湖北实验动物专业技术考试复习用PPT安学芳大小鼠

1、大小鼠动物生物学 特性及管理技术(jsh)要点安学芳2013年9月29日共一百二十二页主 要 内 容第一章 小鼠第一节 生物学特性第二节 常用(chn yn)品种介绍第三节 在生物医学研究中的应用第四节 饲养管理技术要点第二章 大鼠第一节 生物学特性第二节 常用品种介绍第三节 在生物医学研究中的应用第四节 饲养管理技术共一百二十二页第一章小鼠共一百二十二页小鼠（Mus musulus , mouse）属哺乳纲，啮齿目(Rodentia)，鼠科(Muridae)，小鼠属(Mus)。实验小鼠来源于野生小鼠，从17世纪开始用于比较解剖学研究及动物实验后，经长期人工饲养、选择、培育，目前已培养成500

2、多个独立的近交系、200多个远交系和400多个突变品系。 目前，用转基因技术生产的基因工程小鼠已在生物医学研究中占有(zhnyu)非常重要的地位，如转基因小鼠、基因剔除小鼠和基因替换小鼠等。目前，科学家研究建立各种基因工程小鼠模型超过1万种，是当今生命科学领域中非常重要的模式动物。小鼠是当今世界上研究最详尽、用量最大、应用最广泛、品种最多的哺乳类实验动物。第一章 小鼠共一百二十二页第一节 生物学特性(txng)一、生活习性和生理特点1.外观小鼠全身被毛（裸鼠除外），面部尖突，头呈锥体形， 嘴脸前部两侧有触须，耳耸立呈半圆形，白色小鼠眼 睛大而鲜红。成年小鼠体长1015cm，尾长约与身长相等，尾

3、部覆有短毛和环状角质鳞片，有四条明显的血管。健康小鼠皮毛光滑紧贴皮肤，四肢匀称(yn chn)，眼睛亮而有神。 小鼠有多种毛色，如白、黑、棕、灰色等。共一百二十二页NIHICRKM615共一百二十二页2.性情温顺，胆小怕惊，适应性差，反应敏感小鼠性情温顺,容易捕捉,一般不会主动伤人。 不过,一旦逃出笼外过夜则野性恢复,行动敏捷难以捕捉。当饲养室内有人时,小鼠活动受到限制,甚至停止活动;受到惊吓时,小鼠尾巴会挺直并猛力甩动。小鼠体小娇嫩,外界环境(hunjng)光照、噪音、营养、温度、空气质量等多种因素均可对小鼠造成影响。如强光、噪音、不同气味等刺激均可导致神经紊乱，哺乳母鼠发生食仔现象。由于外

4、界环境变化，如运输、环境改变等因素都会造成小鼠死亡。小鼠对多种病原体、毒素及致癌物都很敏感。百万分之一的破伤风毒素能使小鼠死亡。共一百二十二页3.喜群居，昼伏夜动，喜啃咬与单笼饲养的小鼠相比,群居的小鼠对饲料(slio)消耗快,生长发育也快。但雄性小鼠群居时易发生斗殴,而且群体中处于优势的雄性小鼠常常将处于劣势者的胡须拔光,自己保留胡须,被称为“理发师”。喜光线较暗的安静环境，固定一处营巢睡眠。进食、分娩都常发生在夜间，傍晚和黎明前是小鼠活动的两个高峰。因门齿生长较快，需经常啃咬坚硬物品。共一百二十二页4.体型小，生长快出生体重仅1.5克左右，一月龄体重达18- 22克，可供实验使用。成年小鼠

5、每日食量5-8克，饮水4-7毫升，排粪1.4-2.8克/天，排尿1-3毫升/天。由于体型小，适于操作和饲养；且占据空间小，适于大量生产。小鼠生长速度快：其体重增长的快慢,因品种品系、母鼠健康状况、哺乳(b r)鼠多少、生产胎次、饲料营养和环境条件的不同而有所差异(表6-1)。共一百二十二页 生长(shngzhng)年龄判断第1天：皮肤肉红，全身无毛，不开眼，双耳与皮肤粘连第2天：皮肤红色(hngs)（比第一天淡一些），腹部左侧可见白色奶块第3天：两只耳朵仍与皮肤粘连 第4天：一只耳朵张开，竖立；脐带瘢痕脱落第5天：两只耳朵张开，竖立；能翻身第6天：皮肤变厚（可见皱纹），腹部左侧奶块消失共一百二

6、十二页第7天：皮肤开始长绒毛第8天：绒毛长全，下门齿长出；能爬行第10天：有听觉，被毛长齐第12天：开眼，门齿长出第13-15天：眼皮张开，能跳跃，能抓取东西第18天以后：能自行采食，独立生活三周龄：离乳周龄性成熟，适宜(shy)于实验共一百二十二页共一百二十二页5.成熟早，繁殖力强，生命周期短雌性35-50日龄，雄性45-60日龄即可性成熟。雌性65-75日龄，雄性70-80日龄可达体成熟，此时即可交配。雌鼠属全年多发情动物，性周期4-5天，一般发情后23小时即可排卵，卵巢(luncho)一次可排出1023个成熟卵子。共一百二十二页性周期：雌鼠性成熟后，卵巢产生卵细胞并分泌雌性激素，出现明显

