不同活性炭对罗汉果快繁生根的影响

1、不同活性炭对罗汉果快繁生根的影响刘健晖1，陆静1，曹丽敏1，王志新1，肖国辉2，李志清2（1.衡阳师范学院生命科学与环境学院/生物资源保护与利用衡阳市重点实验室， 湖南 衡阳 421008；2.湖南省百富农业科技开发有限公司， 湖南 衡阳 421008）摘 要 本试验研究不同培养基B5、1/2 B5、MS、1/2 MS以及不同类型、不同浓度活性炭对罗汉果快繁生根的影响。结果表明：不添加活性炭的情况下，四种不同培养基中生根率最高的培养基为B5培养基，生根率为70%，且生根数最多，平均根长最长；粗、细两种活性炭均对罗汉果生根有促进作用，但细活性炭培养基诱导的根更长。在不同类型以及不同浓度活性炭的培

2、养基中生根率最高的为细活性炭1.0 g/L的B5培养基和粗活性炭1.0 g/L的B5培养基，但细活性炭1.0 g/L的B5培养基生根数量和平均根长显著高于（P0.05）后者。因此，较为适宜的生根培养基配方为：细活性炭1.0g/L，培养基为B5。关键词 罗汉果；培养基；活性炭；生根Effects of Different Acticarbon Culture Medium on Rooting of Tissue Culture Seedling of Siraitia grosvenorii Liu Jian-hui1, Lu Jing1, Cao Li-min1, Wang Zhi-xin1

3、, Xiao Guo-hui2, Li Zhi-qing2（1College of Life Sciences and Environment, Hengyang Normal University, Hengyang 421008, Hunan, China; 2Hunan Bai Fu agricultural science and Technology Development Co., Ltd. Hengyang 421008, Hunan, China）Abstract The effects of different mediums and different types of a

4、cticarbon on rooting of Siraitia grosvenorii were investigated. The Results showed that the highest rooting rate of four different medium was B5, without activated carbon and the coarse and the rooting rate was 70%, the root number was the most, the average root length was the longest. the two kinds

5、 of activated carbon were allcapableofpromotingthegrowthofnewrootsof Siraitia grosvenorii. The root of fine activated carbon was longer. The highest rooting rate was B5 with fine activated carbon 1 g/L or 1 g/L coarse activated carbon. But the number of rooting and the average root length of B5 medi

6、um with fine activated carbon 1 g/L were significantly higher than that of the latter (P活性炭NAA蔗糖7。然而，对于研究不同活性炭种类和浓度对罗汉果快繁生根的影响较少。因此，本试验探究罗汉果快繁生根的最佳培养基，以及不同类型和浓度的活性炭对罗汉果快繁生根的影响；对比罗汉果根的分化时间、平均根长、生根率等指标，确定最合理的罗汉果快繁生根的处理方法。收稿日期：2018-04-23；修回日期： 基金项目：衡阳师范学院自然科学产学研合作类项目(14CXYY04)；国家自然科学基金项目（31470008）；功能金属

7、有机材料湖南省普通高校重点实验室开放基金资助项目（13K08）。通讯作者简介：刘健晖（1979- ），男，硕士，研究方向为热带亚热带果树遗传育种与生理。E-mail：269736361 材料与方法1.1 试验材料本试验以罗汉果无根试管苗为培养材料，苗均高为2.5 cm左右，发育状况良好，均带一个节，叶色正常。培养基为青岛高科园海博生物技术有限公司所生产的B5培养基，北京康倍斯科技有限公司的MS培养基。1.2 无菌苗的获得将罗汉果的幼茎先用流动的自来水冲洗30 mins，将洗净的罗汉果幼茎拿到超净工作台上进行消毒接种。将幼茎放到消毒过的大烧杯中，加入75%的酒精消毒10 s并不断搅动，将酒精倒掉

