大熊猫寄生虫病研究课件

1、大熊猫寄生虫病防控研究进展四川农业大学动物医学院 杨光友 一、危害大熊猫的寄生虫种类 寄生虫是危害大熊猫的一类重要病原。到目前为止，在野生和圈养大熊猫体内外共报道26种寄生虫。 一、外寄生虫 1、蜱（13种），其中血蜱属蜱9种。 2、螨2种（熊猫足螨和熊猫蠕形螨） 3、蚤2种（鬃蚤属蚤） 二、内寄生虫 1、吸虫1种（羚羊列叶吸虫） 2、绦虫1种（线中绦虫） 3、线虫3种（钩口线虫2种、西氏贝蛔虫） 4、原虫4种（住肉孢子虫1种、溶组织内阿米巴原虫1种、隐孢子虫1种、弓形虫） 蜱主要危害野生猫2000余个/只，一只饱血蜱吸 血是1-2毫升。痒螨主要危害圈养猫吸血性线虫-熊猫钩口线虫野生大熊猫钩虫

2、卵的阳性率为7.49（17/227）肠道原虫-隐孢子虫 幼龄动物和免疫功能低下者，可引起腹泻。 以隐孢子虫 18SrRNA基因为靶基因，对322个大熊猫粪样作了分子检测，检测出安氏隐孢子虫（ Cryptosporidium andersoni），圈养猫阳性效率为15.6%（19/122），野生猫粪样0.5%（1/200）。二、重要寄生虫（西氏贝蛔虫）研究进展 西氏贝蛔虫（Baylisascaris schroederi）是大熊猫特有的寄生虫，主要寄生于小肠，也可见于胃、胆管、胰管，野生猫感染强度可达2000条以上/只。 圈养大熊猫也常有发生，有较大的危害。1、分类地位 通过核糖体基因（ITS-

3、2、18S、28S）和线粒体基因（12S、COX、COX）和线粒体全基因组分析，从分子水平明确了该蛔虫分类地位与系统发生关系 1 大熊猫等八种野生珍稀动物蛔虫ITS-2基因的序列分析. 中国兽医科学,2008,38(11):933-938 2基于cytb基因对大熊猫等六种珍稀野生动物感染蛔虫的种系发育分析. 中国兽医科学，2012,42(9):895-899 3大熊猫等八种野生哺乳动物蛔虫的线粒体COX和COX基因的亲缘关系分析. 畜牧兽医学报,2012,43(10):1645-1650 4 Molecular characterization and phylogenetic analysi

4、s of ascarid nematodes from twentyone species of captive wild mammals based on mitochondrial and nuclear sequences. Parasitology, 2012,139(10):1329-1338 5 Complete mitochondrial genomes of Baylisascaris schroederi, Baylisascaris ailuri and Baylisascaris transfuga from giant panda, red panda and pola

5、r bear. Gene, 482 (2011) 59672、种群遗传结构分析 采用线粒体基因（12S、cytb、atp6和cox1）全序列对不同山系野生大熊猫蛔虫的种群遗传结构进行了分析 1基于线粒体12S对中国两大山系大熊猫西氏贝蛔虫种群遗传多样性的分析. 兽类学报，2015,35（3）:328-3352Analysis of the genetic diversity of the nematode parasite Baylisascaris schroederi from wild giant pandas in different mountain ranges in China.

6、 Parasite &Vector,2013,6:2333Absence of genetic structure in Baylisascaris schroederi populations, a giant panda parasite,determined by mitochondrial sequencing. Parasites & Vectors 2014, 7:6063、功能基因 评价了5个功能基因作为疫苗或诊断用重组抗原候选基因的潜力1Cloning, expression and evaluation of the efficacy of a recombinant Bay

7、lisascaris schroederi Bs-Ag3 antigen in mice. Vaccine,2008,26:6919-69242Sequence analysis of Bs-Ag2 gene from Baylisascaris schroederi of giant panda and evaluation of the efficacy of a recombinant Bs-Ag2 antigen in mice. Vaccine, 27(2009):3007-30113Sequence Analysis of the Bs-Ag1 Gene of Baylisasca

