微生物综合实验报告酸奶的制备

1、C屮u胆紅*3瞬微生物综合实验报告酸豹的制簷姓名：邢其劝学号：09030111024班级：生化制药0931分组：第六组指导教师：谢光杰陈振兴康熙实验时间：2010.12.062010.12.17一、前言概述近年来，我国发酵工程技术不断发展，在食品工业上的应用：主要有三大类产品，一是生产传统的发酵产品，如啤酒、果酒、食醋等；二是生产食品添加剂；三是帮助解决粮食问题。学校为了让学生注重理论与实践相结合，增强学生的动脑、动手能力训练，对发酵技术有一定的了解。按我们学校的教学计划安排，本学期(2010.12.062010.12.17)为我们生化制药0931班综合实验教学课程，主要的任务是制备酸奶。在学

2、校的组织下，由谢光杰、康熙和陈振兴三位老师带领我们班41名学生在学校实验室进行乳酸发酵测定与乳酸饮料的制作。一方面是为了加深和巩固所学的理论知识，提高分析、解决问题能力，另一方面是为了培养我们有良好的职业道德，严格认真、实事求是的严谨科学态度和工作作风，为以后的工作打下良好的基础。因此，全班同学对这次综合实验热情都很高，都下决心要好好利用这次机会充实自己！、乳酸的简介乳酸纯品为无色液体，工业品为无色到浅黄色液体，具有吸湿性。乳酸有很多衍生物，包括其盐和酯，盐类溶解度都较高，是很好的矿物元素补充剂，也是很多药物的成分之一，其酯类由于具有天然降解的优势，广泛用于各种工业技术和日常生活中。乳酸菌指发

3、酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。凡是能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。乳酸菌可用于制酸奶；酸奶的好处有：一是能将牛奶中的乳糖和蛋白质分解，使人体更易消化和吸收；二是酸奶有促进胃液分泌、提高食欲、加强消化的功效；三是乳酸菌能减少某些致癌物质的产生，因而有防癌作用；四是能抑制肠道内腐败菌的繁殖，并减弱腐败菌在肠道内产生的毒素；五是有降低胆固醇的作用，特别适宜高血脂的人饮用。酸奶除了营养丰富外，还含有乳酸菌，所以具有保健作用。这些作用是：维护肠道菌群生态平衡，形成生物屏障，抑制有害菌对肠道的入侵。通过产生大量的短链脂肪酸促进肠道蠕动及菌体大量生长改变

4、渗透压而防止便秘。酸奶含有多种酶，促进消化吸收。通过抑制腐生菌在肠道的生长，抑制了腐败所产生的毒素，使肝脏和大脑免受这些毒素的危害,防止衰老。通过抑制腐生菌和某些菌在肠道的生长。从而也抑制了这些菌所产生的致癌因子，达到防癌的目的。提高人体免疫功能，乳酸菌可以产生一些增强免疫功能的物质，可以提高人体免疫，防止疾病。三、制备目的和意义1）学会乳酸发酵测定和制作乳酸菌饮料的方法，了解乳酸菌的生长特性。2）掌握培养基的配制方法和原理以及一些实验仪器的使用。3）巩固所学的专业知识，提高专业技能。4）将理论知识与实践结合起来，培养实践能力，为以后工作岗位打基础。四主要实验内容41实验材料和用具样品：含乳酸

5、菌的酸奶；培养基：BCG牛乳培养基、脱脂乳试管；设备：高压蒸汽灭菌锅，恒温培养箱，冰箱；仪器用品：100ml烧杯一个，100ml量筒一个，每人2个平板,2个试管，250ml容量三角瓶2个，1ml无菌移液管1只，培养基分装器一个，玻棒2根,酒精灯一盏，石棉网，接种环一个，天平，pH试纸若干，棉塞，吸管，报纸，线绳、标签等。药品：酵母膏，脱脂奶粉，蔗糖，1.6%溴甲酚绿乙醇溶液，琼脂，结晶紫染液，碘液，95%乙醇，复红染液。42实验步骤1、培养基的制备：（A）液：称脱脂奶粉20克，水100ml，放入锥形瓶中，加入1.6%溴甲酚绿乙醇溶液后溶液变蓝色，搅拌，用纱布包扎好再用牛皮纸包扎，贴上标签（必须

