流行病学基础第六章实验流行病学项目研究

1、流行病学基础第六章实验流行病学项目研究1、试述“观察性研究”的局限性？2、何谓实验？“实验”和“观察”的区别？3、如何评价某药物的疗效和不良反应？4、如何评价某疫苗的预防效果？5、如何评价饮水加氟的预防效果？问题与讨论 第一节 概述 第二节 实验流行病学研究的设计与实施 第三节 实验流行病学研究的资料收集和分析 第四节 实验流行病学研究应注意的问题 第五节 实验流行病学研究的优缺点 总结 第六节 实验流行病学研究举例讲课提纲第一节 概 述一、概念 实验：人为控制研究条件 实验流行病学研究：是指在研究者的控制下，对受试对象施加某种因素或干预措施，或者消除某种因素，以观察对发生疾病或者健康状态的影

2、响James Lind（1747年）：证实了新鲜水果如柠檬和柑桔等可预防坏血病Goldberg（1915年）：否定了糙皮病系感染引起的观点，证实为营养缺乏病的治疗试验1920-30s：美国洛克菲勒研究所的Webster及英国的Topley、Wilson、和Greenwood等进行了动物流行病学的经典研究1948年：链霉素治疗肺结核效果的随机对照试验Taylor（1946-1950年）：百日咳菌苗的预防试验1955年：美国Salk脊髓灰质炎灭活疫苗的预防试验1962年：南斯拉夫伤寒石炭酸菌苗的随机对照预防试验 二、简史开创了流行病学临床试验的先河VitC缺乏 坏血病 (1747)Edward S

3、alk脊髓灰质炎疫苗现场试验(1955)美国+加拿大疫苗组200,745 人，安慰剂组201,229 人保护率：60-90%Thomas Francis,Jr脊髓灰质炎疫苗现场试验推荐参考文献吴涛, 詹思延, 李立明. 流行病学实验研究发展历史. 中华流行病学杂志 2004; 25(7): 633-636.流行病学实验研究的发展历史三、实验流行病学研究的设计原则（1）对照的原则（2）随机化的原则：随机抽样、随机分组（3）盲法的原则 （1）属于前瞻性研究，即必须直接跟踪研究对象 （2）是实验法而非观察法，必须对实验组（以个体或群体 为单位）施加一种或多种干预措施 （3）研究对象必须是来自同一总体

4、的抽样人群，研究对象 的分组必须采用随机分配原则 （4）必须设立严格的平行的实验组和对照组，两组研究因 素之外的其它因素应均衡、可比四、基本特点 1、临床试验（clinical trial） 2、现场试验（field trial） 3、社区干预试验（community intervention trial）五、实验流行病学研究分类（一）按研究场所划分研究对象：以病人个体为单位；包括住院和未住院病人研究目的：某种药物或治疗方法的效果检验和评价设计模式：研究对象随机分组实验组对照组有效应无效应有效应无效应1、临床实验（clinical trial）临床试验分期期临床试验：10-30人，临床药理学和

5、人体安全性评价，观察人体耐受程度和药代动力学期临床试验：RCT，100-300人，初步评价药物的有效性，推荐临床用药剂量期临床试验：多中心RCT，进一步确定有效性，监测副作用，收集安全用药信息期临床试验：新药批准上市后监测研究对象：以人群个体为基本观察单位，可以是正常人群 或未患所研究疾病者研究目的：一般在高危人群中进行，以评价预防措施的效 果，属于第一级预防。常用于预防接种、药物 预防等措施的效果评价。2、现场试验（field trial） 也称人群预防试验3、社区干预试验（community intervention trial） 研究对象：以人群作为整体进行干预研究目的：对某种预防措施或

6、方法进行考核或评价随机化对照试验（Randomized Controlled Trial，RCT） 类实验（quasi-experiment）（二）按所具备设计的基本特征划分五、实验流行病学研究分类 前瞻 干预 对照 随机Randomized Controlled Trial，RCTquasi-experiment 前瞻 干预 对照 随机/ 一、明确实验研究目的 首先要明确实验目的，这项实验解决什么问题： 第二节 实验流行病学研究的设计与实施 单纯验证病因？ 考核评价预防措施的效果？ 预防性实验？ 治疗性实验？ 控制个体发病？ 控制疾病流行？原则：一次实验最好解决一个问题 Example抗氧化