7、的动情周期。根据阴道涂片所观察到的阴道上皮细胞变化，可进一步推测卵巢、子宫、激素变化和所处的发情阶段。动情前期：核上皮细胞； 动情期:角质化细胞； 动情间期:大量白细胞粘液；动情后期(huq):角化细胞和少量白细胞 共一百二十二页 小鼠阴道(yndo)涂片显微镜观察成团（片）角质化细胞(xbo)共一百二十二页配种最好在6590日龄，交配后10-12小时，雌鼠在阴道口形成一个白色的阴道栓。有防止精液倒流、提高受孕率的作用。被视为交配成功(chnggng)的标志。阴道栓是雄性小鼠的腺体（精囊腺和凝固腺）分泌物在阴道内凝固而形成的产物。 共一百二十二页 产后发情：雌鼠产后1224小时，甚至在产后61

8、2小时，可出现(chxin)动情期血配：产后发情雌鼠，排卵可以接受雄鼠交配并受孕，称为“血配/热配”，即分娩24小时内又可受孕，形成产后妊娠，出现边哺乳边妊娠的情况。小鼠交配后正处于哺乳期，影响受精卵的正常植入，因而出现受精卵滞育期。受精卵着床会延迟约4-10天，怀孕期亦会顺延。 假妊娠：雌鼠与去势雄鼠（不育雄鼠）交配，转基因技术中作代孕鼠。共一百二十二页分娩：夜间或黎明，产前雌鼠不安，不停地整理产窝，约4min产仔1只，产仔结束1min后胎盘产出，母鼠将胎盘嚼食，整个产程约经1h。雌鼠妊娠期19-21天，哺乳期20-21天，年产6-9胎,每胎6-15只。母鼠带仔数一般为8-10 只，因母鼠营

9、养状况、体质状况、生产能力等因素(yn s)不同而变化。母鼠哺乳仔数太多可导致仔鼠发育不均，如带仔数不足时可将其他多余的同龄仔鼠放入让其代乳，但注意在放入前应使其感染新窝的气味，以免被代乳母鼠咬死。共一百二十二页雄性小鼠具有分泌醋酸胺臭气(chu q)的特性小鼠性活动保持1年,繁殖力强。作为种鼠使用时间一般为6-8个月。 寿命2年左右。共一百二十二页6.遗传(ychun)特点小鼠有20对染色体(2n=40) ，推测有3万多个结构基因，已查明的有648个。是目前被研究得最清楚的实验动物。共一百二十二页1、骨骼：全身骨骼包括头骨、椎骨、胸骨、肋骨和四肢骨上、下颌骨各有2个门齿，6个臼齿，门齿终生不

10、断生长，需经常磨损来维持齿端的长短，保持恒定。小鼠下颌骨的喙状突较小，髁状突发达。下颌骨形态分析技术(jsh) 进行近交系小鼠 遗传质量监测。骨髓为红骨髓，终身造血。二、解剖(jipu)生理特点共一百二十二页头盖骨共一百二十二页2、消化系统： 唾液腺分为耳下腺、颌下腺和舌下腺。食道细长约2cm，位于气管背面，其内壁有一层厚的角质化鳞状上皮，利于灌胃操作(cozu)。胃分前胃和腺胃，胃容量小（1-1.5ml，小鼠灌胃给药剂量的体积不能超过1ml）。功能较差，不耐饥饿。盲肠不发达，能合成Vc。肝分4叶；有胆囊。胰腺分散在12指肠、胃底及脾门处，色淡红，似脂肪组织。共一百二十二页共一百二十二页3.

11、呼吸和循环系统肺分五叶，左肺单叶，右肺四叶，气管及支气管腺不发达，不适于做慢性支气管炎模型及祛痰平喘药的疗效实验。心脏由四腔组成，同其他哺乳动物。心尖位于近胸骨端第四肋间，此处为心脏采血进针部位。血液循环(xu y xn hun)由大循环和小循环组成。小鼠尾部有4条明显的血管，背腹侧各有一条动脉，两侧各有一条静脉，可实施静脉注射给样。共一百二十二页4. 淋巴系统：小鼠淋巴系统特别发达，但腭或咽部无扁桃体，外来刺激可使淋巴系统增生，进而导致淋巴系统疾病。小鼠脾脏含有造血细胞，包括巨核细胞，原始造血细胞等组成造血灶。因此，小鼠脾脏不但有贮血功能，而且还有明显的造血功能，这是和大动物（猴、狗）及人不

12、同的地方。小鼠骨髓( su)为红骨髓，而无黄骨髓，终生造血。中枢淋巴器官-胸腺呈乳白色，呈左右2叶 共一百二十二页5.泌尿生殖系统：小鼠尿量少，每次排尿1-2滴，高度浓缩。尿蛋白含量高。雌鼠乳腺极为发达。乳头共5对，胸部3对，乳腺可延续到背、颈部；腹部2对，乳腺延续到鼠鼷部、会阴和腹部两侧，并与胸部乳腺相连。雌鼠为双子宫型，呈Y字形，左右子宫角在膀胱背部汇合成子宫体，前部以中隔分成两部，后部中隔消失，逐渐(zhjin)形成子宫颈。 卵巢有系膜包绕，不与腹腔相通，故无宫外孕雄鼠为双睾丸，幼年时藏于腹腔内，性成熟后下降到阴囊；前列腺分背、腹两叶。共一百二十二页雄性小鼠内生殖器雌性(c xn)小鼠内