6、用铅笔写），注明何种培养基，放进高压灭菌锅中80C灭菌20min。（B）液：称酵母膏2克，水100克，琼脂4克混合放入锥形瓶中玻棒搅匀，加热溶解，加热过程要不断搅拌，可适当补水。琼脂完全溶解用PH试纸调pH=6.8,用纱布包扎好再用牛皮纸包扎，贴上标签（必须用铅笔写），注明何种培养基，放进高压灭菌锅中121C灭菌2.min。将灭好菌的A液和B液趁热充分混合，点燃酒精灯对周围的空气进行灭菌，并在酒精灯的附近用左手握着平板用拇指和小拇指打开一个小缝，趁热将培养液倒如平板内，倒入的量能使培养基刚要覆盖平板底部，倒好后把平板平放到实验台，轻轻晃动是培养基形成一个平面，等培养基冷却凝固后倒放并贴上标签。

7、（注意：整个实验要在酒精灯附近做，以保证培养基不染菌）。2、样品的处理按照无菌操作要求，从市售新鲜酸乳中吸取1ml检样，放入装有试管中，振摇混匀。3、分离方法倒培养基在无菌室，先用紫外线照射半小时把表面菌灭了，在通风10min后，每培养皿倾注约15ml左右已溶化的BCG牛乳培养基，立即放在桌上摇匀，冷却凝固后即成平板。十倍稀释法将检样充分摇匀后，用十倍稀释法稀释成10-1、10-2、10-3各种稀释度的样品液。分离直接用接种环蘸取原液、10-2、10-3稀释度的试管中原液，在3个BCG牛乳培养基琼脂平板上划线分离，置40C培养箱中倒平板培养48h。平板出现有毛绒圆形稍扁平的黄色菌落。然后用接种

8、环蘸取有黄色的菌落，在未用的3个BCG牛乳培养基琼脂平板上划线分离，置40C培养箱中倒平板培养48h。平板出现有毛绒圆形稍扁平的黄色菌落。结果与分析：我们蘸取原液、10-2、10-3稀释度同时接种到培养基时，发现传代后，只有一个培养基上长出少量黄色菌落；说明我们的检样浓度太低造成最后菌落太少。4、鉴别配制脱脂乳试管培养基，分装试管，包扎，灭菌备用。称5g脱脂奶粉，2.5g蔗糖，50ml灭菌水，搅拌分别倒进3个试管三分之一，分装试管，包扎，灭菌备用。选取经初步鉴定的乳酸菌典型菌落，用接种环挑取转至脱脂乳试管中，40C培养箱中培养824h。若牛乳出现凝固，无汽泡，呈酸性，涂片镜检细胞为杆状或链球状

9、(两种形状的菌种分别选入)，革兰氏染色显阳性，最终选择出在36h能凝固的牛乳管，作菌种待用。结果与分析：我们挑取的乳酸菌微传代的菌落，用了四小时就能凝乳，而且是黄色的菌落。可能是奶粉中球菌的含量比较少，所以只分离出来杆菌，最后我们只好从其他组那接种到了乳酸球菌进行传代。5、乳酸菌饮料的制作乳酸菌培养基的制作将脱脂乳和水以1:7(W/V)的比例，同时加入6%的蔗糖，充分混合，于8085C灭菌1015min,冷却至3540C，作为制作饮料的培养基质。每人称脱脂乳粉25g,蔗糖11g，无菌水200ml,放进锥形瓶搅拌做为发酵液。接种将凝固的牛乳管发酵菌，均以接入培养基质中即为饮料发酵液。接种后摇匀，

