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文档简介
1、SSR标识表记标帜技能在种子纯度断定中的研究希望论文关键词:种子纯度SSR标识表记标帜研究希望论文摘要:种子纯度在种子消费中的职位日益进步,以往的形态断定等要领难以满意人们的要求。随着分子标识表记标帜技能的生长,越来越多地被应用到种子纯度断定中。本文先容了SSR分子标识表记标帜技能的根本原理和特点,扼要表达了SSR标识表记标帜技能在农作物种子纯度断定上的研究希望,并就其在杂交种纯度方面的应用潜力举行了探究。Keyrds:Seedpurity;SSRarkers;Researhprgresses1.媒介随着我国农业经济的生长和种子市场的渐渐范例,种子的真假和纯度对种子消费具有越来越紧张的影响。为
2、了庇护农夫以及育种者的长处,生长快速、不变、可靠的品种纯度断定要领具有紧张的意义。种子品种纯度断定重要包罗品种真实性和品种纯度断定两个方面。品种断定重要指对供检样品的真实性举行断定。品种纯度就是对品种的同等性举行阐发。种子纯度是种子质量的焦点指标,是权衡种子质量的重要尺度,种子纯度的凹凸对农业消费的产量和品格有较大的影响,因此在种子消费、加工、贮藏和谋划商业中有紧张的意义,向来受到种子办理部分、种子消费者和用种者的严密存眷。品种纯度查验的要领很多,有籽粒形态断定,幼苗断定,卵白质电泳断定和田间小区莳植断定等1,但这些要领均有不敷之处。籽粒形态断定可以区分性状差异显着的,但这种差异性状较少,正确
3、性差;幼苗断定实用于性状表示差异较大的品种,可以或许断定的品种少;卵白质电泳由于遗传种质资源的局促,品种间的差异越来越小,难以断定。纯度断定最可靠的要领是田间小区莳植断定,但是这种要领必要一个生长季候,时间较长,泯灭较多的人力物力。并且上述要领受报酬因素的影响较大,导致检测效果产生偏向。为了落服这些缺陷,人们不竭地探究新的要领。随着科学技能的进步,分子生物技能渐渐应用于品种纯度的查验,以遗传物质DNA为底子的分子标识表记标帜技能也渐渐受到人们的亲睐。DNA分子标识表记标帜技能本质上是指能反响生物个别或种群间基因组中某种差异的特异性DNA片断2,由于其快速、正确、可靠、不受情况因素的影响,越来越
4、多地被应用到种子纯度检测中。SSR是比年来生长起来的一种DNA分子遗传标识表记标帜技能,是创立在PRPlyerasehainReatin底子上的,在植物基因组中的应用非常活泼,已被普及应用于基因定位,种子进化及遗传多样性的研究3。如今,SSR技能由于其具有数目富厚,多态性高,呈显性遗传等特点,在种子纯度检测中得到普及应用。2.SSR标识表记标帜的原理及特点2.1SSR标识表记标帜的原理SSRSipleSequeneRepeat,简朴重复序列又称微卫星DNA,是一类由几个多为16个核苷酸为单元串联重复而成的DNA序列,长度一样平常在100bp以内,较短4。这些短的串联重复是在DNA复制历程中,由
5、于DNA滑动、复制时,滑动链与互补链碱基错配,而产生的一个或几个重复单元的插入或缺失。Valdas等以为,每一次突变都市增长一个或几个重复单元,从而导致新的等位基因的出现5。微卫星DNA是一种非常活泼的碱基序列,普及漫衍于各种真核生物基因组的差异位置,并且漫衍比力匀称,能到场遗传物质的布局改变,基因调控及细胞分化等历程,有自身特异性结合卵白,还能直接编码卵白质6。微卫星基因序列中,重复基因的重复次数差异,且重复的基因序列差异,产生了简朴序列长度多态性和随机扩增微卫星多态性,从而反响高度的等位基因多样性。由于微卫星位点两侧的DNA序列较为守旧,按照两侧的这个守旧序列方案特定的引物,并通过PR扩增