13、生殖器共一百二十二页6.皮肤与体温调节和水分代谢：小鼠无汗腺，唾液分泌能力很有限，体表面积相对较大等特点，导致小鼠体温调节能力较差，环境温度的变化可引起小鼠发生明显的生理学反应。新生乳鼠，在被毛长齐以前，主要依靠(yko)母鼠维持体温。40日龄前其体温是被动调节，40日龄后,体温自动调节,正常情况下保持恒定。外界温度变化太大,可很快使小鼠丧失体温的恒定性。低温能造成小鼠繁殖力下降,抗病力下降，短时间内可导致小鼠死亡。持续高温（32以上）也常常引起小鼠死亡。研究发现小鼠在2125环境温度区内生长较快，产仔多，活力强。在运输途中或实验室内如环境温度升高则以体温升高，代谢率下降以及耳血管扩张来加快散

14、热。共一百二十二页与大多数哺乳动物相比小鼠对饮水量不足更为敏感，因为小鼠水分代谢的半衰期仅为1.1天,比大的哺乳动物要快得多，因此，对小鼠需要供给充足的饮水。成年小鼠饮水量为47ml天。环境温度、湿度变化太大时，都会影响(yngxing)小鼠健康，而发生疾病。小鼠可通过呼出的气体在鼻腔内冷却以及尿液的高度浓缩来保持水分。共一百二十二页第二节、常用品种(pnzhng)品系一、近交系 1.BALB/c：白色，1923年培育近交系，1979年从美国引入中国。特性:乳腺癌发病率低，但当用乳腺肿瘤病毒诱发时发病率增高；肺癌(fi i)发病率雌性26%，雄性29%；相对血压较高，多有心脏损害，常发动脉硬化

15、；对放射线照射极为敏感；生产性能良好，所需饲料中蛋白质含量要求高。常用于单克隆抗体与免疫学研究。共一百二十二页 2.C57BL黑色，1921年培育，1937年从此系中分离出C57BL/6和C57BL/10两个亚系。1975年从日本(r bn)引入中国。特性：乳腺肿瘤自然发生率低，化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤；对放射物质耐受性强；补体活性高；对结核杆菌敏感；对鼠痘病毒有一定抵抗力，嗜酒精性高。常用于肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究。继人类之后第二个完成基因组测序工程的小鼠品系在近交系小鼠中使用量最大，并常作为遗传工程小鼠背景品系的小鼠共一百二十二页 3.C3H野生色，1920年白化雌鼠与乳腺

16、肿瘤高发(o f)DBA系雄鼠杂交，再经20代以上近交培育而获得。1985年从美国引入中国。主要特性：乳腺癌发病率高，6-10月龄雌鼠乳腺癌自然发生率达85-100%，14月龄肝癌发生率为85%。补体活性高，干扰素产量低。血液中过氧化氢酶活性高，雄鼠对氨气、氯仿、松节油等甚为敏感，死亡率高。对狂犬病毒敏感，对炭疽杆菌有抵抗力。主要用于肿瘤学、生理学、核医学的研究。共一百二十二页共一百二十二页 4.DBA 淡灰色，1909年在毛色分离(fnl)实验中建立，为最古老的近交系小鼠。1929年在亚系间进行杂交，建立了两个亚系：DBA/1、DBA/2DBA/1系：抗DBA/2系所生长的瘤株；P1534瘤

17、株的生长率为50%；一年以上雌鼠乳腺癌发生率为75%；对结核菌敏感。对疟原虫感染有抵抗力；对鼠伤寒C5敏感；老龄雌鼠心脏都有钙质沉着。共一百二十二页 DBA/2系：对大部分DBA/1系的瘤株有抗性，但黑色素瘤S-91在两亚系小鼠中均能生长；自发淋巴瘤；雌鼠乳腺肿瘤发生率为：繁殖(fnzh)鼠66%，处女鼠3%；36日龄小鼠听源性癫痫发作为100%，55日龄后为5%；血压较低，心脏有钙质沉着；对疟原虫感染和鼠伤寒C5有抵抗力；嗜酒精性低；红细胞计数高。雄鼠接触氯仿和乙二醇的氧化物，以及维生素K缺乏时，死亡率高。 主要用于肿瘤学、遗传学 和免疫学研究。共一百二十二页白色，系我国培育的近交系。195

18、5年天津医学院育成TA1，1963年育成TA2。1985年被国际小鼠遗传命名委员会承认。 主要特性：TA1为自发低乳腺癌系，TA2为自发高乳腺癌系。主要用于乳腺(rxin)肿瘤的研究。5.TA1(津白1号) 、TA2(津白2号)共一百二十二页 6.615小鼠深褐色，国内育成。1961年中国医学科学院血液病研究所用KM种小鼠雌鼠与苏联引进的C57BL雄鼠杂交，尔后又作近交培育而成。1985年被国际(guj)小鼠遗传命名委员会承认。主要特性：8月龄后出现衰老现象，自发肿瘤发生率为10-20%，雌性为乳腺癌，雄性为肺癌；对津638白血病病毒敏感。主要用于白血病等的研究。共一百二十二页615 ： 深褐

19、色，近交系小鼠共一百二十二页 7、CBA/J/Ola淡灰色，1920年Strong用Bagg白化雌鼠与DBA雄鼠交配后，选择(xunz)低乳腺肿瘤发病率动物培育，1947年引到Andervont近交35代后，于1948年引到JAX，1983年引到OLAC。野鼠色。单倍型为H-2k共一百二十二页共一百二十二页 二、封闭群 1.昆明小鼠（KM）白色，1926年美国从瑞士引入白化小鼠先培育(piy)成瑞士小鼠，1946年我国从印度将瑞士小鼠引入昆明，1952年从昆明引入北京生物制品研究所，1954年推广到全国。是我国特有的封闭群小鼠。主要特性：繁殖率和成活率高，抗病力和适应性很强，雌鼠乳瘤发生率为2

