出口肉及肉制品中奥芬达唑残留量检验方法

1、出口肉及肉制品中奥芬达唑残留量检验方法.适用范围本方法适用于出口猪肉中奥芬达唑残留量地检验.原理概要试样经用碳酸钠碱化后，用乙酸乙酯及丙酮抽提.蒸发提取液至干，溶解残留物于正己烷中.正己烷溶液中地奥芬达唑经液液分配而进入磷酸溶液中.酸溶液经碱化后，再用乙酸乙酯提取.将乙酸乙酯层挥发至近干，残渣溶解于二氯甲烷并加到硅胶小柱中净化，用甲醇二氯甲烷洗脱.洗脱液挥发后，将残渣溶解于流动相中供测定.主要试剂和仪器.主要试剂乙酸乙酯：重蒸馏；丙酮：重蒸馏；正己烷：重蒸馏；甲醇：重蒸馏；二氯甲烷：重蒸馏；无水乙醇；无水硫酸钠：灼烧，贮于密闭容器中备用；碳酸钠溶液：.溶解无水碳酸钠于水中；磷酸溶液：.将磷酸，

2、密度(p)约用水稀释至；氢氧化钾溶液：.溶解氢氧化钾于水中，用水稀释到；磷酸铵缓冲液：，.溶解磷酸二氢铵()于约水中，用稀氨水调节至，并用水稀释到(临用时现配)；流动相：甲醇磷酸铵缓冲液()；奥芬达口坐标准品：纯度；奥芬达唑标准溶液：准确称取奥芬达唑标准品，溶于二甲基亚砜，制成浓度为地标准储备液.根据需要再用甲醇稀释储备液成适当浓度地标准工作溶液.仪器液相色谱仪：配有紫外检测器；旋转蒸发器；均质器；离心瓶：；计；全玻璃系统蒸馏装置；硅胶小柱；过滤器：N.试样地抽取与制备.检验批以不超过件为一检验批.同一检验批地商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等.抽样数量批量，件最低抽样数，件

3、.抽样方法按规定地抽样件数，随机抽取，逐件开启.从每件中取一袋作为原始样品，原始样品总量不少于，放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室.如每件中无小包装，或有小包装但每袋重量超过者，可用经灭菌地锋利刀，在抽出地包件中，每件割取不少于，混合后置于洁净容器内，作为混合原始样.混合原始样地重量不少于.加封后，标明标记，及时送交实验室.试样制备从所取全部样品中取出有代表性样品约，经组织捣碎机充分捣碎均匀，均分 TOC o 1-5 h z 成两份，分别装入洁净容器内作为试样.加封并标明标记.试样保存将试样于以下冷冻保存.注：在抽样及制样地操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量地变化.

4、过程简述.提取称取试样(精确至)于离心瓶中，加碳酸钠溶液()和乙酸乙酯，高速匀浆.再加无水硫酸钠，继续匀浆(低速).于离心，再将乙酸乙酯层通过滤纸滤入旋转蒸发瓶中.加丙酮到离心瓶中，再低速匀浆提取.将丙酮提取液再通过滤纸滤入旋转蒸发瓶中.用无水乙醇洗涤滤纸，将洗液并入滤液中.于水浴上旋转浓缩至干.净化用正己烷溶解残渣，将溶液移到分液漏斗中.用正己烷洗涤蒸发瓶，洗液并入分液漏斗中.然后用X磷酸溶液()洗涤蒸发瓶，洗液全部并入分液漏斗中.剧烈振摇提取，静置，使分层.将下层磷酸溶液转入第二个分液漏斗中.再用磷酸溶液()提取正己烷层两次，将磷酸提取液全部并入第二个分液漏斗中.加正己烷到磷酸提取液中，振

5、摇洗涤.将磷酸提取液放入地烧杯中，用约氢氧化钾溶液()小心地调节到().在碱化时，应将烧杯置于冰浴中，并用计测值.将烧杯中地溶液转入分液漏斗中，用总量为地乙酸乙酯分数次洗涤烧杯，洗液全部转入分液漏斗中.剧烈振摇提取，静置分层.将水相放入烧杯中，然后将乙酸乙酯层通过衬有玻璃棉和约无水硫酸钠地漏斗滤入旋转蒸发瓶中.将烧杯中地水溶液倒回分液漏斗中，再用乙酸乙酯如法提取一次.弃去下层水溶液，将乙酸乙酯层通过无水硫酸钠漏斗并入同一旋转蒸发瓶中.用乙酸乙酯洗涤无水硫酸钠漏斗，洗液并入蒸发瓶中.置旋转蒸发器上(水浴)将提取液挥发至干.用二氯甲烷溶解残渣.用二氯甲烷预淋硅胶小柱，然后将上述二氯甲烷样液倒入硅胶

6、柱中，用二氯甲烷洗涤蒸发瓶两次，洗液也倒入硅胶柱中，弃去流出液.以二氯甲烷洗涤硅胶柱，弃去流出液.用甲醇二氯甲烷()洗脱柱上奥芬达唑，收集洗脱液于试管中.通氮气流将洗脱液挥发至干.准确加入流动相以溶解残渣，溶液通过N过滤器过滤后，供测定.测定.液相色谱条件色谱柱：，X（内径），（粒径），或相当者；保护柱：，X（内径），（粒径），或相当者；流动相：甲醇磷酸俊缓冲液（+）；检测波长：；流速：；进样量：小.测定根据样液中被测兽药含量情况，选定峰高相近地标准工作溶液.标准工作液和待测样液中奥芬达唾地响应值均应在仪器检测地线性范围内.标准工作液与样液应等体积参插进样测定.在上述色谱条件下，奥芬达晚地保留时间约为；标准品地色谱图见附录中图.空白试验除不称取试样外，均按上述测定步骤进行.结果计算用色谱数据处理机或按式（）计算试样中奥芬达晚地残留含量：()式中：一一试样中奥芬达唾残留含量，；样液中奥芬达晚地色谱峰高，；一一标准工作液中奥芬达晚地色谱峰高，；一一标准工作液中奥芬达晚地浓度，小；式一样液最终定容体积，；一