6、,将其间的焦点卫星DNA序列扩增出来,结合聚丙烯酰胺凝胶电泳技能,就可以对这些多态性举行比力阐发。2.2SSR标识表记标帜的特点SSR技能接纳PR举行检测,所需DNA样品量少,仅需微量构造,且质量要求不高,纵然DNA部分落解,也能举行有用阐发断定。SSR呈共显性遗传,可区分杂合子和纯合子,且多态性富厚,每个位点均有很多等位情势,重复性好,效果不变可靠7。SSR技能既有RFLP技能的不变性和共显性的长处,又比RAPD标识表记标帜本钱低,技能简朴,是如今较受接待的分子标识表记标帜技能。3.SSR标识表记标帜技能在种子纯度断定中的应用由于SSR标识表记标帜以孟德尔方法遗传,呈共显性的特点,使用杂交种
7、亲本在某些SSR位点的差异,就可以将亲本与杂交种区分开。到如今为止,SSR技能已在多种农作物种子的品种纯度断定中得到应用。3.1SSR标识表记标帜技能在玉米种子纯度断定中的应用玉米是我国的重要农业作物,使用SSR技能举行玉米种子纯度断定,已经挑选出多对可使用的引物,综合运用SSR焦点引物和DNA指纹图谱,可以正确地断定父本、母本、稠浊品种及真实杂交种,其断定效果与RFLP效果及系谱泉源根本同等。有关的报道:李新海,袁力行等8使用SSR标识表记标帜研究了70份我国重要玉米自交系的遗传变异,用64对扩增带型不变的引物,从供试质料中测出248个等位基因变异,将70份自交系分别为6个类群,划群效果与系
8、谱阐发与育种家履历符合。番兴明,陈洪梅等9使用SSR标识表记标帜将我国温带玉米重要杂种上风群的4个尺度考试种和5个热带玉米25个典范自交系分别为4个类群,效果与系谱泉源根本同等。Sith等10报道了用131对SSR引物对58个玉米自交系的划群效果与RFLP效果根本雷同。3.2SSR标识表记标帜技能在水稻种子纯度断定中的应用对消费上大面积推广的水稻杂交种举行SSR纯度断定,并与田间纯度断定效果举行比力研究,效果表白,SSR断定的均匀纯度与田连续定效果无明显差异,杂种条带与怙恃本互补,能区分规复系和不育系。李稳香,詹良才11用SSR指纹图谱标识表记标帜对10个杂交水稻组合的子一代种子纯度举行断定,
9、并报酬掺杂与田间莳植验证。效果表白,有62对引物可以或许有用区分出110个杂交水稻组合及其亲本种子,报酬掺杂与田间莳植验证与SSR断定效果完全同等。谭智丹,余显权等12应用SSR技能断定了6个杂交水稻组合的种子纯度,效果挑选出10对多态性、特异性较好的引物,都可以区分杂交组合和怙恃本,此中两个引物全部杂交组合均表示怙恃本条带的完全互补型。彭锁堂,庄杰云等13对我国9个重要的杂交水稻组合及其亲本举行SSR标识表记标帜阐发,21对多态性引物共扩出62条条带,能有用区分全部规复系和大部分不育系,杂交种条带均为怙恃本的互补型。3.3SSR标识表记标帜技能在其他作物种子纯度断定中的应用SSR技能在种子纯
10、度断定中的应用非常普及,在小麦,大豆,棉花,西瓜,甜瓜等作物及蔬菜作物种子中都有报道。徐如宏,任明见等14接纳SSR技能对30个小麦品系举行研究,12对引物共检测到37个等位位点,可将30个小麦品系分为5类。关荣霞,刘燕等15使用SSR要领对4个大豆品种举行纯度断定,10个植株混适时,纵然有一个单株为杂合位点也能被检测出来,并创造用3-5对位于差异连锁群的SSR引物可以对随机或混淆样品举行快速、正确的纯度断定。刘勤红,王芙蓉等16使用SSR标识表记标帜技能断定鲁棉研15号杂交种纯度,挑选了217对SSR引物,得到了十几个足以区分该品种的怙恃本及其F1的标识表记标帜位点,可以快速、正确地举行鲁棉
