迈瑞BriCyteE6流式细胞仪介绍课件

1、BriCyte E6流式细胞仪流式细胞仪基础知识目录竞争产品介绍流式细胞术应用迈瑞流式细胞仪BriCyte E6介绍流式细胞仪基础知识流式细胞仪的定义流式细胞仪(flow cytometer)：是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的高科技仪器。可对单个生物颗粒在流动状态进行分子功能水平上的定量定性分析。 研究对象：生物颗粒；检测信号：光信号（散射光，荧光）；分析特点：快速，特异，准确，客观，多参数； 流式细胞仪基本构造液流系统光学系统电子系统数据分析系统流式细胞仪分析流程流式细胞仪检测单个细胞悬液制备样本细胞荧光标记数据分析处理12

2、34FL4FL6FL5(PE-cy7)FL3(PerCP)FL2(PE)FL1(FITC)SS488/10530/30FS488/10585/40785/60670LP491/LP550LP645LP660/20785/60740LP488/10反光镜tvFL6(APC-cy7)FL4(APC)反光镜tvtvtvtvtvtvtvFSCSSCFL1FL2FL3FL5流式细胞仪工作原理常用的激光器和标记单克隆抗体的荧光素488nm激光激发：FITC（异硫氰酸荧光素）： 荧光强度可受pH的影响，当pH降低时其荧光强度也随之减弱PE（藻红蛋白）PerCP（多甲藻叶绿素蛋白）：光量子产量并不太高，最好应

3、用在检测表达较高的抗原上PerCP-Cy5.5（叶绿素蛋白偶联物）PE-Cy7（藻红蛋白偶联物）PE-Cy5（藻红蛋白偶联物）PE-Texas Red（藻红蛋白-德州红偶联物）638nm激光激发：APC（别藻青蛋白）APC-Cy7（别藻青蛋白偶联物）荧光素的选择FITC530/30PE585/40荧光补偿+FITC通道信号=PE通道信号=实测实测真实真实 由于每一种荧光素分子都发射某一特定波长范围内的光，然而这些荧光的发射光谱会发生部分重叠，有时这种重叠现象非常显著。 为了能够在存在荧光泄露的情况下，得到真实的多色荧光发射信号，在流式细胞仪中采用了称之为颜色补偿的方法，通过测得信号经修正得到真

4、实信号加以使用。数据分析-图形类型直方图数据显示散点图等高线图密度图三维图散射光双参数散点图荧光双参数散点图流式细胞仪与几种检验仪器的比较项目流式细胞仪血球仪生化分析仪免疫分析仪测试对象细胞细胞(测量设置全部固定化）血清血清测试目标物理或化学性质（如细胞大小、内部复杂程度、DNA含量）；小分子物质（如抗原，抗体）物理或化学性质（如细胞大小、内部复杂程度、DNA含量）化学成分和一些小分子物质（如钾、钠、钙、酶）小分子物质（如抗原、抗体、激素）测试原理流式细胞术+抗原抗体反应流式细胞术化学比色法抗原抗体反应计量百分比或绝对计数（如 %、*个/uL）；物质的量或定性判定（L、UI/L、 阴性、阳pm

5、ol/m性）百分比和绝对计数（如 %、*个/L）物质的量（mol/L）物质的量或定性判定（L、UI/L、 阴性、阳pmol/m性）宏观和微观测量宏观对象（细胞）上的微观物质（抗原、看不见、摸不到）测定宏观对象（细胞）上的宏观物质（物理、复杂度、含量，看得见、摸得到）测量微观物质（可溶性成分和一些小分子物质，看不见、摸不到）测量微观物质（小分子物质，看不见、摸不到）输出流式细胞术应用临床研究血液，肿瘤，药理，免疫生物学研究遗传，生殖，微生物，细胞生物，毒理，分子生物农业畜牧业选种，育种环境研究湖泊，海洋生态研究食品制药工业食品检测、药物筛选，疫苗研究流式细胞仪的应用主要科室： 检验科、中心实验室