8、，再加入0.1%升汞溶液消毒10 mins且不断搅动，然后用无菌水冲洗3次后将幼茎取出。在接种盘上将其剪切成仅带一个节，约2.5 cm的茎段，接种入含MS+IBA 0.5 mg/L+ 6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L的培养基上，每个培养瓶接3个幼茎段，培养三周左右。可获得长有5-6片真叶的罗汉果无菌苗，以新长出的幼茎作为供试材料8。1.3 诱导分化生根培养基的配制和培养本试验使用的诱导生根基础培养基为MS、1/2 MS、B5、1/2 B5，添加IBA 0.5 mg/L，6-BA 1.0 mg/L，NAA 1.0 mg/L，蔗糖30 g/L，琼脂5 g/L，粗颗粒活性炭直径为

9、2.0 mm左右（0 g/L、0.5 g/L、1.0 g/L、1.5 g/L）或粉末状细活性炭（0 g/L、0.5 g/L、1.0 g/L、1.5 g/L），PH值为5.8-6.0，分装在培养瓶中，每个培养瓶50 mL培养基然后在高压蒸汽灭菌，再将预处理的幼茎分别接入不同的培养基中，每瓶接2个茎段，不同变量5个重复，即每个变量的植株共10株。在温度为27 ，光照强度为2500 Lx，12 h/d条件下培养30 d6。1.4 观察记录每天观察不同处理罗汉果无菌苗生根情况，以眼可辨认的根为准，并且记录最早生根时间、生根数量。30 d后，测定根长，并且最终计算生根率（生根植株数总植株数），平均根长=

10、（所有根长度和/生根数）9。1.5 数据分析 利用DPS数据统计软件进行LSD差异性分析。2 结果与分析2.1 不同基础培养基对罗汉果茎段生根的影响 不加活性炭的情况下，MS、1/2 MS、B5、1/2 B5各培养基的罗汉果生根情况，在培养30 d以后如表1所示。最早生根的为1/2 MS培养基，在接种后5天就开始生根，但生根率不高，最终为50%；B5培养基中生根率最高，达到60%，且生根数量也最多，平均根长最长（P0.05）。因此，不同基础培养基对罗汉果茎段生根最有利的为B5培养基。表1不加活性炭的情况下MS、1/2 MS、B5、1/2 B5各培养基的罗汉果生根情况不同培养生根率/%最早生根时

11、间/d生根数量/根平均根长/mmMS40b10a5b6c1/2MS50ab5bc16a9bB560a7b17a13a1/2B530b10a5b7c注：表中同列数据后不同小写字母表示差异显著（P0.05）。下同。2.2 添加不同浓度粗活性炭对罗汉果茎段生根的影响分别添加不同浓度粗活性炭后，不同培养基对罗汉果生根的影响如表2和图1所示。添加0.5 g/L粗活性炭，不同培养基中罗汉果生根率均有提高；其中生根率最高的为B5培养基，生根率为90%，且生根率和生根数量与没有添加活性炭差异极显著（P0.01）。在培养基中添加1.0 g/L粗活性炭，生根率最高的为B5培养基，最终生根率为100%，生根数量为2

12、4根，显著（P0.05）高于其他培养基。添加1.5 g/L粗活性炭，四种培养基中生根率都出现了下降的趋势，可能高浓度的活性炭限制了植株对营养物质的吸收，但B5培养基中生根率显著（P0.05）。与其他的处理比较而言，在B5培养基中添加1.0 g/L粗活性炭适宜作为罗汉果茎段生根培养基。表2不同浓度粗活性炭的情况下MS、1/2 MS、B5、1/2B5培养基的罗汉果生根的影响添加不同浓度活性炭（粗）g/L生根率/%生根总数/根平均根长/mm00.51.0 1.5 00.5 1.0 1.5 00.5 1.0 1.5 MS培养基40b50b70b50b5b15b12b9b6b8ab12a7b1/2 MS

13、培养基50ab60b50b40b16a16b18b14a9b11a7ab17aB5培养基60a90a100a90a17a22a24a17a13a10a10a15a1/2 B5培养基30b40b90ab60b5b7c16b15a7b10a9a13a 图1 不同浓度粗活性炭条件下MS、1/ 2MS、B5、1/2 B5培养基对罗汉果生根的影响图2 不同浓度细活性炭条件下MS、1/2 MS、B5、1/2 B5培养基对罗汉果生根的影响2.3 添加不同浓度细活性炭对罗汉果茎段生根的影响分别添加不同浓度细活性炭后，不同培养基对罗汉果生根的影响如表3和图2所示。结果表明，添加0.5 g/L细活性炭后，MS、1

