唾液作为寄生虫病诊断标本的研究

1、唾液作为寄生虫病诊断标本的研究唾液作为标本诊断某些疾病已受到很多学者的器重，在病毒如HIV、HBV、麻疹、风疹病毒1,2,3和细菌如百日咳杆菌等病原体引起的熏染性疾病中已见现实应用。在寄生虫熏染的诊断中固然如今的研究尚不多见，但因唾液具标本网络较为便利、非损伤性、易为病人担当等长处，也引起了寄生虫学界的器重。本文旨在快要年来外洋有关唾液标本用于寄生虫病诊断的研究希望作一扼要综述。1唾液标本的构成及网络处置惩罚唾液为口腔中的三对大唾液腺(腮腺、颌下腺、舌下腺)及漫衍于上下唇、颊部等处的小唾液腺所排泄的液体，包罗有水、糖卵白、溶菌酶、过氧化物酶、乳铁卵白、碳酸氢盐和磷酸盐构成的缓冲体系及免疫球等卵

2、白多种身分。寄生虫病检测全部标本多为取自口腔的全唾液，此中不但包罗来自种种诞腺的混淆的排泄物，亦包罗脱落的上皮细胞、软构造的微生物及来自龈裂内的液体等17。正凡人逐日全唾液的排泄量约为11.5升，其pH值在5.07.0之间，唾液中的卵白质浓度为0.0251g/100l，较血浆中低100倍摆布。唾液中含有多种免疫球卵白，重要为由唾液腺局部的浆细胞产生的排泄型IgA(SIgA)，由血清经龈沟渗入口腔的IgG、IgA和少量Ig与IgE4,5。每100l唾液中IgA、IgG与Ig的含量别离为19.4g、1.4g、0.2g，约莫为血清浓度的1/10，1/800与1/4001。唾液中的免疫球卵白的含量虽远

3、低于血清，但Parry1用放射免疫阐发(RIA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)等要领检测免疫缺陷病毒、甲型肝炎与风疹病毒熏染者唾液中的特异性抗体后以为，唾液中的抗体的程度已充足用于一些免疫学诊断，唾液中的IgG一样平常多用来诊断构造及血液内的寄生虫。hallabe6将放射性125I标识表记标帜IgG注入恒河猴体内，30分钟后标识表记标帜物便可出现于口腔唾液中，从而证明唾液中IgG可实时反响体内IgG的存在。别的，Asta7创造无牙或牙齿较少者唾液中IgG含量落落而牙周病患者中唾液IgG程度上升。对肠道寄生虫病的诊断多接纳检测唾液中的SIgA。有研究者创造肠道粘膜相干淋巴构造抗原刺激后产生的免

4、疫反响，可表示在满身各粘膜部位，在唾液等处可检测的排泄性免疫反响物质在血液大概缺如。非刺激性的全唾液的网络可以通过使唾液从下唇滴入漏斗，然后放进刻度管内。刺激后唾液的网络，可使受试者品味一些对实行效果无影响的物质如橡皮圈等，以刺激唾液的排泄。如今普及利用的要领是让病人将棉花球放入口中，用舌翻动，特殊是使之打仗齿龈的部位，待浸湿后取出抗出唾液。在动物实行中，可用电流刺激排泄神经或利用药物加强唾液排泄，以助网罗4。由于有细胞碎屑及沉淀的粘液素，全唾液每每很浓重且为非均质，用于免疫诊断时需于低温下经14000g以上的高速离心以去除杂质。需恒久促存时可利用硫柳汞防腐，但不宜利用叠氮纳以免滋扰实行效果。

5、唾液中的很多有机身分会因细菌酶和低渗唾液中白细胞剖析后放出的酶作用而很快剖析，故唾液在网络后应立即举行阐发或冰冻保存。亦有研究者将网络后的唾液于56温育45分钟，以淘汰唾液中的酶类对有机身分的剖析作用8。2检测要领由于唾液中免疫球卵白的含量较低，故宜接纳较敏感的要领。在免疫诊断要领中，ELISA因其操纵轻便、用度较低而应用较多，特殊是间接ELISA已在猪囊尾蚴、阿米巴原虫、刚地弓形虫等寄生虫引起的疾病中普及应用。比年来，研究者对抗原举行了革新，如在脑囊尾蚴病诊断中，Planlarte9通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS)分散猪囊尾蚴的卵白质抗原，以免疫印迹试验(esternbltting)