7、剂预防先兆子痫的国际性试验(INTAPP)研究目的：评价补充抗氧化剂对预防妊高征及其不 利状况的潜在效益。 1、实验地区和单位人口要相对稳定，流动性小，数量 要足够，人口的统计学特征应与总体一致2、实验研究的疾病有相对较高而且稳定的发病率3、评价疫苗时，应选择近期内未发生该病流行的地区4、现场医疗卫生条件应能保证实验的顺利实施5、该地区各级部门重视，群众乐于接受二、确定实验现场 根据实验目的确定 根据研究目的选择研究人群，包括实验组和对照组 入选标准和排除标准必须明确三、选择研究对象减少结果偏倚(保证内部真实性)影响结果外推(影响外部真实性)排除(exclusions)纳入标准：成年女性怀孕1

8、2到18周 排除标准：规律性服用维生素C超过200mg/日和（或）维生素E超过50IU/日者 服用沃法令（warfarin）阻凝药者（因为理论上维生素E可以增强沃法 令的作用） 本次怀孕中已知胎儿畸形（如葡萄胎）或已知胎儿染色体或器官畸形 者 有以下并发症史者：内分泌疾病如甲状腺疾病、肾病影响了肾功能、 癫痫、结缔组织疾病如红斑狼疮和硬皮病、活动 性和慢性肝病（肝炎）、心脏疾病、严重肺部疾 病、肿瘤、血液系统疾病（贫血或凝血功能异 常，病人可被纳入） 重复性自然流产者。如果证明在补充的时间里宫内可以养活胎儿，则 即使早期妊娠有过出血者也可以被纳入。 在孕期经常服用违禁药品和酒精者。吸烟者为合格

9、研究对象，我们将 掌握病人每天吸烟量，另外，也将收集间接吸烟的信息。 Example抗氧化剂预防先兆子痫的国际性试验 选择研究对象的主要原则： 1、选择可能对干预措施有效的人群 2、选择预期发生率较高的人群 3、选择已知干预措施对其无害的人群 4、选择能将实验进行到底的人群 5、选择依从性好的人群 6、选择人口稳定，医疗保健条件较好的社区或人群三、选择研究对象 1、决定因素 事件在一般人群中的发生率 试验组和对照组数值差异的大小 检验的显著性水平（）和检验效率（1-） 单侧还是双侧检验 研究对象分组数量四、估计样本含量 2、计算公式 P1 ：对照组发病率p2 ：试验组发病率；由既往资料和有关文

10、献查得Z ：水平相应的标准正态离差Z ：1水平相应的标准正态离差非连续性变量样本大小计算公式连续性变量样本大小计算公式（适用于N30时） ：为估计的标准差 d：为两连续性变量的差值Z ：水平相应的标准正态离差Z ：1水平相应的标准正态离差 2、计算公式 Example 1计数资料假设对照组的发病率为40%，通过干预措施发病率下降到20%才有推广使用价值，规定（双侧），问两组要观察多少人？ 干预措施实施前后的变化(1 - )单侧检验或双侧检验研究对象分组数量EpiCalc 2000EpiCalc 2000计量资料假设对照组血清胆固醇水平为215mg/dl，合理膳食可以使干预组较对照组降低15mg

11、/dl，已知从其他资料获得胆固醇标准差为25mg/dl，规定（双侧），计算各组样本数？ Example 2EpiCalc 2000EpiCalc 20001、无任何危险因素的未生育过的妇女（层）根据NICHD MFMU Network在高危女性中关于阿司匹林试验发表的数据和从两个合作的三级产科中心（the Royal Alexandra医院，埃德蒙顿（RAH，1996）和St-Francois dAssise 医院，魁北克（HSFA，1999）得到的一年分娩记录，我们估计主要结果发生率为4。为了发现危险度降低30（从到）需要9912名参加者（每组4956人），此时效能为90，错误为5。我们将在

