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文档简介

1、兽用生物制品与检测课件第八章 第 八 章 兽医生物制品 制造基本程序生物制品教学课件下载-样章.ppt1好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件要求【知识目标】 熟悉兽医生物制品制造的基本程序: 理解兽医生物制品的生产工艺; 掌握疫苗、免疫血清的制造程序; 【能力目标】 能操作相关的仪器,如组织捣碎机、培养箱等: 能进行简单疫苗和免疫血清、卵黄抗体的制备。2好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件内 容 疫苗制造; 类毒素制造; 免疫血清制造; 诊断试剂制造。3好

2、运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 第一节 疫苗制造 细菌性灭活疫苗 细菌性活疫苗制造 病毒性动物组织疫苗制造 病毒性禽胚培养疫苗制造4好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 细菌性灭活疫苗制造 菌种 种子液 菌液 灭活菌液 菌苗原液 配苗、乳化 分装 检验 接种培养基浓缩佐剂5好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 细菌性活疫苗制造弱毒菌种 种子液 菌液 配苗 菌苗原液

3、检验 活疫苗 冻干接种培养基保护剂6好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 病毒性动物组织疫苗制造 种毒 健康动物 感染动物毒液 保护剂 分装冻干 活疫苗 灭活病毒液 乳化分装 灭活苗佐剂7好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 注意事项: 动物选择 种毒 常用的接种途径 观察与收获 制苗脑内注射静脉注射肌肉注射皮下注射腹腔注射8好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 病毒性

4、禽胚培养疫苗制造种毒 鸡胚 收获尿囊液 配苗 浓缩病毒 分装检验 离心佐剂9好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 种毒与毒种继代 适应于鸡胚的种毒包括自然弱毒与人工培育的弱毒两类。多为冻干毒。 冻干毒种需按规定要求在鸡胚继代复壮,通常继代3代以上,经检定符合标准后方可作为生产疫苗的毒种,包括无菌检测、毒价和其他项目的检定等。10好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 鸡胚选择: 受精卵必须来自SPF鸡群,从受精卵入孵开始至培育全过程都应保持无菌,

5、要求一定的温度和湿度,且需不断翻动。 58日龄胚适用于卵黄囊接种:911日龄胚用于尿囊腔接种;1012日龄胚适于羊膜腔接种;1113日龄胚用于绒毛尿囊膜接种。11好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 接毒与收获 鸡胚接种途径主要有尿囊腔接种、羊膜腔接种、卵黄囊接种和绒毛尿囊膜接种4种。 鸡胚接毒后培养增殖的时间、温度、湿度,以及收获的标准与内容物依不同的病毒 和不同疫苗而异。12好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 配苗经无菌检验合格后即可进行

6、配苗。 湿苗: 通常于鸡胚液内按每毫升加入青、链霉素5001000Iu,放置010冷暗处处理后分装。 冻干苗: 按比例加入保护剂,充分混 合后过滤,在滤液内按每毫升加入青、 链霉索5001000Iu,混匀后分装冻干。13好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 五病毒性细胞培养疫苗制造动物或胚胎 组织 剪碎消化 细胞悬液 收获病毒 接种病毒 生长细胞 原苗 配苗检验 活疫苗 灭活病毒液 配苗检验 灭活苗14好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 第二

7、节 类毒素制造 细菌毒素的概念 脱毒 类毒素的精制 15好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 细菌毒素的概念 细菌毒素指致病性细菌产生的毒性物质。分为外毒素和内毒素两类。外毒素是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。16好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 外毒素主要是由革兰氏阳性细菌产生。 外毒素属蛋白质,一般容易灭活。 外毒素可用甲醛脱毒而成为类毒素。 由于类毒素既无毒性,又保持了毒素的 抗原性,能产生抗毒素抗体,故可用于 人工免疫。 1

8、7好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 脱毒 温度: 一般脱毒采用3739。 pH: 在微酸性时脱毒速度慢;在碱性 时脱毒速度快,但类毒素抗原性易受 破坏。 甲醛含量: 1%。 18好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 类毒素的精制 物理学方法:冻干、氧化铝吸附剂 化学沉淀法:酸、盐析、有机溶剂 层析法 :凝胶过滤19好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 第三节 免疫血