6、挑选出组分抗原GP24，用于检测猪囊虫病，特异性精良。蓝氏贾第鞭毛虫膜卵白经SDS分散出的24个抗原片断，经唾液标本的挑选，分子量为120，105，92，66，32，29，14kDa的片断被以为有特异性，具诊断潜力。由于新型诊断抗原的利用，间接ELISA的特异性与敏感性都有所进步。酶联免疫转移印迹试验(EiTB)在唾液样本的检测中亦被利用，此种要领敏感性与特异性均较高，但操纵庞大，用度较高，需必然的装备，多用于研究事情。Felden10和Flisser11曾用EITB技能检测患者唾液中的特异性IgG抗体以诊断脑囊虫玻Felden创造此中抗原片断GP24最易被唾液中的IgG所识别。直接凝集试验(

7、DAT)检测唾液特异性IgG抗体曾usuA12用来诊断黑热病，因其操纵简朴、唾液标本用量较少，而实用于内脏利什曼病的盛行病学的观察12。别的，亦将有染料试验(DT)用于诊断唾液中抗刚地弓形虫抗体的报道13。3在寄生虫病诊断中的应用3.1阿米巴病阿米巴病的诊断多依赖在粪便中查寻病原体。但粪便查抄费时、费力，需有履历的事情职员，且不适于大范围的普查。ur14在墨西哥阿米巴病盛行区，以粪检病原体、ELISA要领检测粪便中溶构造内阿米巴物异性膜抗原与唾液中检测特异性抗体三种要领，对223名514岁门生举行普查后创造，唾液中特异性IgA检测的敏感性为85，特异性达98。此效果与粪中抗原检测的效果无差异(

8、r0.753，P0.001)，也与粪便中病原体查抄的效果同等。由于唾液检测较为便利，且比血清与粪便查抄自制，以为可实用于盛行病学观察。ur同时创造人群中阿米巴原虫的熏染率与唾液中IgA检测的敏感性呈正相干，与特异性负相干。当人群熏染率5时，其特异性99，敏感性60，熏染率70时的特异性为70，敏感性达99。Aeti15检测了阿米巴病患者、阿米巴带虫者和康健人唾液中的特异性抗体后创造，IgA在侵袭性阿米巴病患者唾液中明显升高，而无病症带虫唾液中的IgA程度与康健人无差异。故以为唾液中IgA抗体仅得当于诊断侵袭性阿米巴病，对阿米巴带虫者无代价。别的，研究者亦有报道唾液中抗溶构造内阿米巴IgA抗体在

9、治疗后45天可消散，成人与儿童熏染阿米巴后排泄性免疫应答相似。Brian16以260kDa半乳糖按捺性粘附卵白(GIAP)为诊断抗原，用ELISA要领检测了13名阿米巴肝脓肿患者(此中4名为经甲硝唑治疗病人)唾液中抗GIAP抗体IgA与血清中的IgG。创造两者均显着升高，但两者之间不相干，而治疗与未治疗病人唾液中的IgA程度无差异。3.2弓形虫病Hajeer12经人体实行后创造人们熏染弓形虫后，唾液中11天即可查见Ig抗体，27天后查见IgG抗体，两者在81天后转阴。而IgA可在急性、慢性熏染，及血清检测阴性熏染有唾液中均可查见，从而以为唾液中IgG、Ig对急性弓形虫病具有诊断潜力，而唾液中I