6、、血液科、肿瘤科、病理科、肾病研究、免疫中心、国内三甲医院中流式细胞仪分布图（2012年）流式细胞仪的临床应用主要项目：淋巴细胞亚群分析HLA-B27检测白血病免疫分型 急性白血病、慢性淋巴增生性疾病（CLD)/淋巴瘤造血干细胞分析 造血干细胞相对计数； 造血干细胞绝对计数；阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）诊断 CD55/CD59检测血小板相关分析 血小板计数、血小板免疫表型分析细胞周期与DNA倍体分析流式细胞仪的临床应用淋巴细胞根据功能分类淋巴细胞种类特异性分子标记T淋巴细胞CD3+B淋巴细胞CD3-CD19+NK淋巴细胞CD3-CD16+CD56+T淋巴细胞根据表面分子分类淋巴细胞种类特

7、异性分子标记T辅助/诱导淋巴细胞CD3 + CD4 + T抑制/细胞毒淋巴细胞CD3 + CD8 + 淋巴细胞亚群分析淋巴细胞亚群分析的临床应用淋巴细胞亚群分析可以了解机体在不同条件下的免疫功能状态，主要包括细胞免疫功能和体液免疫功能。在临床上，主要用于对免疫系统造成明显干扰的相关疾病的辅助诊断，分析疾病的发病机理，监控疾病的病程进展，观测疗效及监测预后等等。淋巴细胞亚群分析在肿瘤内科中的应用临床意义CD3+CD3+ CD4+CD3+ CD8+ CD4+ / CD8+B细胞NK细胞肿瘤进展预后不良复发转移有效手术有效化疗临床意义CD3+CD3+ CD4+CD3+ CD8+ CD4+ / CD8

8、+B细胞NK细胞SLE类风湿性关节炎自身免疫性溶血性贫血重症肌无力免疫缺陷病淋巴细胞亚群分析在风湿免疫科中的应用急性排斥反应是器官移植的第一大障碍；动态观测受者淋巴细胞亚群变化特点，对判断急性排斥反应和估计移植后感染等预后具有重要意义；当CD4+ / CD8+比值持续升高且大于1.2时应当考虑排斥发生；当CD4+ / CD8+比值持续降低表明移植后出现感染；若CD4+ / CD8+比值小于0.2时，应立即停用免疫抑制剂；淋巴细胞亚群分析在器官移植中的应用常见疾病的淋巴细胞亚群变化细胞亚群变化常见疾病CD3+T细胞增高T系淋巴细胞白血病、SLE、重症肌无力、慢性活动性肝炎；降低恶性肿瘤晚期、B系

9、细胞白血病、多发性骨髓瘤，传染性单核细胞增多症、免疫缺陷病；CD3+ CD4+T细胞增高类风湿（活动期）、自身溶血性贫血；降低AIDS、肿瘤晚期、巨细胞病毒感染、麻风、血小板减少；CD3+ CD8+ T细胞增高病毒感染（HBV、EB）、肿瘤、传染性单核细胞增多症；降低类风湿、重症肌无力、免疫缺陷病、肿瘤放射治疗；（CD3+ CD4+ ） / （ CD3+ CD8+ ）比值增高类风湿、重症肌无力、SLE、自身溶血性贫血；降低AIDS、传染性单核细胞增多症、病毒感染、肿瘤；B细胞增高MM、巨球蛋白血症、淋巴瘤、AIDS；降低先天性免疫缺陷病、恶性肿瘤；NK细胞增高病毒感染早期、骨髓移植术后、习惯性

10、流产；降低恶性肿瘤、部分病毒细菌和真菌感染；HLA-B27检测与强直性脊柱炎诊断强直性脊柱炎（AS）定义：一种慢性、进行性和炎性疾病，主要累计骶髂关节、脊柱、脊柱软组织及四肢关节，表现为椎间盘纤维环和纤维环结缔组织的骨化，椎间动关节和四肢关节滑膜的炎症和增生，严重者可失去劳动能力。淋巴细胞HLA-B27检测在AS中的诊断价值：许多研究证据表明人群中HLA-B27的表达频率与AS的发病率高度相关；AS患者中HLA-B27的阳性率显著高于普通人群，高达90%以上，而普通人群HLA-B27的阳性率低于10%，HLA-B27阴性的普通人群未患AS的几率为99.9%；HLA-B27检测阳性可显著增加正确

