二氧化碳培养箱原理、使用课件

1、HERAcell 150 二氧化碳培养箱培养箱原理及分类各种培养箱的特点二氧化碳培养箱 温度控制系统 湿度控制系统 二氧化碳控制 消毒灭菌系统使用CO2培养箱的注意事项培养箱的原理及分类培养箱是培养微生物的主要设备，可用于细菌、细胞的培养繁殖 原理：应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌生长繁殖的环境 如恒定的酸碱度（pH值：7.27.4）、稳定的温度（37）、较高的相对湿度（95%）、稳定的CO2水平（5%）等。分类直接电热式培养箱隔水电热式培养箱生化培养箱二氧化碳培养箱各种培养箱的特点直接电热式培养箱：外壳通常用石棉板或铁皮喷漆制成 ，夹层是用石棉或玻璃棉等绝热材料制成 ，采用的是

2、用电热丝直接加热，利用空气对流，使箱内温度均匀 隔水电热式培养箱 ：外壳通常用石棉板或铁皮喷漆制成 ，内层为紫铜皮制的贮水夹层 ，采用电热管加热水的方式加温 生化培养箱 ：同时装有电热丝加热和压缩机制冷 ，一年四季均可保持在恒定温度 二氧化碳培养箱 ：在普通培养的基础上加以改进，主要是能加入CO2，以满足培养微生物所需的环境 实验室的培养箱：美国Thermo Electron 公司生产的 HERAcell 150 CO2培养箱，内层为高光洁度电抛光不锈钢板 CO2培养箱温度控制系统水套式加热：是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定 优点：当遇到断电的时候，水套式系统就可以比较长时间

3、的保持培养箱内的温度准确性和稳定性，有利于实验环境不太稳定（如经常断电）并需要保持长时间稳定的培养条件气套式加热：通过遍布箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的，又叫六面直接加热 优点：具有加热快，温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点，特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养1.加热方式HERAcell 150 的加热方式：气套式加热2. 温度控制系统保持培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素，因此精确可靠的温控系统是培养箱不可或缺的重要部分。HERAcell 150 的温度控制：温度控制范围：室温+3 55（室温范围：1833）温度控制精度：0.1保温层材料： 矿物羊毛脂纤维

4、维持足够的湿度水平并且要有足够快的湿度恢复速度（如在开关门后）才能保证不会由于过度干燥而导致培养失败。大多数的CO2培养箱是通过增湿盘的蒸发作用产生湿气，湿度蒸发面积越大，越容易达到最大相对饱和湿度并且开关门后的湿度恢复的时间越短。CO2培养箱湿度控制系统HERAcell 150 的湿度控制：无水盘，箱体底部采用独特的水库式底盘设计，以做到蒸发面积最大化，使培养箱内能快速达到饱和湿度状态，且湿度恢复速率比普通的水盘湿度培养箱要快5倍相对湿度：95%储水量3L低水位警告装置：独特的反射型水位警告装置，无污染，低故障 通过红外传感器（IR）或热导传感器（TC）进行测量。两种传感器都是准确的。红外传

5、感器系统包括一个红外发射器和一个传感器，当箱体内的CO2 吸收了发射器发射的部分红外线之后，传感器就可以检测出红外线的减少量，与箱体内CO2的水平相对应，从而可以得出箱体内CO2的浓度。热导传感器：对箱内空气热导率进行连续测量,输入CO2气体的低热导率会使腔内空气的热导率发生变化,这样就会产生一个与CO2浓度成正比的电信号CO2培养箱CO2浓度控制系统HERAcell 150 采用热导传感器HERAcell 150 的CO2浓度控制：CO2 浓度控制范围：TCD 020%CO2 浓度控制精度：+ 0.1%CO2 输入压力：0.81barCO2 纯度： 99.5% CO2 浓度标准系统：专利技术

6、CO2 浓度校准自动归零系统， 避免CO2 测量系统在使用一段时间后产生漂移，导致箱体内二氧化碳浓度不稳定，致使培养失败紫外消毒功能：紫外消毒能力是与紫外灯距离目标的距离的二次方成反比， 距离越远，消毒能力越差，具有局限性设计过滤器，能过滤培养箱内空气，可过滤除去99.97% 的0.3 微米以上的颗粒， 由于受到过滤膜孔径的影响，无法去除病毒和一些微小细菌高温消毒，能使箱内达到高温的环境从而杀死污染微生物，达到消毒灭菌目的 比较有效CO2培养箱消毒灭菌系统污染是导致细胞培养失败的一个主要因素，需要尽量减少微生物可以生长的区域和表面，并结合自动排除污染装置来有效防止污染的产生。高温干热消毒高温湿

7、热消毒 高温湿热由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，因此该法的灭菌效率比干热灭菌法高。原因如下： 蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量愈大，发生凝固所需的温度愈低； 湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热，加速提高温度； 湿热的穿透力比干热大，使其深部也能达到灭菌温度 湿热消毒一般控制在90就能达到很彻底的消毒效果，整个消毒过程中培养箱内的所有附件都不用取出；干热消毒温度一般都在100以上，培养箱内的传感器等都要取出，等消毒结束再装上，这样即麻烦，附件又不能同时消毒，增加二次污染的几率。HERAcell 150 的消毒方式：高效高温湿热ContraCon全自动消毒系统 ，可有效地清

8、除细菌、霉菌、真菌孢子和支原体 1.要做好使用前的准备工作二氧化碳培养箱应由专人负责使用，操作盘上的任何开关和调节旋扭一旦固定后，不要随意扭动，以免影响箱内温度、二氧化碳浓度、湿度的波动，同时降低机器的灵敏度；箱子的放置要水平，避免阳光直射和灰尘等，要保证仪器周围的气流循环，后部及侧面应留出5cm的空隙；加装稳压电源保证电源电压波动不超过220V10%； 所加入的水必须是蒸馏水或无离子水, 防止矿物质储积在水箱内产生腐蚀作用, 经常检查箱内水是否足够。使用前箱内应用消毒酒精或碘溶液彻底擦洗, 防止其他微生物污染, 导致实验失败。所使用的二氧化碳必须是纯净的, 否则降低二氧化碳传感器的灵敏度和污

9、染二氧化碳过滤装置CO2培养箱的注意事项 2. 正确充气延长二氧化碳传感器使用寿命二氧化碳传感器正常反馈要求进气压为0.06MPa 。当箱内气压降低时, 二氧化碳传感器在低压刺激下有节奏地开闭, 向箱内慢慢充气, 当进气压达0.1MPa 时, 自动停止调节。如充气方法不当, 使进气压力增大, 当超过0.1MPa 甚至0.2MPa压力, 会损伤二氧化碳传感器3. 注意培养箱湿度为饱和湿度环境可以避免培养液中二氧化碳逃逸, 培养液中pH 值稳定,有利于细胞生长 及时加水，保持培养箱内的湿度水平开门操作时快速存取，减少箱内气体和湿度变化, 节省气体, 稳定细胞生长环境 4. 二氧化碳培养箱零点飘移的监控和零点的调整培养箱使用过程中，二氧化碳零点会发生自然飘移现象。二氧化碳培养箱零点的调整的步骤（一般以空气为标准来校零，每半年进行一次）： (1) 把二氧化碳浓度设定值设为零，目的是不让钢瓶中二氧化碳进入箱内； (2) 打开所有的门5 min ，往水盆内加上水，关上所有的门，