12、层中每组招募5000病人，共10000人。2、有危险因素的妇女（层）根据NICHD MFMU Network在高危女性中关于阿司匹林试验发表的数据和从上述两个合作的三级产科中心得到的数据，我们估计在这层中主要结果得发生率将为15。同样，我们假设主要结果的发生率将下降30。在错误为5，效能为90的情况下，需要2392名女性（每组1196人）来证明主要结果的危险度下降30（从到）。我们将在层每组招募1250人，共2500人。 Example抗氧化剂预防先兆子痫的国际性试验五、随机来自总体的随机抽样人群随机分配到实验组和对照组控制混杂的方法研究设计阶段随机化限制匹配资料分析阶段分层分析多变量分析常见

13、的随机分组方法包括： 单纯随机分组（simple randomization） 分层随机分组（stratified randomization） 区组（整群）随机分组（cluster randomization）五、随机Simple RandomizationEpiCalc 2000Stratification Randomization Categorizing subjects into subgroups by specific characteristicsEnables researchers to look into separate subgroups to see whethe

14、r differences exist总体层层层可按年龄、性别、种族、教育水平等分层在各层内再进行前述的简单随机分组危险度分层参加者 低危险层正处于怀孕且未生育过的妇女高危险层正处于怀孕且未生育过的妇女或生育过的妇女，她们至少存在以下一种情况：妊前慢性高血压 ( 在孕20周或使用抗高血压药物以前舒张压90mmHg)，妊前糖尿病（胰岛素依赖型或胰岛素替代型），多产，或妊娠前有先兆子痫史 Example抗氧化剂预防先兆子痫的国际性试验以家庭、学校、医院、村庄或居民区等为单位随机分组要保证组间可比性(群间变异越小越好) Cluster randomization随机分组的注意事项 对照组与实验组的基

15、本条件要均衡可比 两组成员的易感性要有可比性 两组成员感染疾病的机会要可比 两组发现病例的方法、诊断标准、措施等要一致 对两组的调查应同样重视 最好用“双盲法”处理实验组和对照组五、随机 设立立对照的意义 1、通过对照组可获得研究指标的数据差异 2、可排除被试因素以外其它因素对实验结局的影响六、设立对照 影响干预结局的因素 1、不能预知的结局（unpredicable outcome） 2、向均数回归（regression to the mean） 3、霍桑效应（Hawthorne effect） 4、安慰剂效应（placebo effect） 5、潜在的未知因素的影响霍桑效应因受到额外关注而

16、引起努力或绩效上升的现象，源于失败的管理研究。1924年哈佛心理专家在西屋电气公司霍桑工厂做试验，试图通过改善工作条件与环境等外在因素来提高劳动生产率，选定继电器车间6名女工作为观察对象，遗憾的是不管外在因素怎么改变，该组生产效率一直在上升。原因是当6个女工被抽出来时，她们就意识到自己是特殊的群体，专家一直关注的对象，这种受注意的感觉使她们加倍努力工作，以证明自己是优秀的和值得关注的安慰剂效应(placebo effect)安慰剂是指既无药效、又无毒副作用的中性物质构成的、外形似药的制剂，多由葡萄糖、淀粉等无药理作用的惰性物质构成安慰剂对于那些渴求治疗、对医务人员充分信任或崇拜的病人，能在心理

17、上产生良好的积极反应，出现希望达到的药效。这种反应就称为安慰剂效应1、自身对照2、 交叉对照3、 标准疗法对照4、 安慰剂对照 对照的种类六、设立对照概念：指实验研究中，不让受试者、研究者或其他有关人 员知道受试者接受的是何种处理，从而避免他们的 行为和决定干扰试验结果目的：减少研究对象和研究者主观因素的影响控制信息偏 倚种类：受试者、研究者、设计和资料分析者 七、盲法的应用单盲(single blind)双盲(double blind)三盲 (triple blind)盲法：通过电子数据管理平台（GEREQ）在随机分组时给每个病人一个编号和一个研究治疗药物批号。 Example抗氧化剂预防先