10、用纱布包扎好再用牛皮纸包扎，贴上标签(必须用铅笔写)，注明何种培养基。发酵将接种后的酸乳瓶置4042C培养箱中培养34h时。观察，出现凝乳后停止培养。然后转入45C冰箱中冷藏24h以上。经此后熟阶段,达到酸度适中（pH44.5）,凝块均匀致密,无乳清晰出,无汽泡,获得较好口感和特有风味。结果与分析：我们凝乳的都跟豆腐脑差不多，做出来的有异味，且酸味不够，还有少量乳清晰出，实验不太成功。而直接用新鲜酸奶的乳酸菌做接种的非常成功。实验结果不好在于菌种培养不够好，而且菌种含量非常少。五、实习收获和重要心体会复习了培养基的制作，接种，以及超净工作台的使用和维护，复习了高压蒸汽灭菌锅的使用方法。还有实验

11、时与各位同学的合作，实验时间的具体安排，以及流程的时间掌握，这些都是需要一点一点的计划和变化的。在整个实验过程中，需要一个主要的掌握者，合理安排工作，让每个人都有机会对实验本质内容加深理解。六、注意事项牛奶加热的温度如过高，会杀死酸奶中的乳酸菌造成发酵失败，如温度过低又会造成发酵缓慢，以摸着不烫手为度。容器消毒最好不用消毒液，因为如果冲洗不干净，会杀死乳酸菌，使发酵失败。加热消毒是最安全的方法。3制备过程中发酵时候要严格控制温度，因为温度决定乳酸菌的生长环境。七、实验总结经过这两周制备乳酸奶的综合实验真是让我受益匪浅！在此，我对这次制备实验进行总结，总结在这个实验过程中的收获和不足，取之长，补

12、之短，在今后学习和工作中有所受用。实验的第一天，指导老师并没有让我们直接去做实验，而是给我们实验制备任务，让我们自己先动手查找资料，然后选出一条合理的路线。于是我们第六组3个人先分别去查找资料，然后我们再把资料综合在一起并进行讨论，最终确立了方案。然后，我们三个人就分开去领取仪器和试品，就开始做制备实验了。以前我们做过的实验比较多，但在这次制备酸奶的综合实验学习中，让我受益颇多，这次实验让我养成了初步查找、整理资料，分析问题的能力。以前做过的实验，我们都是按照实验书所提供的步骤进行实验，但经过这一次，让我深深的懂得查找资料再去完成实验的重要性，查找到的资料是否合理将会直接影响实验的成功与否。同

13、时也加深了发酵技术的理解，并且进一步熟练发酵实验的基本操作，掌握了更多的知识。但是给我受益最深的还是做实验时认真对待的态度，因为对于操作程序中某些关键步骤而言，哪怕是作微小改变，都可能使实验前功尽弃，因为只有这样，才能做好每一个实验。在这次的制备实验中，自己的实验能力也不断提高，还有最重要的一点就是进一步学会与同学合作的精神。虽说制备酸奶实验是对前人实验的重复，但对我们来说也并非是一条容易的事，但它让我们在学习实验中获得相关的知识。当然，知识是无止境的，但在制备实验过程中给我带来的不仅是纯粹的知识，更多的是自己和同学一起在制备实验过程中的合作精神。实验这过程中，我也发现存在的很多不足：我的动手能力不够强；操作时没有注意一些细节我们制备出来的酸奶，结果不是很令人满意，但我还是很喜欢，毕竟是我们亲手制取出来的物品。总之，制备酸奶让我收获颇多，同时我也发现了自身的不足，在这次实验中学得的，我将发挥到其它中去，也将在今后的学习和工作中不断提高、完善。在此间发现的不足，我也将努力改善，通过学习、实践等方式不断提高。同时，我也希望学校让我们接触到可能多的实验，获得较多的实验知