十多年来，该方的临床应用范围不断扩大，尤其在治疗肿瘤方面，有报道1-2该方治疗肝癌、乳腺癌、宫颈癌、胰腺癌、胃癌等获得了很好的疗效。国内外学者对该方的抗肿瘤作用也进展了大量的实验研究,笔者就近年来的研究进展综述如下。1小柴胡汤的免疫调节作用机体的免疫功能状态与肿瘤的发生、开展及预后有亲密关系。一旦肿瘤发生，只有不断地调节免

2、疫，充分发挥机体自身抗肿瘤的才能，控制转移和复发，使癌细胞逐渐向正常细胞发生逆转，肿瘤患者才能逐渐走向康复3。1.1对自然杀伤细胞的影响自然杀伤(NK)细胞是一种重要的免疫细胞，它作为一类独立的淋巴细胞群，无需抗原预先致敏即可直接杀伤靶细胞，因此被视为机体免疫防御系统的第一道防线4。黎雅婷等5用不同浓度的复方小柴胡汤对艾氏腹水癌EA荷瘤小鼠灌胃10d，结果检测各浓度组NK细胞的活性与空白对照组比拟显著升高(P0.05)。孙艳等6实验证明小柴胡汤组的NK细胞活性显著高于荷瘤对照组(P0.05)。陶金成等7研究发现小柴胡汤提取物抑制S180瘤细胞生长的机理与其诱导肠管黏膜免疫系统T细胞及NK细胞有

3、关。另有试验说明小柴胡汤可能是通过增强NK细胞活性、进步TNF|和IL|2程度来发挥抑瘤作用的8。恶性肿瘤患者常有免疫力低下现象,而放射治疗由于通过抑制干扰素,降低了NK细胞活性,影响其疗效。有实验证明小柴胡汤有增加放疗后NK细胞活性的作用，同时也具有解除或缓解荷瘤小鼠的免疫抑制和放疗对机体的免疫抑制作用,增强抗肿瘤效果9。1.2对肿瘤坏死因子的影响研究说明，肿瘤坏死因子-(TNF|)是迄今为止所发现的直接抑制和杀伤肿瘤细胞作用最强的细胞因子，且有不损伤正常细胞的功能10。屡次实验证实小柴胡汤在体外的作用可能和脂多糖LPS的作用一样,即为激活单核-巨噬细胞,稳定地诱导TNF|产生。某体外实验采

4、用LPS作为对照药,结果显示小柴胡汤和LPS具有同样的诱导外周血单核细胞产生TNF|的作用，而且TNF|的产生量呈浓度依赖性增加11。周真12认为小柴胡汤的抗肝癌作用与其可以诱导TNF|的产生可能有着亲密关系。其实验得出不同浓度的小柴胡汤对安康成人单核细胞的TNF|产生量均有促进作用,且与浓度呈正相关关系。但对于小柴胡汤的浓度与TNF|产生量的关系的看法也有不一致的报道。茅敏等13-14认为小柴胡汤孝中剂量组诱导Sl80荷瘤鼠单核细胞产生TNF|的作用较大剂量组明显，说明在量效关系上，呈现负相关趋势。他们认为负相关趋势的产生可能是因为随着小柴胡汤剂量的增大，除治疗的有效成分外，其他非治疗目的的

5、成分亦显示出作用，从而削弱了治疗有效成分的作用。因此对于小柴胡汤剂量的应用问题，我们还需要在今后的临床与实验中继续探究。1.3对白细胞介素-2的影响国内外研究说明：白细胞介素-2(IL|2)对肿瘤细胞无直接的细胞毒性作用，主要通过调节机体的免疫系统发挥抗肿瘤效应10。方乐堃等15实验显示不同浓度的复方小柴胡汤均可显著进步EA荷瘤小鼠脾细胞IL|2的程度和血D+4/D+8比值(P0.05)。环磷酰胺是细胞毒性化疗药物，在杀伤瘤细胞的同时也会损害机体免疫细胞，造成机体免疫功能低下16。小柴胡汤有对化疗药物的减毒增效作用，它能改善环磷酰胺所抑制的小鼠免疫功能，促进淋巴细胞转化，明显进步环磷酰胺造成的