11、研15号杂交种的纯度断定。艾呈祥,等在甜瓜,西瓜17杂交种纯度查验中使用SSR分子标识表记标帜技能研究杂种与其双亲之间扩增谱带的多态性,所试验的部分引物在某些自交系中扩增出两条带,杂交种条带均为怙恃本的互补型,很得当做杂交种纯度断定。沈金雄,陆光远等18使用SSR、显性形态标识表记标帜性状花叶及显性生化标识表记标帜种子芥酸含量断定甘蓝型油菜种子纯度,3种要领效果根本同等,一对SSR引物即可用于断定F1杂种纯度。SSR扩增产物具有很高的多态性和严酷的守旧性,不但可以用于油菜杂种纯度断定,也可以用于差异品种组合真实性区分。刘冠明,郑奕雄等19对南边花生主产区的20个品种举行了SSR标识表记标帜阐发
12、,从64对SSR引物中挑选出4对构建了20个花生品种指纹图谱,能将19个品种区分开。别的也有报道用SSR标识表记标帜举行豇豆、番茄、黄瓜、辣椒等蔬菜的品种断定。4.预测随着分子标识表记标帜技能的不竭生长和杂交新品种的不竭涌现,使用SSR技能举行品种纯度断定已成为一项紧张的本领。应用SSR分子标识表记标帜技能举行种子纯度断定,时间短,不受情况条件的影响,使用种子或幼苗就可以举行,可得到大量信息,形态区分难以区分的渺小差异,也可以正确快速地域分出。SSR分子标识表记标帜虽具有信息量大,效果不变可靠,重复性好等长处,但是由于这种要领必需知道重复序列两头的序列信息,依此确定引物序列。前期的挑选重复序列
13、和引物方案用度较高,使SSR技能的现实应用受到限定,一旦特异性好的引物确定,用度那么大大低落,操纵也轻便了。如今创造的SSR序列多为二核苷酸重复,并且比力少,难以满意各种检测和基因做图的要求,这就必要探究创造更多的SSR位点。随着人们不竭地研究探究,更多的SSR位点被标识表记标帜,可以或许从数据库中查询方案合成的SSR引物和其他作者颁发的SSR引物越来越多,开拓本钱渐渐低落,SSR标识表记标帜技能在种子纯度断定方面具有更辽阔的应用远景。参考文献:3.uKS,TanksleySD.Abundane,plyrphisandgenetiappingfirsatellitesinrie.lGenGen
14、et,1993,241:225235.6.朴红梅,王玉民等.简朴重复序列的研究与应用J吉林农业科学.2022,29(6):1115.7.罗玉娣,李开国.SSR标识表记标帜及其在蔬菜育种中的应用J.热带农业大学,2022,256:6871.8.李新海,袁力行,李晓辉等.使用SSR标识表记标帜分别70份我国玉米自交系的杂种上风群J.中国农业科学.2022,366:622627.9.番兴明,陈洪梅,谭静等.使用配协力和SSR标识表记标帜对热带和温带玉米自交系举行杂种上风群分别J.西南农业学报.2022,161:18.11.李稳香,詹良才.杂交水稻种子纯度SSR指纹图谱标识表记标帜断定技能研究J.中国种业.2022,3:2122.12.谭智丹,余显权,高健强等.使用SSR断定杂交水稻种子纯度的研究J.种子.2022,25(4):272913.彭锁堂,庄杰云,颜启传等.我国重要杂交水稻组合及其亲本SSR标识表记标帜和纯度断定J.中国水稻科学.2022,1701:15.14.徐如宏,任明见,杨英苍等.贵州省区试小麦品系遗传多样性的SSR标识表记标帜研究J.山地农业生物学报.2022,24(1):1216.15.关荣霞,刘燕,刘章雄等.使用SSR要领断定大豆品种纯度J.分子植物育种.2022,3:7578.16.
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