20、5%。广泛用于药理、毒理、病毒和细菌 学的研究，生物制品和药品的检定。共一百二十二页 2.NIH 白色，由美国国立卫生研究院（NIH）培育。 主要特性：繁殖力强，产仔成活率高，雄性好 斗，易打伤致残(zh cn)。免疫反应敏感性比昆明鼠强，是国际通用的封 闭群实验动物。主要用于药物毒理研究和生物制品检定。NIH共一百二十二页3、ICR 美国培育的Swiss种小鼠，因美国癌症研究所（Institute of Cancer Research）分送(fn sn)各国饲养 实验，各国称为ICR品种。 主要特性：白色，繁殖力强，适应性强，生长快 速，实验重复性好。 国际通用的封闭群小鼠。 广泛用于药理、

21、毒理、肿瘤、食品、生物制品的 研究生产。 ICR共一百二十二页三、突变系小鼠1.裸小鼠（Nude mice） 即先天性无胸腺、无毛的裸体小鼠，导致这种异常状态的 裸基因(nu)是位于(wiy)11号染色体上隐性基因突变导致。 主要特征毛发生长发育异常；表现为全身形似无毛。呈裸体外表。无胸腺，仅有胸腺残迹或仅有异常的胸腺上皮，缺乏成熟T细胞的辅助、抑制及杀伤功能，因而细胞免疫力低下，不能执行正常T细胞功能。B细胞功能基本正常。繁育能力差，乳腺发育缺损，以雄性纯合子与雌性杂合子繁育。对多种病原体易感。是微生物感染机制研究的良好模型， 人类肿瘤的移植研究共一百二十二页2. SCID小鼠严重联合免疫缺

22、陷小鼠，是位于第16号染色体的称之为scid的单个隐性突变基因所导致。主要特征： 外观与正常小鼠无异，生长发育正常。胸腺、脾、淋巴结的重量一般为正常小鼠的30%，组织学上表现为淋巴细胞缺失，对外源性抗原无细胞免疫及抗体反应(fnyng)。在SPF条件下可存活1年以上，采用scid基因纯合子兄妹交配进行繁殖，平均窝产仔数约5.51.7只，略低于BALB/c小鼠，离乳率约87.4。应用于病毒学研究及肿瘤移植共一百二十二页3.肌萎缩症(Dytrophia Muscularis, 简称(jinchng)dy) 称肌失营养症即后肢瘫痪小鼠：该鼠与人类有相似的肌萎缩症状，大约出生两周可见后肢拖地， 表现有

23、进行性肌衰弱和广泛性肌萎缩。病鼠出生时是活的，但只有少数病鼠能存活(cn hu)10周以上，无繁殖力。已证明将雌鼠的卵巢移植到正常雌鼠体内具有生殖能力。共一百二十二页4.肥胖症(Obese, 简称(jinchng)ob)小鼠肥胖症鼠：肥胖小鼠(Obese Mice) 体重可达60g，表现为单纯肥胖而不伴有糖尿病。所有的雌鼠均无生殖力，卵巢和子宫萎缩。 小鼠的肥胖症与人类的肥胖症很相似(xin s)。利用这种小鼠曾进行了许多关于肥胖症的生化、症理、激素及药物治疗等的研究。 共一百二十二页第三节 小鼠在生物医学研究(ynji)中的应用共一百二十二页（一）药物评价和毒性(d xn)试验. 药物筛选试

24、验：实验动物用量较大，先从小鼠作起，杂种健康成年小鼠，对药物反应具有综合效果后，纯系小鼠或大动物作进一步的肯定 . 毒性试验：如急性毒性试验、亚急性和慢性试验。测定药物（或化学制）的LD50或药物致癌性试验等常选用小鼠。. 生物制品的安全性、有效性评价：药物的效价比较实验：如广泛用于血清(xuqng)、疫苗等生物制品的鉴定，照射剂量与生物效应实验，各种药物效价测定等实验。. 药品研究方面：药效、药代以及安全性评价等共一百二十二页（二）肿瘤学、白血病研究(ynji) 小鼠广泛应用于癌、肉瘤、白血病以及其他恶性肿瘤的研究。为研究各种类型肿瘤的发生和生物学特性及其防治(fngzh)，提供了很好的动物

25、模型。1. 自发性肿瘤：AKR小鼠白血病发生率可达90%，C3H小鼠自发乳腺癌发病率高达85-100%。（这些小鼠自发肿瘤从肿瘤发生学上来看，与人体肿瘤接近，进行药物筛选比移植性肿瘤可能更为理想） 共一百二十二页2. 诱发性肿瘤：对各种致癌物敏感可诱发各种供研究用的肿瘤模型。如用二乙基亚硝胺诱发小鼠肺癌，甲基胆蒽诱发小鼠胃癌(wi i)和宫颈癌等。3. 移植性肿瘤：裸小鼠、SCID小鼠可接受人类各种肿瘤细胞的移植，成为活的癌细胞“试管”。共一百二十二页图4 早期荷瘤昆明种小鼠 图5 中期荷瘤气虚小鼠图6 中晚期荷瘤气虚小鼠 图7 中晚期荷瘤阴虚小鼠 图8 晚期荷瘤阴阳两虚小鼠 共一百二十二页（