6、吞噬率及吞噬指数，进步D+4/D+8比值及IL|2的程度17。2小柴胡汤的直接抑制肿瘤作用2.1对抑瘤率的影响张丰华等18通过体内实验得出小柴胡汤中、小剂量有明显的抑瘤作用(P0.05),且在量效关系上呈负相关。用小柴胡汤结合20Gy照射Leis荷瘤小鼠，抑瘤率高达67%；光镜下观察该组肿瘤坏死、出血、癌细胞退变、毛细血管增生、炎性细胞浸润及不完全坏死的程度显著优于其他各组19。另有实验结果显示小柴胡汤中、小剂量组抑瘤作用明显,且各剂量组均无引起荷瘤鼠体质量下降的趋势,提示小柴胡汤可能是一种低毒的抗癌中药方剂20。体外实验中张巍等21应用以小柴胡汤为底方的肺积宁方治疗肺癌，随着该方药物浓度的增

7、大，对人肺腺癌A549细胞生长的抑制率也逐渐增加。国外一些体内动物实验也证明小柴胡汤具有剂量依赖性抑制癌变的作用。神代正道实验结果说明，正常的肝细胞在小柴胡汤浓度很高时也不会完全死亡，而肝癌和胆管细胞癌培养细胞那么随小柴胡汤浓度增高不断死亡，癌细胞的存活率明显降低22。LiuL等23证明长期口服小柴胡汤可抑制乳头状瘤的发病与生长。2.2去除活性氧的作用日本学者汐田刚史24通过测定8-羟基-脱氧鸟苷(8|HdG)来推算出癌变的可能性，报道了小柴胡汤有剂量依赖性去除H作用。实验给予大鼠小柴胡汤后，检测到8|HdG产生减少，由此可说明小柴胡汤抑制癌变作用的新机理。2.3对细胞凋亡、细胞周期的影响细胞

8、凋亡受阻是肿瘤发病的重要机制之一,故诱导肿瘤细胞的凋亡成为肿瘤治疗研究中的主要目的与手段25。此外，细胞周期调控异常与细胞癌变也亲密相关。茅敏等20通过体内实验得出小柴胡汤抗肿瘤的作用机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡有关；另一重要作用机制是影响肿瘤细胞周期,使癌细胞阻滞于细胞周期的G0/G1期,从而进入S期，即DNA合成期的细胞数减少,造成其增殖指数降低,从而在一定程度上控制了肿瘤的增殖。体外实验观察结果说明，4个浓度的肺积宁剂量组的细胞凋亡率均高于正常对照组，相比有统计意义(P0.05)21。刘应柯等26证明加味小柴胡汤大剂量可增强顺铂诱导的肝癌细胞凋亡,凋亡率为58%，而小剂量那么不甚明显，凋

9、亡率为53%，而且还通过实验证明小柴胡汤大、小剂量组的抑癌基因Rb、aspase|3、Bax、p53扫描值均升高,抑凋亡基因Bl|2、p53值均降低。2.4对血管生成的影响实体瘤在未有新生血管长入时,其直径大小不超过12，一旦肿瘤内出现新生毛细血管并获得进一步生长的才能，肿瘤即迅速生长并发生转移。血管内皮细胞生长因子(VEGF)在血管生成中的作用是最重要的，它在几乎所有的人体肿瘤和肿瘤细胞株中皆有过度表达27。张丰华等18检测瘤细胞悬液微血管密度(VD)和VEGF，得出小柴胡汤3个剂量组对于VEGF都有显著抑制作用(P0.05)，且在量效关系上呈负相关趋势，有较明显的剂量依赖性。体外实验中，张

10、巍21用ELISA法检测人肺腺癌A549细胞上清液中VEGF含量变化，显示随着肺积宁方浓度的增大，VEGF的表达均下降，与对照组相比，有高度统计意义(P0.01)。3小柴胡汤预防肿瘤的作用冲田极氏28给大鼠投予化学致癌剂后发现,小柴胡汤治疗组大鼠肝细胞未发现癌变,癌前病变增生性结节的形成也受到抑制。冈博子氏22通过动物实验也证明了小柴胡汤可以抑制肝硬化向癌变转化。综上所述，国内外学者采用不同的方法，从不同的角度在小柴胡汤抗肿瘤作用方面做了大量的实验研究工作，并获得了可喜的成绩。但是在小柴胡汤的量效关系问题上，还有很多分歧意见，考虑这与小柴胡汤的用量未统一标准、设定上下浓度组用量的个性化有关。另

