科技奖励申报(禽流感动物模型、免疫机理及疫苗研制ppt课件

1、肇庆大华农生物药品 广东省实验动物监测所 广东大华农动物保健品股份 2021年11月禽流打动物模型、免疫机理及疫苗研制与推行运用 立项背景总体思绪 主要技术内容 主要创新点汇报提纲五六三二一四七相关知识产权与获奖励情况主要技术经济目的与推行效益 主要完成人对工程的奉献禽流感的危害经济损失宏大危害人类安康影响国家笼统和社会稳定2005年11月8日，温家宝在黑山防治高致病性禽流感医疗站探望医疗、防疫人员。一 立项背景1 迄今为止，全世界已有超越 4亿只家禽染病死亡或惨遭扑杀，呵斥的经济损失高达200 亿美圆我国2004年、05年、06年大规模迸发禽流感，养禽业损失150亿美圆以上世界卫生组织发出警

2、告，一场全球性的流感大流行将会导致200万700万人命丧黄泉人们心思恐慌，不敢吃鸡，家禽业受损，出口受阻，旅游业受挫，行业经济全面遭到冲击，影响社会稳定粮农组织的资料显示，H5N1高致病性禽流感疫情于2003年迸发后，在全球己感染565人，导致331人死亡。今年9月，结合国粮食及农业组织(FAO)官员卢布罗夫日前发出警告，一种致命的“H5N1高致病性禽流感变种病毒在越南出现。现有的一切疫苗对该病毒均无效果。1、我国地域辽阔，候鸟的迁簁致使禽流感长期存在，加剧防疫的难度。2、禽流感毒株变异快，对疫苗防控技术提出新的挑战。3、动物禽流感疫苗消费工艺落后，规范化程度低，亟待改良。4、研讨人禽流感疫苗

3、和药物缺乏哺乳动物模型，有待摸清和建立哺乳动物的免疫机理。针对以上问题，进展了“禽流打动物模型、免疫机理及疫苗的研讨肌肉变绿一 立项背景2禽流感防治存在的问题二 总体思绪1、经过蛋白重组技术，建立禽流感疫苗产业化的根底种毒和疫苗毒株，研制高致病性多变异型的高效疫苗，用于动物禽流感的防控。2、利用造模毒株建立哺乳动物模型,为人禽流感疫苗和药物研讨提供技术支持。3、研讨新的消费工艺，制定新的规范，为禽流感疫苗产业化提供检验规范和制造规范。三 主要技术内容三 主要技术内容11、制备禽流感毒株挑选造模毒株确定鹅源禽流感H5N1病毒(A/Goose/Guangdong/NH/2003)是适宜的毒株，不用

4、经哺乳动物细胞顺应，利用鸡胚内扩增病毒后即可感染哺乳类实验动物，并在体内增殖，表现出与人禽流感类似的临床病症。挑选疫苗毒株最终选取H5N1Re-1/4/5、H9SS和(SS/94)作为制备疫苗毒株，这些毒株毒力弱、免疫原性好，能突破母源抗体干扰，消费种毒各项性能目的领先。三 主要技术内容22、研讨建立哺乳动物模型及模型目的 1 利用造模毒株建立了近交系BALB/c小鼠和封锁群ICR小鼠两个小鼠模型。确定了近交系BALB/c小鼠和封锁群ICR小鼠的接种剂量100uL ，可使感染小鼠死亡率到达73%；经过不同接种途径的研讨，确定鼻腔接种后感染小鼠出现明显的禽流感临床疾病过程。 同时确定了小鼠模型的

5、临床病症、死亡率、病理变化、病毒复制、免疫反响等方面目的要符合人类感染禽流感疾病的根本特征 2 确定用“环甲膜穿刺术经气管接种为猴呼吸道接种方式，建立了恒河猴模型。该方法可以将接种物直接接种到肺内，操作技术简单，定量准确，动物损伤较小，不需较高防护设备。 同时确定了恒河猴模型的临床病症、体温、呼吸频率、感染器官、抗体程度、外周血白细胞的动态变化、外周血T 淋巴细胞及其亚群的动态变化、免疫因子、病理变化方面的目的，要与人禽流感疾病类似。三 主要技术内容33、研讨禽流感免疫机理小鼠模型免疫机理1主要表现T细胞免疫功能损伤，这种损伤与感染病程的开展和转归相一致，细胞免疫功能目的下降时期也是病情严重时