26、三）病毒(bngd)、细菌和寄生虫病研究1. 小鼠对多种病原体具有易感性，适合于研究吸血虫感染、流行性感冒、脑炎、狂犬病等细菌性、病毒性以及寄生虫疾病(jbng)。对钩端螺旋体不敏感。2. 动物模型：小鼠基因组与人类基因组高度同源得已证实，而且其发病表型及机制都与人的发病过程有很高的一致性，小鼠已经成为建造人类疾病动物模型及研究发病机制的最重要实验动物（麻风杆菌）；同时，利用转基因技术，建立人类传染性疾病动物模型。共一百二十二页（四）遗传病和遗传学研究(ynji)1. 小鼠的毛色变化多样，常作为小鼠遗传学分析中遗传标记和品系鉴定的依据之一。2. 重组近交系小鼠将双亲品系的基因自由组合和重组产生

27、一系列的子系，是遗传分析的重要依据，用作基因定位及其连锁(lin su)关系的研究。3. 同源近交系小鼠常用来研究多态性基因位点的多效性，基因的效应和功能。共一百二十二页4. 具有遗传性疾病的突变系小鼠为研究人类遗传性疾病的病因、发病机制和治疗措施，提供了自然的动物模型。如家族性肥胖、遗传性贫血、全身性红斑狼疮、侏儒症、尿崩症等都有相应的突变系小鼠供使用。5. 转基因小鼠：将人类基因导入小鼠基因组中，研究导入基因的作用，寻求(xnqi)目前还无法了解的遗传性疾病的遗传因子。 共一百二十二页（五）免疫学研究(ynji)免疫缺陷小鼠： BALB/c-nu， SCID小鼠1. 制备单克隆抗体：BAL

28、B/c小鼠2. 动物模型使SCID小鼠受到HIV病毒(bngd)的感染，进行爱滋病相关研究。纯系新西兰黑色小鼠（NZB）其自身免疫缺陷的病因是由于感染C型致瘤RNA病毒与引起人的红斑狼疮的病因一样，病症特征与人类很相似，所以是研究红斑狼疮的极好的动物模型。 3. 免疫功能研究：SCID小鼠可将人的免疫组织或免疫细胞移植到小鼠身上（SCID-hu小鼠），人鼠嵌合模型。使其具有人的部分免疫系统用于研究人类免疫系统的发育过程，以及免疫细胞的分化和功能研究。 共一百二十二页（六）计划生育(j hu shn y)研究（避孕药试验） 小鼠繁殖能力强、妊娠期短、生长速度快，且全年多发情、发情周期短，适合作避

29、孕药研究(ynji)。如选用小鼠作抗生育、抗着床、抗早孕和抗排卵实验。共一百二十二页（七）老年病学研究(ynji) 小鼠寿命短，个体差异小和花费低廉，常用于老年学研究。用于老年病研究1.5年以上，大鼠1.7年以上。 胶原蛋白老化常作为老化的指标(zhbio)，是研究胶原老化的动物模型。 侏儒症小鼠垂体功能低下，生长激素缺乏，其寿命只有45个月，且表现为灰发，皮肤萎缩，双眼白内障，常用于研究生长激素与老化的关系。共一百二十二页不宜采用小鼠制作动物模型的实验(shyn)研究体温变化的试验,因为小鼠体温变化不稳定；慢性支气管炎的试验,因为小鼠气管及支气管腺不发达；催吐试验,因为小鼠无呕吐反应(fny

30、ng)；动脉粥样硬化试验,因为小鼠不形成动脉粥样硬化。共一百二十二页第四节、饲养管理技术(jsh)要点一、小鼠的微生物学等级及饲养环境(hunjng)分类清洁级小鼠SPF级小鼠无菌级小鼠屏障环境: 正压、负压（屏障环境系统；屏障环境+IVC系统）隔离环境：正压、负压共一百二十二页屏障(pngzhng)环境系统屏障(pngzhng)环境+IVC隔离环境共一百二十二页二、小鼠的常规饲养管理技术方法、饲喂： 喂全价颗粒状饲料，保证小鼠营养需要，饲料中蛋白质的 含量应在20%25%，不同品系小鼠对饲料组成要求有一定 差别。要注意有些小鼠的品系对营养的特殊要求。 小鼠对过量维生素敏感(mngn)，尤其是

31、妊娠小鼠会出现繁殖紊 乱和胚胎畸形。 小鼠属于杂食性动物，胃容量小，有随时采食的习性，夜 间更为活跃。采取“少量勤添”的原则，保证随时有料。共一百二十二页 小鼠的饲料消耗量，随着生长发育和生产繁殖的阶段 不同而有所不同，所以必须注意不同阶段添加的饲料 量。加料的量依据小鼠的大小和数量，以到下次加料 时上次的料略有剩余为宜。每周喂料3-4次。掉在地上 的饲料废弃。 种鼠、妊娠鼠、哺乳鼠应该使用繁殖用高营养饲料， 并适当添加葵花籽、麦芽、鸡蛋等。 采用高压灭菌或Co60辐照饲料， Co60辐照饲料贮存期 不超过90d。打开包装的饲料要放在有盖的专用(zhunyng)容器中 保存，一周内应用完。共一

32、百二十二页小鼠采食(ci sh)量：成年68g/d。怀孕后期：810g/d。哺乳第一阶段（112d）约13g/d；哺乳第二阶段(1321d)约19g/d。仔鼠在21d离乳前约4g/d。2223d为5.66g/d。共一百二十二页、给水 小鼠饮水必须饮用无菌水（高压灭菌或纯净水），每天观 察饮水瓶内的水量,无水或少水及时更换，应保证连续不断。 一般情况下每周换水23次（最好是每天更换新鲜水）， 并特别注意饮水瓶嘴是否有气泡、不出水或漏水的现象。 漏水的饮水瓶及时淘汰。 换水要更换水瓶，不采用向瓶中加水的方式，要连同水瓶 和瓶嘴一起(yq)换下；并认真清洗水瓶和瓶嘴，然后高压灭 菌，严禁未经灭菌的水