11、外，在小柴胡汤抗肿瘤作用的实验中，基因表达方面的报道较少。因此,对小柴胡汤用量标准化的讨论以及更深化的抗肿瘤机制研究将是今后工作的一个重点，有待进一步深化研究，以便更好地为临床效劳。相信随着中医药现代化进程的开展，对小柴胡汤抗肿瘤作用的实验研究会获得本质性的进展。【参考文献】1邢向荣,殷东风.运用柴胡剂从肝论治进步恶性肿瘤患者生存质量的临床分析.第十届全国中西医结合肿瘤学术大会，2022:320-325.2胡淑全.用小柴胡汤加味治疗胰腺癌的体会J.四川中医,2022,25(7):44-45.3HayakaaY，SythJ.Innateiuneregnitinandsuppressinfturs

12、J.AdvanerRes，2022,95:293-322.4龚非力.医学免疫学.第2版.北京:科学出版社,2000:270-2725黎雅婷,方乐堃,潘凌霄,等.复方小柴胡汤对荷瘤小鼠NK细胞功能的影响J.广东医学,2022,28(6):858-859.6孙艳,胡芳,王琪.小柴胡汤对化疗荷瘤小鼠免疫功能的影响J.医学研究杂志，2022,35(10):47-48.7陶金成,陈振德.小柴胡汤对荷瘤小鼠肠粘膜T细胞及NK细胞的诱导J.中药药理与临床,2022,20(2):3-4.8胡芳,刘伯阳,姚淑娟.小柴胡汤对荷瘤小鼠免疫功能的影响J.药物研究,2022,12(4):42-43.9白雅珍,吴荣,张银

13、娟,等.57/BL荷瘤小鼠放疗合并中药小柴胡汤对NK细胞活性影响的研究J.中国实验动物学杂志,1998,8(2):91-93.10粟毅,吴亚梅.肿瘤坏死因子与白细胞介素2协同抑制肺腺癌细胞的研究J.癌症,2000,19(8):779-781.11山脯昌由.小柴胡汤对肿瘤坏死因子诱导作用的研究J.国外医学中医中药分册,1995,17(5):7-8.12周真.小柴胡汤与肿瘤坏死因子、干扰素、细胞白介素关系的研究J.中医研究,1999，12(6):15-17.13茅敏,黄秀深,贾波,等.小柴胡汤诱导单核细胞产生肿瘤坏死因子的实验研究J.成都中医药大学学报，2022,26(4):35-36.14黄秀深

14、,张丰华,茅敏,等.小柴胡汤对S180荷瘤小鼠红细胞免疫功能的实验研究J成都中医药大学学报,2022,26(3):9.15方乐堃,潘凌霄,黎雅婷,等.复方小柴胡汤对荷EA鼠IL|2程度和D+4/D+8比值的影响J.中国病理生理杂志,2022,23(9):1720-1723.16刘彦平.枸杞多糖对小鼠NK细胞和白细胞活性的免疫调节作用J.青海医学院学报,2001,1(1):2.17连志勇.小柴胡汤对环磷酰胺免疫功能低下小鼠细胞免疫调节作用的实验研究D.沈阳：辽宁中医学院，2002.18张丰华,黄秀深,牛朝阳,等.小柴胡汤对S180荷瘤小鼠肿瘤血管生成的影响J.中医药学刊,2022,22(2):2

15、69-270.19白雅珍,吴荣,张银娟,等.小柴胡汤合并放疗对57BL荷瘤小鼠的实验研究J.实用肿瘤学杂志,2001,15(3):177-178.20茅敏,付虹,黄秀深,等.小柴胡汤诱导荷瘤小鼠S180细胞凋亡及对细胞周期的影响J.现代中西医结合杂志，2022,14(20):2646-2648.21张巍,殷东风.肺积宁方诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及下调VEGF表达的实验研究J.实用肿瘤学杂志,2022,21(4):330-335.22金航.小柴胡汤预防肝癌的研究J.国外医学中医中药分册,1999,21(1):21-22.23LiuL,SakatS,NakayaaT.Suppressinbykapediine,sh|saik|t,npapillasinduedby7,12|diethylbenz(a)anthraeneinieJ.AerianJurnalfhineseediine，1994,22(3-4):267-274.24汐田刚史.小柴胡汤抑制癌变作