6、期。到达恢复期各目的渐恢复正常。T细胞免疫功能低下是免疫病理改动之一。2细胞因子表达失去平衡或过多的表达，都能够对宿主产生免疫病理损伤，推测这是H5N1禽流感引起哺乳动物严重疾病的另一重要致病机制。恒河猴模型免疫机理主要表现为外周血淋巴细胞数和一些T淋巴细胞亚群在第1天出现一过性下降，T 淋巴细胞亚群CD3T淋巴细胞、CD3CD4+T淋巴细胞和CD3CD8+T 淋巴细胞也在感染的第1 天出现一过性的下降，感染后第7天出现抗体，并逐渐升高，11天后到达最高，至90天仍维持较高程度。抗H5N1抗体能有效维护并减轻病毒对机体的再次攻击，抑制病毒增殖，为人禽流感疾病的免疫接种或抗体治疗提供了直接根据。

7、三 主要技术内容44、研制禽流感系列疫苗建立消费种子库研讨质量控制关键点将根底毒种经SPF鸡胚复壮、增殖与传代，建立种子批，经病毒含量、血凝特性、毒力、平安性、免疫原性、特异性、纯粹检验等实验检验均符合要求。同时，定期对不同代次的根底种毒和消费用种毒对免疫原性相关基因HA和NA进展测序并分析其序列能否变异，以确保种毒不发生变异。1确定多联疫苗的质量控制关键点为“抗原浓缩和“乳化技术；2经过比较Millipore的横向切流、中空纤维、延续离心等进展浓缩抗原的方法，最终确定了抗原浓缩23倍是免疫维护效果与单苗一致的关键工艺。3研讨不同乳化设备对乳化效果的影响，最终确定选择了进口乳化设备是最正确乳化

8、工艺的关键。按照该工艺消费的疫苗，乳化颗粒均匀，稳定性好，疫苗中抗原释放速度合理。该种疫苗在2-8的保管期超越15个月，疫苗免疫鸡后继续期超越5个月。三 主要技术内容5在实验室研制、中试研制获得胜利的根底上，向农业部申报新兽药证书和消费同意文号，本工程胜利研制并获得2个新兽药证书和5个消费批文：H5+H9(N28+SS)、ND+IB+H9La Sota+M41+SS/94)、H5N1Re-1)、 H5N1Re-5)、 H5N1Re-5+ Re-4)、H9SS)中试消费及临床运用申报新兽药证书和消费批文在实验室试制获得胜利的根底上，在消费车间按照制定的延续消费不少于3批，经检验合格后，申报获得临

9、床批文，对不同种类普通鸡免疫，免疫数量不少于20000只，经过察看免疫后的临床病症和检测抗体程度，确定试制产品平安有效，同时最终确定免疫剂量、保管条件和保管期，建立质量规范。4、研制禽流感系列疫苗三 主要技术内容6 5、研讨新工艺、新规范1采用多级挑选、保证抗原质量： 胚蛋、孵化前期、后期、接种后和收获前均对不合格的胚蛋进展挑除；2挑选优化疫苗配方，处理了免疫后出现疫苗残留、肿块、肌肉变绿等不良反响；3对疫苗乳化颗粒大小进展了监控，疫苗乳化颗粒大小为0.2-3微米；极大地延伸了疫苗保管期2年，远高于国家规范1年。提出了原资料的来源和质量要求改良消费工艺1经过研讨最终确定采用SPF或非免胚蛋培育

10、病毒，能极大地提高病毒滴度并降低了外源病毒的污染；2研讨、挑选国内外油佐剂，最终确定采用进口佐剂，相对传统消费工艺疫苗免疫后，HI抗体程度提高1-2滴度。四 主要创新点四 主要创新点11、在国内初次研讨哺乳动物禽流感免疫机理，率先建立禽流感感染模型及模型目的。工程查新结论 除本工程的相关研讨人员发表的论文外，未见到国内和国外有与本委托工程“禽流感H5N1病毒初次和再次感染中免疫机理的实验研讨中较早且系统测定禽流感H5Nl病毒的哺乳动物BABL/C小鼠模型的CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞免疫和IL-2、IL-4、IL-10、 IL-18、TNF-与IFN-细胞因子变化的创新点一样的文献报

11、道，创新点一样的文献、专利和成果报道。四 主要创新点22、发现黄酮类化合物及单抗物质有效防治禽流感。工程查新结论 除本工程的相关研讨人员发表的论文外，未见到国内有与本委托工程中直接利用鹅源禽流感H5N1病毒感染哺乳动物、在未经预先顺应的情况下经过鼻腔接种ICR小鼠和BALB/c小鼠或经过“环甲膜穿刺术经气管注射感染恒河猴的造模方法、小鼠模型及恒河猴模型、模型目的等创新点一样的文献、专利和成果报道。植物黄酮类化合物的用途表没食子儿茶素没食子酸酯微囊颗粒及其制备工艺四 主要创新点33、研制了防控禽流感的系列疫苗禽流感H5+H9二价灭活疫苗N28+SS株鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感H9亚型三联活