33、瓶和瓶嘴继续使用。共一百二十二页3、笼具和垫料笼具应选用符合国家标准笼具，一般用塑料饲养笼，清洁级以上小鼠的笼具需消毒，饲养盒能够耐121高温的要求。垫料是直接接触动物的铺垫物，有吸湿、保暖、作窝的作用，故应有强吸湿性、无毒、无刺激性、无粉尘、不可食并舒适等特点。一般选用以阔叶林木的刨花或锯末为宜，切忌用针叶林木（松、杉）刨花做垫料。垫料常采用高压(goy)消毒。玉米芯垫料比较好，要高压灭菌，也有Co60辐照的，贵共一百二十二页 刨花选用粗细均匀、柔软、无刺激性气味的，使用前最好 暴晒、挑选（筛选）。 高压灭菌时包装数量适中，不宜过多，以免影响(yngxing)灭菌效果。 一般装袋1/2-2/

34、3的量。灭菌时垫料包中间放入高压灭菌 测试试纸条检验灭菌效果。 每周更换垫料12次，2周更换鼠盒1次，及时更换潮湿、 垫料结块的鼠盒。 及时清洗鼠盒，晾干备用。共一百二十二页4、日常管理与卫生消毒动物进入检查：外来动物必须具有“实验动物质量合格证”，包装运输盒完整无破损(p sn)，方可允许进入屏障环境。传递：采购来的动物应经过传递窗传入屏障设施内。传递消毒时，既要保证运输容器表面消毒的彻底性，又要保证动物的健康和安全。接收：接收动物时,屏障区工作人员应先打开运输容器仔细检查动物的健康状况。未见异常时，方可将动物转入检疫间（运输容器不得进入屏障设施内，以有效避免其对屏障设施的污染）。共一百二十

35、二页- 检疫：进行3-7天的隔离观察，检疫期结束而未见异常情况者，方可将动物转入饲养间进行饲养和实验 。观察动物 每天对小鼠进行观察，检查鼠盒内小鼠是否出现异常， 小鼠数量是否正确，是否有实验或其他原因引起的死亡，小鼠健康状况如何？小鼠健康状况判断：体毛光滑,肌肉丰满(fngmn),活动有力。眼睛有神,精神活跃，反应敏捷。食欲旺盛。身无伤痕,尾不弯曲,体表孔腔无分泌物,无畸形。粪便黑色呈麦粒状。共一百二十二页卫生消毒(xio d)加料、给水作业结束后，将笼架上的垫料、饲料残渣用刷子或抹布清扫、消毒液檫拭消毒。地板上的污物、垫料、饲料残渣及时清扫干净，用消毒液擦拭两侧的门特别是门把，再用消毒液拖

36、地。每次动物实验操作结束后，用75%酒精实验台进行喷雾消毒并擦拭干净。更换笼盒时及时对动物笼架进行擦拭消毒。动物房墙壁、天花板每月用消毒液擦拭1次。配制消毒液时注意消毒液的配置浓度和有效期，最好现配现用。一般不超过1周。2-3种消毒液交替使用共一百二十二页科学记录动物、人员(rnyun)、物品出入记录环境温度湿度压差消毒灭菌记录动物健康状况记录实验处理及观察记录异常情况记录等共一百二十二页5、性别鉴别成年小鼠性别很易区分(qfn):雄性小鼠的阴囊明显;雌性小鼠可见阴道开口和5对乳头。仔鼠或幼鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定,近者为雌性,远者为雄性。共一百二十二页2022/7/2174共一百二

37、十二页另外，雌鼠肛门(gngmn)和生殖器之间有一无毛小沟，而雄鼠则在肛门(gngmn)和生殖器之间长毛。再者，雌鼠有比雄鼠明显的乳头。共一百二十二页小鼠性别(xngbi)鉴定共一百二十二页三、转基因小鼠的饲养管理设施：保种小鼠应饲养在隔离器中，有利于控制微生物质量。种群记录：不同遗传特点的动物群繁殖方法不同。 选种：除了基因检测选育外，选择体形正常、体格健壮、活泼、眼睛明亮、皮毛光亮、尾巴血管明显的动物。最好同胎产仔数多、发育良好、无死亡。参照繁殖小鼠。留种鼠适当延长哺乳期。30日龄以后的雄鼠不宜添加葵花籽等营养物质，防止雄鼠过肥，影响配种。做好配种记录，在母鼠临产前1天或数小时更换垫料(d

38、in lio)，刚产仔尽量减少惊动应激。防止种群动物逃逸、混淆。共一百二十二页第二章大鼠（Rat）脊椎动物门哺乳纲啮齿(ni ch)目鼠科 家鼠属褐家鼠种共一百二十二页大鼠是野生褐家鼠的变种，起源于北美洲，于17世纪初期传到欧洲。18世纪后期开始人工饲养，19世纪，美国费城维斯塔尔（Wistar)研究所开发大鼠作为实验动物，目前世界上使用的许多大鼠品系(pn x)品种均起源于此。大鼠体形较小，对实验条件反应近似。是使用量仅次于小鼠的实验动物共一百二十二页大鼠与小鼠相似，体型(txng)较大共一百二十二页第一节 生物学特性(txng)一、外型特征大鼠与小鼠相似，几乎大十倍，为多种毛色。大鼠在实验