11、诊断AS的几率，阴性则为排除AS的诊断提供了有力的证据；TBNK四色试剂盒简单准确的淋巴细胞亚群的分型方案双管四色;无需仪器设置，信号采集、分析与报告一键式解决方案全自动TBNK四色试剂盒配套分析软件;检测结果准确可靠，阳性细胞峰荧光强度高，阴阳性细胞群分离度好试剂分析性能优于同类主流产品；HLA-B27检测双色试剂有效排除HLA-B7和非特异性吸附带来的假阳性并且准确识别HLA-B27/HLA-B7双阳性样本HLA-B27/HLA-B7双抗原与同型对照双管分析设计;无需仪器设置，信号采集、分析与报告一键式解决方案全自动HLA-B27检测双色试剂配套分析软件;迈瑞流式细胞仪Bricyte E6

12、介绍全中文操作界面BriCyte E6 产品特点LISLaboratory Information System条码扫描仪条码扫描仪通过扫描含lis编码的条码，可直接从lis库中调取样本信息，如“姓名”、“年龄”等，并录入软件相应界面。MRFLOWMRFLOW软件将测试完成的样本通过“审核”按钮，直接传入“LIS”系统。智能化的获取和传递BriCyte E6 产品特点机型支持上样容器种类图片自动进样机型1275 mm试管（每盘容纳40管）手动上样机型1275 mm试管1.5mL、2mL微量离心管灵活多样的进样方式BriCyte E6 产品特点自动TBNK软件自动HLA-B27软件自动设置自动测

13、试智能化自动设置BriCyte E6 产品特点自动电压自动荧光补偿手动测试自动电压BriCyte E6 产品特点8.00自动荧光补偿BriCyte E6 产品特点自动测试软件BriCyte E6 产品特点全封闭光路，恶劣环境有效防尘，光路不受影响智能光学温控，15-32 性能稳定插拔式滤光片，支持更多荧光素搭配先进的光路设计模式BriCyte E6 产品特点低生物风险低携带污染率的拭子式进样针自动清洗模块可使鞘液充分消耗的高精度检测装置。报警时鞘液液位1/2卓越的液流检测系统BriCyte E6 产品特点部件BriCyte E6BD FACSCanto IIBCI FC500 仪器尺寸*(mm

14、，宽高深)500500550910630610610978889重量*(Kg)6085146液流车小型试剂组件大内置鞘液桶、清洗液桶、外置废液桶气源无有有精致小巧的外形结构BriCyte E6 产品特点项目BriCyte E6BD FACSCanto IIBCI FC500采集速度12,000个粒子/s10,000个粒子/s3,300个粒子/s检测速度90 管/h42 管/h88 管/h携带污染率 0.1% 0.1% 1%良好的性能检测结果BriCyte E6 产品特点无外接气源，低噪音超快的测试速度精致小巧的外形结构报告格式自由编辑一键式故障解决方式防尘光路设计智能光学控温插拔式滤光片布局低

15、携带污染率鞘液充分消耗 BriCyte E6易智捷简BriCyte E6 特点总结中文界面多样进样自动设置双向LIS竞争比较型号BD:CaliburBCI：FC500BD：Canto IIMindray：BriCyte E6上市时间1994200220062014配置双光4色，市场装机基本为开放进样机型标配单激光5色自动进样；双激光5色自动进样（基本没有出货量）；没有开放进样机型双激光6色；三激光8色；上述配置分别有开放进样机型和自动进样机型双激光4色；双激光5色；双激光6色上述配置分别有开放进样机型和自动进样机型优劣比较已经上市20年，接近退市；产品陈旧，使用老苹果系统年内；产品不能升级；B

16、CI临床主力机型；软件复杂；英文界面；无自动算法软件；不能直接连接LIS；BD临床中高端主力机型；英文界面；不能直接连接LIS；全中文界面（国际英文版本）；双向LIS直连； 自动电压、补偿设置；自动算法软件；性能 精密度：CV3%精密度：CV2% 精密度：CV2%精密度：CV2% 灵敏度： 750 MESF 灵敏度：FITC 600 MESF； PE 300 MESF；APC 600 MESF灵敏度：FITC100 灵敏度：FITC200速度：10000个/秒 速度:3300个/秒 速度:10000个/秒 速度:12000个/秒 竞争比较产品Bricyte E6BD CaliburBD Can