8、ris schroederi from the Giant Panda and an Evaluation of the Efficacy of a Recombinant Baylisascaris schroederi Bs-Ag1 Antigen in Mice. DNA and Cell Biology, 2012,31(7): 117411814Potential of recombinant inorganic pyrophosphatase antigen as a new vaccine candidate against Baylisascaris schroederi in

9、 mice. Veterinary Research 2013, 44:905Cloning and characterization of a novel sigma-like glutathione S-transferase from the giant panda parasitic nematode, Baylisascaris schroederi. Parasites & Vectors,2015,8:444、虫卵PCR检测方法建立 通过扩增线粒体12S基因片段（291bp）和COX2基因片段（331bp）建立了特异、灵敏的虫卵PCR检测方法1A sensitive and sp

10、ecific PCR assay for the detection of Baylisascaris schroederi eggs in giant panda feces. Parasitology International,2013,62: 4354362Molecular Diagnosis of Baylisascaris schroederi Infections in Giant Panda (Ailuropoda melanoleuca) Feces Using PCR. Journal of Wildlife Diseases, 2013,49(4):105210555、

11、基因组与转录组 西氏贝蛔虫雌虫和雄虫的基因组测序及分析，同时进行了基因组精细图谱的构建； 西氏贝蛔虫胚胎期虫卵、一期幼虫（虫卵内）、二期幼虫（虫卵内）、肠道四期幼虫及成虫五个时期的转录组测序及分析。 基因组为290 Mb6、存在问题 （1）药物防治与耐药性； 四川地区圈养大熊猫蛔虫感染率为25.71（54/210）。【经济动物学报，2014，18（4）：214-216】 伊维菌素（膏剂，0.2mg/kg体重，每天1次，连用2天）、伊维菌素（片剂，0.2mg/kg体重，每天1次，连用2天）和双羟萘酸噻嘧啶（膏剂，10mg/kg体重，每天1次，连用2天），结果：伊维菌素（膏剂）组、伊维菌素（片剂）

12、组和双羟萘酸噻嘧啶（膏剂）组的虫卵转阴率分别为44.44、0.00和80.00。【畜牧与兽医，2015，47（6）：87-89】 耐药性问题？ （2）大熊猫伊维菌素中毒机理； 文献报道犬、猫伊维菌素中毒后主要临床表现为昏迷、抽搐和瞳孔放大。3只大熊猫伊维菌素中毒症状与犬、猫症状基本相似，但最大的不同是3只中毒个体都表现为瞳孔缩小。3只大熊猫个体在发病时间和季节上非常接近，且均是在口服伊维菌素后的10-12h发病。【野生动物学报，2015,36（3）:337-341】 伊维菌素为一种神经递质抑制剂，通过促进-GABA的释放，-GABA能够阻碍节肢动物肌纤维和线虫比邻神经原的节后神经传递，从而导致

13、节肢动物和线虫类的麻痹和死亡。 家犬的常规推荐治疗剂量为0.2-0.3mg/kg体重，口服或者皮下注射。伊维菌素无论口服还是皮下注射均能广泛分布于全身各组织，但很难渗透进入脑脊液从而降低了自身毒性。 但柯利犬（Collie）或带有柯利血缘的杂交犬因为特殊的基因缺陷导致伊维菌素更多地渗透进入中枢神经系统，从而出现中毒反应。柯利犬伊维菌素中毒机理 对伊维菌素敏感的柯利牧羊犬在MDR基因的第一个外显子上缺失了ATAG四个碱基，结果造成开放阅读框移位，所编码的肽链在第91个位置提前终止，形成了不成熟的P-糖蛋白，从而使“血脑屏障”失效，伊维菌素进入大脑组织，引起神经中毒症状。 大熊猫伊维菌素中毒机理 参考犬类MDR的全长cDNA，在大熊