39、动物中也属于较小型动物。出生时体重为5.5-10g,视品种和产仔数而不同，一个半月龄可达180克以上。雄性大鼠身体前部比后部(hu b)大，雌性大鼠身体苗条，头尖小，后部(hu b)比前部大。成年大鼠体长不小于18-20cm，尾上覆有短毛和环状角质鳞片，有200多片。共一百二十二页二、行为习性1.大鼠性情温顺，易于捕捉，行动较迟缓，一般不会主动攻击咬人，但粗暴操作、营养缺乏(quf)、孕鼠和哺乳母鼠也会攻击人。雄性大鼠较少斗殴倾向，可将雄性大鼠关养在一起。大鼠可耐受单个笼养。2.大鼠习于昼伏夜动，白天喜欢挤在一起休息，夜间和清晨比较活跃，采食、交配多在此期间发生。共一百二十二页3.大鼠是杂食动

40、物，食性广泛，有随时采食的习惯，喜食煮熟的动物肉。对蛋白质、维生素、氨基酸等营养缺乏(quf)敏感，VitA缺乏时常咬人。 VitE缺乏可导致雌大鼠生育能力降低，严重缺乏时雄鼠可终生丧失生殖能力。大鼠体内可合成维生素C。胃容量3-7ml。4.大鼠的嗅觉灵敏，对空气中的粉尘、氨气、硫化氢等极为敏感，易引发呼吸道疾病，肺脏易受侵害。当长期慢性刺激时，会引起大鼠肺炎或进行性肺组织坏死。5.视觉灵敏，对光照较敏感，做条件反射等实验反应良好，但对许多药物易产生耐药性。共一百二十二页6.大鼠喜独居，喜安静的环境，对外界刺激反应敏感，适宜作行为学研究。大鼠对外界环境的适应性强，成年大鼠较少患病(hun bn

41、)。但噪声可使其内分泌紊乱、恐慌、互相撕咬以及性功能减退并引起雌鼠的食仔行为。7.大鼠对空气中湿度耐受性差，如空气过于干燥，相对湿度低于40%时，常发生环尾症，近一步发展可致尾巴一段段地脱落或坏死。共一百二十二页三、解剖学特点1.大鼠无乳齿，门齿终生不断生长，故需经常磨损以维持其恒定。磨牙的解剖形态与人类相似(xin s)，给致龋菌丛和致龋食物可产生与人一样的龋损，适用于建立龋齿的动物模型。2.大鼠无胆囊；不会呕吐；肝脏再生能力很强，切除60-70%后可再生。适用于肝外科实验研究。3.大鼠尾部有四条明显的血管，背腹面各有一条动脉，两侧各有一条静脉，可施行静脉注射给药。共一百二十二页4.胸腺似等

42、边三角形，淡红色，表面不光滑，呈不规则的分叶状。大小与结构(jigu)随年龄而变化。40-60日龄大鼠的胸腺最大，以后即停止生长，并逐渐退化。5.雌性子宫为“Y”型双子宫，有6对乳头，胸部和腹部各有3对。6.汗腺不发达，仅爪垫上有汗腺，靠尾和唾液散热和调节体温，不稳定。运输中常出现“发汗”死亡。共一百二十二页四、生理学特性(txng)1.生长发育 新生大鼠体重约5.5-10g，全身无毛，两耳关闭，四肢短小。3-4天两耳张开，8-10天长出门齿，14-17天开眼，16天被毛长齐，20-21天可断奶独立生活,体重50-60g。45天左右可达180g以上，是实验常用(chn yn)的规格。成年雄鼠3

43、00-800g，雌鼠250-500g。生命周期短，寿命约2.5-3年，易于饲养管理。大鼠生长发育的快慢与其品系、营养状况、健康状况、环境条件以及母鼠的哺乳能力、生产胎次均有密切关系。共一百二十二页2022/7/2188赤红色粉红色共一百二十二页2022/7/2189两耳开始(kish)张开开始(kish)张小绒毛共一百二十二页2022/7/2190切齿萌出，开始(kish)爬行共一百二十二页2022/7/2191开始(kish)睁眼共一百二十二页2022/7/2192被毛张齐双眼睁开共一百二十二页2022/7/2193臼齿(jich)萌出离乳共一百二十二页大鼠的体重(tzhng)变化共一百二十

44、二页2.生殖生理 性成熟：6-8周，体成熟：3月龄。体成熟：雄鼠出生后30-35天睾丸下降进入阴囊，45-60天产生精子，60天可自行交配，但90天体成熟后才使最适繁殖期。雌鼠70-75天阴道开口，初次发情排卵也是在阴道开口前后，雌性周期(zhuq)4-5天。阴道栓：大鼠配种后不久，阴道栓会收缩到3mm5mm奶油色圆锥体，太小易于丢失，金属底网、不放垫料的接粪盘可见单个或碎块。 雌性大鼠在发情时接受交配，出现阴道栓说明交配成功。共一百二十二页大鼠阴道(yndo)栓共一百二十二页大鼠性别鉴定(jindng)：同小鼠雄性大鼠成年后生殖器突出，离肛门较远。雌性外生殖器有明显的凹沟。肛门与生殖突的距离

45、近且鼠蹊部至胸部间有34对点状乳头（或可称为乳状突）为雌性; 肛门与生殖突间距离相对较远且鼠蹊部与胸部间无点状乳突者为雄性大鼠妊娠期19-23天，哺乳期20-22天，每胎产仔6-12只，年产6-9胎，繁殖生产使用期为90-300天。雌性大鼠成群饲养，可抑制发情。共一百二十二页染色体21对共一百二十二页一、 常用封闭群1. Wistar1920年在美国Wistar研究所培育成功的白化封闭群大鼠。其特点为头部较宽，耳朵较长。性周期稳定、繁殖能力强、产仔多，平均每胎产仔10只左右，生长发育快，性情温顺。抗病例力强。自发性肿瘤发病率低。雄鼠耳朵比其他品系稍长，尾长短于身长。易于饲养繁殖。现广泛分布于世