9、清制造20好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 一免疫血清的概念 又称高免血清,亦称为抗血清,为含有高效价特异性抗体的动物血清制剂,能用于治疗或紧急预防相应病原体所致的疾病。此种血清凶含有特异性的免疫抗体,用作被动免疫。根据免疫血清作用的对象不同,可分为抗病血清和抗毒素两类。21好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 动物的选择与管理免疫原免疫程序及制定的原则 血液采集与血清的提取二. 高免血清的制备流程22好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读

10、书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 动物的选择与管理: 动物的品种 :马、牛、山羊、绵羊、 猪、兔等,马居多。 年龄及健康状况 :青壮年 动物的管理23好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 免疫原: 制备抗苗免疫血清,基础免疫用抗原多为疫苗或死菌,而高度免疫的抗原,一般选用毒力较强的毒株。 制造抗病毒免疫血清 (如抗猪瘟血清) 基础免疫的抗原,可用猪瘟兔化弱毒疫苗;高度免疫抗原,则用猪瘟血毒或脏器毒乳剂等强毒。24好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者

11、成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 免疫程序及制定的原则 (一) 免疫程序 1 基础免疫 2 高度免疫 (二) 制定原则 常用皮下或肌肉注射,也可多部位注射。每次免疫后,血清中抗体效价会逐渐升 至最高水平后又下降。 给被免疫动物间隔时间,解除抑制作用。25好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 血液采集与血清的提取 (一) 血液的采集 1 全放血 2 部分采血 (二) 血清的提取 1自然凝结加压法 2枸橼酸盐血浆分离血清法 26好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收

12、藏兽用生物制品与检测课件第八章 三 .几种主要的抗血清制备方法 (一) 猪瘟抗血清 (二) 破伤风抗毒素 (三) 卵黄抗体 27好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 (一)猪瘟抗血清 选用60kg左右健康猪,注射猪瘟兔化弱毒疫苗2 ml,隔1421 d后高度免疫。高度免疫程序: 第一次高免,肌注血毒100 ml 第二次高免,肌注血毒200ml 第三次高免,肌注血毒300 ml。 每次间隔10 d。第三次免疫后911 d放血,也可以多次采血。28好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更

13、新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 (二)破伤风抗毒素1 选择512岁营养良好的马匹,先用 破伤风类毒素进行基础免疫,2 第一次注射精制破伤风类毒素油佐 剂抗原1 ml,第二次注射2ml。3 13个月后进行高度免疫。29好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 4 第一程高度免疫注射58针,最后一次免疫后67 d采血,隔l天再次采血,检测效价。5 抗毒素效价每毫升不低于1 200个单位(AE)。休息1416d,进行第二程免疫,一般免疫3次,间隔57 d,最后一次免疫后79 d采血。30好运动者健,好思考者智,好助人者乐好

14、读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 6 破伤风血清,用胃酶消化,按次序加 入15、20硫酸铵进行沉淀,7 加入10的明矾使明矾含量为1, 静置使之沉淀。8 取沉淀后的上清加38的硫酸铵沉 淀,沉淀物经透析即成精制破伤风抗 毒素。31好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 (三)卵黄抗体(IBD): 健康产蛋鸡群,油佐剂灭活苗肌注 2ml/只710日后,重复注射一次; 再过710刚再注一次,油苗剂量适度 递增; 定期检测卵黄抗体水平,琼扩效价达 l:128时,收集高免蛋大约一个月。

15、32好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 消毒,分离蛋黄。 加入生理盐水进行稀释(卵黄抗体琼 扩效价不低于l:16一l:32),加青、链 霉素各1 000u,加硫柳汞浓度达1/10 000,充分搅拌后分装,4贮存。 效价测定、细菌培养和安全试验,合 格后出厂。33好运动者健,好思考者智,好助人者乐好读书者博,好旅游者悦,好追求者成 持续更新请收藏兽用生物制品与检测课件第八章 免疫血清及卵黄抗体使用注意事项 治疗时应用越早效果越好。 血清用量根据动物的体重和年龄确定。 静脉注射血清的量较大时,将血清加温 至30左右再注射。 皮下或肌

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