12、疫苗La Sota株+M41株+SS/94株四 主要创新点44、研讨新工艺，制定新规范，改善行业规范。指标原标准新标准新标准效果鸡胚无标准SPF或非免胚蛋毒价高、无外源病毒油佐剂无标准4项 芳烃指数、粘度、灭活技术不适应灭活剂浓度、温度提高抗原免疫原性浓缩技术无标准EID501.0,HA2免疫后，抗体水平提高2-3Log2,保护期6个月粘度8秒/ml6秒/ml提前7天抗体有效保护，无副反应五 主要技术经济目的与推行效益1主要技术目的疫苗指标名称新标准原行业标准原材料列入目录，有技术指标无抗原滴度HA9.0；EID508.0 HA8.0；EID507.0 疫苗颗粒度0.2-3微米无内毒素提出质量

13、标准，完善2005版疫苗规程黏度6秒8秒保存期2年1年攻毒保护全部健活不小于4/5免疫后抗体水平HI不小于9HI不小于6小鼠和恒河猴模型感染禽流感病毒后，其病理病症应符合人类感染禽流感疾病的根本特征，胜利建立了禽流感的动物模型。建立了抗原浓缩技术、填补了动物疫苗细菌内毒素检测技术、突破了乳剂疫苗的颗粒度，处理了乳剂疫苗的不稳定性和分层，疫苗维护期延伸至2年，完善了疫苗消费新规范。附：疫苗质量新规范主要经济目的2021-2021年工程经济效益年份新增利润新增税收创收外汇节支总额20083461.892281.3337.8018672.3220094646.852238.4095.8220400.

14、3120106863.732714.29128.8117749.33累计14972.477234.03262.4356821.96单位：万元/万美圆五 主要技术经济目的与推行效益2 2003-2021年共销售禽流感疫苗156.24亿羽份，年均增长率34%；实现销售收入11.44亿元，年均增长28%。五 主要技术经济目的与推行效益3主要经济目的2003-2021年禽流感疫苗销售量亿羽份2003-2021年禽流感疫苗销售收入万元08-10年H5亚型禽流感疫苗推行运用情况万羽份五 主要技术经济目的与推行效益4越南注册证埃及注册证08-10年禽流感疫苗出口产品情况万羽份五 主要技术经济目的与推行效益5

15、禽流感疫苗是防控疫情的关键，为养禽业的消费平安保驾护航。控制疫情发生，降低动物对人感染的风险。近3年销售禽流感疫苗47.33亿毫升，减少禽类捕杀损失1154亿元，节省治疗费用5亿元 H5：69.95亿羽份3斤/只5.5元/斤=1154.18亿元 H9：24.7亿羽份0.3-0.07元/只=5.68亿元保证养禽业安康开展，添加农民收入，推进“三农任务实施。社会效益五 主要技术经济目的与推行效益6六 相关知识产权与获奖励情况1获得发明专利2个：-植物黄酮类化合物的用途授权号：ZL 200410074592.8； -表没食子儿茶素没食子酸酯微囊颗粒及其制备工艺授权号： ZL 200710165270

16、.8获得新药证书2个：-禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗 证号： 2006新兽药证字33号； -鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感H9亚型三联灭活疫苗La Sota株+M41株+SS/94株 证书号： 2021新兽药证字15号获得消费批文5个：-禽流感灭活疫苗H9亚型，SS株 证号:兽药生字2021190032080； -鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感H9亚型三联灭活疫苗La Sota株+M41株+SS/94株 证号:兽药生字2021190032168 -重组禽流感病毒灭活疫苗H5N1亚型，Re-1株) 证号:兽药生字2021190022098 -重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗H5N1，Re-5株+Re-4株 证号:农医药便函202127号 -禽流感油乳剂灭活疫苗H5亚型，N28株) 证号:兽药生字2006190022077共发表论文合计33篇，其中SCI收录2篇，他引40次两位中国工程院院士评价由中国工程院院士刘秀梵和夏咸柱院士给予以下评价：本工程技术到达国内领先程度，为禽流感防治研讨提供了重要支持，为人类禽流感的防治迈进一个新台阶，经济和社会效益良好。六 相关知识产权与获奖励情况22021-2021年疫苗获广东省名牌产品六 相关知识产权与获奖励情况32021年3月8日在深圳证券买卖所创业板上市，股票代码：3001862004年获得全国农牧渔业丰收奖序号姓名主