46、界各地，是使用历史(lsh)最长 使用数量最多的大鼠品系。现各地饲养的封闭群遗传差异较大。第二节 常用(chn yn)品种品系 . Wistar共一百二十二页2.SD1925年美国Sprague dawley农场用Wistar大鼠培育而成。其特点为头部狭长，尾长接近于身长，产仔多，生长发育较Wistar快，性情比Wistar大鼠稍凶猛。对疾病的抵抗力较强，尤其对呼吸道疾病的抵抗力很强。对性激素敏感性高。自发肿瘤的发生率较低。老年雌鼠普遍出现乳腺(rxin)肿瘤。选用11-15月龄雌性鼠，可作为更年期实验模型，以研究更年期综合征。 共一百二十二页二、 近交品系 现在全世界已培育出100多个近交品

47、系，常用的有：1.ACI系 ：1926年由哥仑比亚大学肿瘤研究所培育(piy),黑色，但 腹部和脚白色 ，易发生先天性畸形。该品系大鼠低血压。2.F344/N大鼠： 1926年由哥仑比亚大学肿瘤研究所培育 ， 白色 ，我国从NIH研究所引进。用于毒理肿瘤、生理学研 究。ACI 大鼠共一百二十二页 三. 常用突变(tbin)系裸大鼠肥胖症大鼠（Obese Rat ）：SHR/OLa：自发性高血压大鼠白内障大鼠：癫痫大鼠： 尿崩症大鼠： SHR共一百二十二页 1.裸大鼠体毛稀少，成年鼠尾根部常多毛，2-6周龄皮肤上有棕色鳞片状物,随后变得光滑,发育相对缓慢(hunmn)。体重约为正常大鼠的60-7

48、0%,在SPF环境下可活1-1.5年。裸大鼠为先天无胸腺，T 细胞功能缺陷,同种或异种皮肤移植生长期达3-4个月以上；B细胞功能一般正常,NK细胞活力增强。对多种传染病更敏感，易患呼吸道疾病。（仙台病毒）主要用于肿瘤方面的研究。 共一百二十二页2.肥胖症大鼠大鼠在3周龄时表现为肥胖(fipng)，到5周龄时特别明显。吃食物量比同窝正常鼠多，到40周龄其体重几乎是正常鼠的一倍，此时，雄鼠重约800克，雌鼠约500克，而同窝正常雄鼠约为500克，正常雌鼠约为300克。肥胖大鼠，血浆中脂肪酸总量增加十倍。胆固醇和磷脂含量增高。有高血压但无动脉壁的病变。雌性不能生育，子宫小且发育不全，雄性器官外观正常

49、，偶而具有繁殖力。共一百二十二页3.SHR大鼠1963年OKamoto从Kyoto医学院Wistar近交育成。白色突变系大鼠，自发性高血压大鼠。该鼠生育力和寿命无明显下降，可饲养13-14个月，繁殖时应选择高血压大鼠为亲本，其特征是自发高血压，且无明显原发性肾脏和肾上腺损伤，10周龄以后动脉收缩压升高，心血管疾病发病率升高，对降压药有反应(fnyng)，是筛选抗高血压药物的良好模型。共一百二十二页3.白内障（Cataract,ca）大鼠病鼠出生后约14日龄眼睑睁开时，表现为晶状体混浊（常为二侧），混浊常见于晶状体的中央。病变晶状体比正常的小，呈蘑菇状而不呈球状，混浊是晶状体蛋白变化的结果，而不

50、是由于(yuy)矿物质增加，视网膜可能正常，未见有任何糖尿病的迹象，甲状旁腺也未发生任何组织学异常。共一百二十二页第三节、大鼠在生物医学研究(ynji)中的应用共一百二十二页（一）药物学研究(ynji) 大鼠给药容易，采样量合适方便，行为多样化，常用于药物毒理、药效评价、新药筛选等研究。 . 药物毒性试验 . 致畸胎(j ti)研究 . 药物的筛选 . 药物效价评定、安全评定共一百二十二页（二）肿瘤学研究(ynji) 可复制成各种肿瘤模型，是肿瘤实验(shyn)研究最常用的实验(shyn)动物 。1. 自发性肿瘤模型：有肾上腺髓质肿瘤、乳腺癌和粒细胞型白血病等。2. 诱发肿瘤模型：如用二乙基亚硝胺、二甲基偶氮苯复制大鼠肝癌动物模型；用甲基苄基亚硝胺诱发复制大鼠食管癌，-甲基胆蒽诱发的肺鳞状上皮癌及间皮瘤等。共一百二十二页（三）遗传学研究(ynji) 大鼠的毛色变型很多，具有很多的毛色基因类型(lixng)，例如白化等位基因（C）、淡黄色（d）、粉红眼（p）、红眼（r）、银色(S)、沙色(sd)、黄色(e)、白灰色(wb)等，在遗传学研究中常可运用。自发性遗传病动物模型：高血压、白内障等。共一百二十二页（四）传染病研究(ynji) 微生物疾病：是研究(ynji)支气管肺炎、副伤寒的重要实验动物。选用幼年大鼠进行流感病毒传代，进行厌氧菌细菌学实验，还可进行