14、/2 MS、B5、1/2 B5四种培养基中生根率都有提高，与没有添加活性炭有显著差异（P0.05），但平均根长增加明显；生根率最高的仍为B5培养基，最终生根率为100%，生根数量为26根，平均根长为20mm。添加1.5 g/L细活性炭后，根率最高的为MS培养基，最终生根率为80%，生根数量为23根，平均根长为23 mm；生根数量和平均根长与1/2 MS培养基和B5培养基无显著差异（P0.05）。综合比较来看，培养基中添加1.0 g/L细活性炭后，B5培养基适宜作为罗汉果茎段生根培养基。表3不同浓度细活性炭的情况下MS、1/2MS、B5、1/2B5培养基的罗汉果生根的影响添加不同浓度活性炭（细）

15、g/L生根率/%生根总数/根平均根长/mm00.51.0 1.5 00.5 1.0 1.5 00.5 1.0 1.5 MS培养基40b70ab70b80a5b17b12c23b6b9ab17ab23a1/2MS培养基50ab70ab60b70a16a21ab10c21b9ab13a23a21aB5培养基60a90a100a60ab17a29a26a20b13a12a20a22a1/2B5培养基30b80ab90a70a5b26a18b27a7b11a12b14b3 结论通过试验得出，粗活性炭，细活性炭均对罗汉果生根均有促进作用，但添加粗活性炭的培养基中较添加细活性炭所诱导的根更粗，添加细活性炭

16、的培养基诱导的根较粗活性炭更长，根盘更大。生根率最高的培养基为细活性炭1.0 g/L的B5培养基和粗活性炭1.0 g/L的B5培养基，其最终生根率均为100%；生根数量最多的为细活性炭0.5 g/L的B5培养基，10颗植株最终生根总数量为29根，细活性炭1.0 g/L的B5培养基，10颗植株最终生根总数量为26根，两者差异不明显（P0.05）；最终平均根长最长的为细活性炭1.5g/L的MS培养基和细活性炭1.0g/L的1/2MS培养基均为23mm，第二长的为细活性炭1.0g/L的B5培养基为22 mm，三者差异不明显（P0.05）。综合以上试验数据得出适宜的生根培养基配方为IBA 0.5 mg

17、/L，6-BA1.0 mg/L，NAA 1.0 mg/L，蔗糖30 g/L，琼脂5 g/L，细活性炭1.0 g/L，培养基为B5。 国内对于植物的组织培养技术方面的研究已较为全面，从原材料的选择到各种培养基的配方均有较为详细的研究1-2，对罗汉果组织培养的研究大部分是对罗汉果培养基的整体把握，深入研究罗汉果快繁生根培养基的较少。通过实验研究，比较不同培养基与不同活性炭浓度配比对罗汉果生根的影响，找出适宜的培养基条件，为罗汉果的生根培养基朝着更合理更科学的配方方向更进一步的发展提供了一定的理论依据。参 考 文 献1 黄春梅, 吴金寿, 赖钟雄. 罗汉果组织培养与快繁研究进展J. 亚热带农业研究, 2006, 2(04): 298-303.2 谭颖, 马少妹, 韦冬萍, 等. 罗汉果种植业发展存在的问题及对策J. 黑龙江农业科学, 2013(5): 130-132.3 李典鹏, 张厚瑞. 广西特产植物罗汉果的研究与应用J. 广西植物, 2000, 20(03): 270-276. 4 蒋水元, 蒋剑刚, 李锋, 等. 罗汉果组培繁殖的技术要点J. 广西植物, 2008, 28(06): 827-831.5 王小敏, 叶晓霞, 龙海桂. 罗汉果茎段快繁技术研究J. 岳阳职业技术学院学报, 201