10、gA的程度对急、慢性弓形虫病无区分意义。Lyela8对60人举行盛行病学观察后证明唾液中抗弓形虫IgA程度可反响血清IgG程度。唾液中的IgA检测可用于弓形虫病的检测，而唾液中的IgG不适于慢性弓形虫熏染的盛行病学观察。唾液标本除用于免疫学诊断外，还可用于病原学查抄。AendEira17曾在一名3岁幼童唾液及扁桃体中查寻到刚地弓形虫的滋养体。而Terragna18将弓形虫熏染兔的唾液接种小鼠后创造，在33熏染兔的唾液中有病原体存在，从面证明唾液在弓形虫流传中的前言作用。但Aest19在检测了26位艾滋病人(此中6例明白诊断并发弓形虫病)的唾液，效果均未创造弓形虫，故以为在艾滋病人唾液中探求弓形

11、虫病原体以诊断弓形虫病的意义不大。3.3杜氏利什曼原虫病杜氏利什曼原虫熏染引起的内脏利肝什曼病的免疫诊断多依赖血清学查抄。asu12以DAT检测了19例黑热病人唾液中的特异性抗体，18例唾液检测呈阳性效果，且特异性为100。由于唾液标本检测较为便利及宁静，作者以为可取代血清举行免疫诊断。3.4蓝氏贾第鞭毛虫病Disney20用ELISA法检测24名蓝氏贾第鞭毛虫患者唾液中SIgA后创造，其SIgA程度与康健人有明显性差异(P0.001)。3.5猪囊尾蚴病本病的临床表示多样而无特异病症，临床诊断较为困难。如今较为有用的诊断要领包罗盘算机断层扫描、核磁共振(RI)、检测脑积液与血清标本中抗囊尾蚴抗

12、体。但T及RI用度较高，脑积液与血清检测具有损伤性。有鉴于此，唾液中特异性抗体的检测有望为本病提供较为抱负的诊断要领。Aasta7用猪带绦虫囊尾蚴的粗提物作为诊断抗原，用ELISA要领检测了43例脑囊病患者、34例非熏染性脑部疾病患者及39名正凡人唾液及血清中的特异性抗体后创造，唾液中特异性IgG的检测对脑囊虫具有较高的诊断代价，但IgA的检测无诊断意义。由于囊尾坳粗提物与扁虫有交织抗原，故此要领仅实用于非血吸虫病及包虫病盛行区。Feldan10用两种要领(ELISA、EITB)检测了28例脑囊虫并29例非熏染性脑部疾病及26名康健人唾液与血清中的特异性抗体后创造，ELISA检测唾液中IgG的

13、敏感性为82.1，高于血清标本检测效果(70.4)。Feldan以为EITB可作为血清诊断囊虫病较好的要领，而ELISA检测唾液中的IgG抗体，因其无痛、无损伤性可应用于临床及盛行病学观察。3.6绦虫病Kinder21阐发了豆状绦虫(Taniapisifris)熏染犬唾液与血清中免疫球卵白后以为，唾液中特异性IgA与血清中IgG抗体可反响带绦虫熏染，这两种抗体在熏染后两周上升，治疗4周即明显落落。由于唾液中IgA在绦虫产卵前已出现，治疗后可消散。故可用于区分新旧熏染。kinder以为检测唾液中的IgA对肠道绦虫病具诊断潜力。参考文献1ParryJVetal.Lanet,1987;2(8550)

14、72-752PerryKRetal.JedVirl,1993;40(3):235-2403ArhibaldDetal.JInfDis,1987;155(4):793-7964henB.illiaHeineannedialBksLiited,19765andelID.JralPathled,1990;1993):119-1256hallabeSJetal.linExpIunl,1978;34(3):417-4228LyalAetal.JralPathled,1997;26(4):17-1919PlanatreAetal.IntJParasitl,1994;24(5):733-73810Feldanetal.TransRsTrpedHyg,1990;84(4):559-56211FlisserAetal.AnnParasitlHup,1990;65(Suppl1):95-9812asuAetal.TransRSTrpedHyg,1994;88(6):66013HajeerAHetal.ParasiteIun,1994;16(1):43-5014Del-urRetal.JIntDis,1990;162(6):1260-136415AetiAetal.JInfDis,1991;164(3):613-61416BrianLKetal.AnnJTrpedHyg,11