17、to IIBCI FC500BCI Navios上市时间20141994200620022009Physical Dimensions尺寸和重量Cytometer细胞仪500*500*550914*673*615910*640*610900*610*889960*610*70060kg109.1kg145kg84.8kg104kgSupply Cart液流车N/AN/A790457724640584298610711495515930System Configuration仪器配置配置双激光4色开放进样及自动进样；双激光5色开放进样及自动进样；双激光6色开放进样及自动进样双激光4色开放和自动进

18、样双激光6色自动进样和开放进样；三激光8色自动进样和开放进样单激光5色自动进样；双激光6色开放进样双激光6色自动进样和开放进样；双激光8色自动进样和开放进样；双激光10色自动进样和开放进样43竞争比较产品Bricyte E6BD CaliburBD Canto IIBCI FC500BCI NaviosLaser Specification 激光器配置Blue Laser蓝色激光器Blue solid state diode, 488nm, 43mWAir-cooled argon-ion laser, 15 mW,488 nmBlue 488-nm solid state, 20-mWuni

19、phase argon ion, 488nm, 20mWBlue solid state diode, 488nm, 22mWRed Lasr红色激光器Red solid state diode, 638nm, 55mWOptional second laser: 635 nm.633-nm HeNe, 17-mW coherent red solid diode, 635nm, 25mWRed solid state diode, 638nm, 25mWViolet Laser紫色激光器N/AN/A405-nm solid state diode, 30-mWN/AViolet solid

20、state diode, 405nm, 40mW是否温控是否否否是Fluorescent Dyes 荧光素Blue laser蓝色激光FITC, PE, PerCP or PerCP-Cy5.5,PE-Cy7FITC, PE/PI, PerCPFITC, PE, PerCP or PerCP-Cy5.5,PE-Cy7FITC, PE, ECD, PC5 or PEC5.5, PECy7FITC, PE, ECD, PC5 or PEC5.5, PECy7Red laser红色激光APC, APC-Cy7APCAPC, APC-Cy7APC ,APCCy7, APC or Alexa Fluor

21、 647, APCAlexa Fluor 700, APCCy7, APCAlexa Fluor 750Violet laser紫色激光N/AN/APacific Blue, AmCyanN/AN/A44竞争比较产品Bricyte E6BD CaliburBD Canto IIBCI FC500BCI NaviosData Management数据管理Workstation外置工作站BD FACStation Mac Pro computerSoftware流式软件全中文软件英文软件英文软件英文软件英文软件自动化软件系统集成自动淋巴亚群及HLA-B27有自动软件，但非集成有自动软件，但非集成N

22、ANA自动设置自动设置电压、荧光补偿N/AN/AN/AN/Abi-LIS双向LIS直连需中间件需中间件需中间件需中间件Signal Processing信号处理Dynamic Range动态范围20bitFour Decade18-bitFour Decade20-bit data acquisition45竞争比较产品Bricyte E6BD CaliburBD Canto IIBCI FC500BCI Navios手动进样支持试管1275-mm试管，1.5mL或2mL离心管1275mm test tube 试管1275mm test tube 试管N/AN/A自动进样Carousel Lo

23、ader圆盘进样器40管40 (12 x 75-mm) tubes per rack.40-tube carousel32管32管 Max Acquisition Rate 最大采集速度12,000 events/secN/A10,000 events/sec3,300 events/sec25,000 events/secFluorescence荧光信号Fluorescence Sensitivity荧光灵敏度FITC200 MESF; PE100 MESF 750 MESFFITC 100 MESF; PE 50 MESF FITC 600 MESF ; PE 300 MESF;APC 600 MESF FITC 112 MESF ; PE 78 MESF;PECy5 15 MESF;APC 75 MESF Fluorescence resolution荧光分辨率FITC、PE2.0%；PerCP、PE-Cy7、APC和APC-Cy74.0%CV in FL2-Area 3%N/AN/AN/A46竞争比较产