18、兆子痫的国际性试验开放试验 (open trial)不可能实现盲法外科手术锻炼饮食教育我猜我猜我猜猜猜即使是药物也很难完全做到盲法药物的气味、味觉、感觉副作用检验结果对药物进行化验对照可比的对照有效的对照组间非处理因素可比组间效应测量可比随机分配盲法保证基线组间平衡保证随访过程中组间平衡八、确定实验观察期限规定研究对象开始观察、终止观察的日期实验目的干预时间效应出现的周期九、选择结局变量及其测量方法影响结局变量选择的因素：相关性可行性客观性灵敏性和特异性可接受性十、确定基线数据，建立监测系统基线数据包括：人口学特征结局指标的基线水平其他可能影响研究结果的因素十一、对象的随访和资料的收集随访的内

19、容干预措施的执行情况有关影响因素的信息结局变量实验措施的标准化十二、实验流行病学研究的质量控制 进行人群实验研究应用统一的措施、方法和标准 指标应有特异性，能客观衡量 要统一培训调查员，按照统一的方法和标准进行观察 在正式试验前要进行必要的检查和考核 要有科学的质量控制措施在制定实验设计时，就应规定资料收集、整理分析及效果考核的指标和方法在观察结束时，将收集的资料进行分组，并按观察目的整理分析先进行统计描述，然后用2检验，t检验及保护率等计算进行效果分析 第三节 研究资料的收集和分析统计分析:根据研究目的来进行分析。每一层以对照组为基础计算主要结果相对危险度（RR）和95CI。 Example

20、抗氧化剂预防先兆子痫的国际性试验 一、研究对象的排除和退出 1、排除（exclusion） 2、退出（withdrawal） 退出的原因 （1）不合格（ineligibility） （2）不依从（noncompliance）包括drop-out和drop-in （3）失访（loss to follow -up）一般要求失访率10% 第三节 研究资料的收集和分析研究对象退出:研究对象可能在任何时候退出研究，或者根据调查者判断而被从研究中排除。另外，如果研究对象干扰研究计划或由于管理和（或）安全原因，则她可能被迫退出。一旦研究对象由于出现有害事件而放弃或退出研究，研究调查者或研究协调者必须立即通报

21、TCC， 一份完整的有害经历工作表，同时有调查者的签名。任何出现在放弃或退出研究时出现的有害事件应按照G部分所述的安全需求进行随访。如果研究对象的放弃或退出发生在研究完成之前，则相关信息必须输入电子数据管理平台。从研究中退出的病人将仍放在她们所在的组中以便进行意向性分析。 Example抗氧化剂预防先兆子痫的国际性试验 实验结果的分析方法 同队列研究基本相同 指标选择的要求二、实验效果的主要评价指标和方法 （1）不但用定性指标，并尽可能用定量指标 （2）测定方法具有较高的灵敏度和特异度 （3）要易于观察和测量，且易为受试者接受 第三节 研究资料的收集和分析频率指标治疗措施有效率治愈率病死率生存

22、率复发率预防措施抗体阳性率发病率感染率结局指标频率指标计量指标计量指标治疗措施血压胆固醇预防措施抗体几何平均滴度 1、 评价治疗措施效果的主要指标（1）有效率（2）治愈率（3）N 年生存率（1）保护率（） （2）效果指数（Index of Affectiveness，IE）（3）抗体阳转率（4）抗体几何平均滴度（GMT）2、评价预防措施效果的主要指标（5）人群认知、态度、行为的改变（6）行为危险因素的变化（7）生存质量的变化（8）干预投入、产出效果评价慢性非传染性疾病评价指标-中间结局变量统计方法分析将基于“干预治疗”来进行。对于主要结果，维生素C和维生素E的效果将分别在两个危险层进行评估：1

23、）无任何危险因素的未生育过的妇女，2）有危险因素的妇女。首先，我们将比较干预组和安慰剂组基线病情预断变量之间的差异。如果在这些基线变量中无差异，则计算它们的RR值和95CI。另外，应用分层分析计算各层RR值（MantelHaenszel法）或者应用多因素回归分析计算各层OR值，调整其中可能存在的混杂变量。对于次要结果，二项变量（如先兆子痫，早产）将用CochranHaenszel分析。连续结果变量（如出生体重，孕龄）将采用T检验，ANOVA或线性回归分析（如有需要）以调整其他协变量。 Example抗氧化剂预防先兆子痫的国际性试验间歇分析当每组有100个文件和200病例后，将用“Peto”标准

24、完成间歇分析。有害事件率将有数据监控和安全委员会（DMSC）定期监控。亚组分析我们将检验以下情况的不同是否影响了维生素C和维生素E对主要结果和先兆子痫发生率的效果，这些情况包括：a）国家，b）种族和社会经济地位，c）吸烟与否，d）年龄（20，35，等）在随机分组前和孕26周时饮食规定和商业维生素C和维生素E的消费量，f）病人依从性（服用的药片百分比）。用分层分析和多因素回归分析来估计各层OR值和它们的95CI，以调整混杂变量和评价交互作用。 Example抗氧化剂预防先兆子痫的国际性试验偏倚问题偏倚 (bias) 使实验流行病学研究的结果系统的偏离真相，即低估或高估某干预措施的效果。选择偏倚信

25、息偏倚混杂偏倚研究初期严格、正确地执行随机化分配及盲法(隐瞒分组情况)，可以最大限度地减少实验流行病学研究中的选择偏倚反之，实验流行病学研究同样不能幸免选择偏倚偏倚问题选择偏倚信息偏倚混杂偏倚随机分配后实验流行病学研究中涉及的选择偏倚主要来自于随机分配后的“退出” (withdrawal)不合格(ineligibility)不依从(noncompliance)失访(loss to follow-up)降低效率易引入选择偏倚偏倚问题选择偏倚信息偏倚混杂偏倚随机分配后“退出”引起偏倚的原因退出者发生结局事件的概率不同于继续随访者(信息截尾)信息截尾的程度在不同干预组间不同意向性分析(intenti

26、on to treat analysis)偏倚问题 Example意向性分析(intention to treat analysis)选择偏倚信息偏倚混杂偏倚确定偏倚(ascertainment bias)施加干预的人被干预的人判断结局的人分析数据的人(安慰剂)+偏倚问题选择偏倚信息偏倚混杂偏倚随机化偏倚问题Randomization beautifully solved the problem of confounding 随机分组以最美丽最简单的方式解决了混杂的问题Placebo and blinding reduce selection and information bias 安慰剂和

27、盲法协助控制选择偏倚和信息偏倚The scientifically most rigorous method of establishing causal relationship and forms the gold standard for evaluation of clinical effectiveness. 随机对照临床试验是在人群中建立因果关系最可靠的方式, 因而成了评估医学干预效果的金标准第四节 流行病学实验研究中的伦理问题伦理道德问题（problems of ethics）研究对象人 研究必须具有科学依据 公平选择研究对象 获得知情同意(informed consent) 对

28、照组的选择和“善后”处理 较长试验期限导致“延误”问题 1、能够对研究对象、干预因素和结果的分析判断进行 标准化 2、随机化分组，提高了可比性，较少了偏倚 3、作为前瞻性研究，实验组和对照组同步比较，能最 终作出肯定结论第五节 实验流行病学研究的优缺点一、主要优点 1、实验设计和实施条件要求高、控制严，难度较大 2、受干预措施适用范围的约束，所选择的研究对象 代表性不够 3、研究人群的依从性问题不易把握 4、有时涉及到医德问题二、主要局限性第五节 实验流行病学研究的优缺点与队列研究、病例对照研究、现况研究进行比较 伤寒疫苗自1896年开始被应用，此后对其预防效果存有争论。 1962年南斯拉夫伤寒委员会报告了在人群中预防实验结果后，才首次肯定了其预防效果。 受试者随机分三组： 第一组接种伤寒石炭酸死菌苗 第二组接种伤寒乙醇死菌苗 第三组未接种为对照组 第六节 实验流行病学研究举例现场试验：南斯拉夫伤寒石炭酸菌苗的随机对照预防试验石炭酸菌苗组乙醇菌苗组对照组1954年接种人数1150312012711988发病例数71723 罹患率(1/万) 6.114.119.21955年接种人数859589139200发病例数268罹患率(1/万)2.36.78.9病例数合计92331接种组与对照组