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文档简介
1、PAGE PAGE 9高中生物实验(shyn)复习实验名称实验材料及主要仪器、试剂实验步骤(复习时主要注意顺序)注意事项及相关问题的说明还原糖的鉴定苹果汁、梨汁等,试管、斐林试剂,水浴装置制备样液,配制斐林试剂混合水浴加热观察颜色变化(1)斐林试剂的使用方法(2)含糖量多不一定是还原糖(3)注意组织样液的颜色干扰脂肪的鉴定花生子叶等,苏丹或苏丹,试管或玻片、显微镜制备样液加苏丹观察,或作切片染色漂洗制片用显微镜观察不一定必需使用显微镜,若特别指出观察细胞内的脂肪,必需使用显微镜蛋白质的鉴定蛋清、豆浆等,试管、双缩脲试剂制备样液加双缩脲A液混匀加双缩脲B液混匀观察不需加热,反而加热会引起蛋白质变
2、性附着在试管壁上不易洗刷观察DNA和RNA的分布口腔上皮、洋葱鳞片叶内表皮等,甲基绿吡罗红染液,玻片、显微镜,盐酸,水浴装置载玻片上滴生理盐水放入口腔上皮细胞烘干放在8%的盐酸的小烧杯中30水浴保温蒸馏水冲洗吸水纸吸干加甲基绿吡罗红染液吸去多余染液加盖玻片,显微镜观察(1)盐酸的作用:改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;使染色体中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA和染色剂结合(2)注意生理盐水和口腔上皮细胞的放置顺序(3)注意甲基绿吡罗红试剂的使用方法(4)观察时,就找染色均匀、颜色较浅的部位观察叶绿体藓类叶、黑藻叶、菠菜叶,玻片,显微镜载玻片上滴清水放进叶片加盖玻片,观察使用藓类叶、黑藻
3、叶时,用的是整片叶,使用菠菜叶时,取带叶肉细胞的下表皮,目的是观察叶肉细胞观察线粒体口腔上皮细胞,健那绿染液载玻片上滴健那绿染液放进口腔上皮细胞加盖玻片,观察(1)健那绿染液是活体染色剂(2)不能用叶肉细胞作实验材料,因为有叶绿体,干扰观察研究膜透性的模拟实验漏斗,半透膜,烧杯,蔗糖溶液,清水,硫酸铜溶液漏斗口上密封半透膜烧杯中放清水,漏斗内装蔗糖溶液和几滴红墨水漏斗放入烧杯,观察液面高度和漏斗内外颜色变化;另一装置用硫酸铜溶液代替蔗糖溶液作对照(1)也可以用碘液和淀粉溶液分别放在烧杯和漏斗中观察(2)注意半透膜对不同分子的影响观察质壁分离和复原洋葱鳞片叶外表皮,蔗糖溶液,清水,玻片,显微镜(
4、1)载玻片上滴清水放洋葱鳞片叶外表皮加盖玻片,低倍镜观察(2)从盖玻片一侧滴加蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸,反复几次低倍镜观察(3)从盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸,反复几次显微镜观察(1)第2、3步的操作称为引流法,应在显微镜载物台上操作,不能取下(2)实验的三步观察都应使用低倍镜,目的是能看到更多的细胞探究酵母菌的呼吸方式酵母菌,葡萄糖溶液,锥形瓶、玻璃管,NaoH溶液、澄清石灰水、溴麝香草酚蓝水溶液、重铬酸钾溶液组装通气和密闭两套实验装置反应一段时间检测有无二氧化碳产生,检测有无酒精产生(1)密闭装置应先反应一段时间后再连接、反应、检测(2)通气装置可在NaOH锥形瓶后再连接一个澄清石
5、灰水锥形瓶,检测二氧化碳的吸收情况绿叶中色素的提取和分离菠菜叶、研砵、试管、烧杯、滤纸,无水乙醇、层析液,二氧化硅、碳酸钙(1)选取菠菜叶,剪碎加二氧化硅、碳酸钙、无水乙醇研磨过滤(2)剪滤纸条,划滤液细线放入层液中层析观察结果(1)本实验分两大步(提取和分离),需要特别注意,两步的原理要清楚(2)无水乙醇(或其它溶剂)与层析液的区分(3)注意各种试剂的作用,能描述由于试剂使用不当引起的结果(以水代替无水乙醇,提取液几乎无色;未加二氧化硅,提取液浅绿色;未加碳酸钙,提取液浅绿色或其它颜色,无叶绿素色素带或色浅、带细;滤液细线接触了层析液,不层析,层析液变绿)(4)能准确描述实验结果(出现四条色
6、素带,自上而下依次是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b)细胞大小与物质运输的关系含酚酞的琼脂,NaOH溶液将含酚酞的琼脂块切成不同大小的正方体放在NaOH溶液一段时间后取出,分析NaOH扩散的体积占整个琼脂块的比注意扩散速率与物质运输效率的区别:在不同的琼脂块中,NaOH的扩散速率相等,但运输效率与相对表面积成正相关(与体积成反相关)观察根尖细胞的有丝分裂洋葱,玻片、显微镜,15%的盐酸、95%的酒精,龙胆紫(或醋酸洋红)切取根尖在盐酸和酒清混合液中解离清水漂洗龙胆紫染色制片观察(1)酒精的作用是固定;(2)解离的目的是让细胞相互分离开;(3)制片的具体步骤是加上盖玻片后再加一片载玻片,轻压
7、后取下载玻片进行观察;(4)步骤不完整或时间控制不当的后果:解离时间短,不能均匀压成单层细胞,时间长,难从培养皿中取出;漂洗时间短或未漂洗,着色浅或未着色;染色时间短同漂洗时间长,染色时间长,其它区域也可着色现象(5)结果分析:看到的是死细胞,不同时期细胞数目与该时期长短成正比观察细胞的减数分裂蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,显微镜显微镜观察制作固定装片的实验材料最好用动物精巢,也可以用植物的花粉,不适合用雌性生殖器官,原因是其中的生殖细胞少且卵巢中的卵母细胞只到MII中期低温诱导染色体加倍洋葱,玻片,显微镜,冰箱,卡诺氏液,盐酸、酒精,改良苯酚品红染液4冰箱中培养36h卡诺氏液固定酒精漂洗盐酸
8、解离清水漂洗改良苯酚品红染液染色制片,观察(1)观察时先用低倍镜找到染色体形态较好的分裂相,视野中既有正常的二倍体细胞,又有染色体加倍的细胞,用高倍镜观察染色体加倍的细胞(2)可设计在常温条件培养的对照实验调查常见的人类遗传病调查遗传方式,在患者家系中调查;调查发病率,应在人群中随机调查,应选择发病率较高,容易区分的遗传病。为了保证调查的群体足够大,小组调查的数据应在班级和年级中汇总。探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用常见植物生长旺盛的一年生枝条,蒸馏水、生长素类似物预实验:设置浓度梯度较大的一系列的生长素类似物溶液,测出最适浓度的大致范围在预实验基础上设置浓度梯度的一系列生长素类似物溶液
9、,测出最适浓度实验结果只能反映某一种生长素类似物对某种特定植物的作用的最适浓度,不能代表所有的植物和所有的生长素类似物或生长素,也不能代表该类似物对该植物的其它作用。模拟尿糖的测定原理:葡萄糖试纸是一种酶试纸,由葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶和某种无色的化合物固定于滤纸上制成。当尿液滴加到酶试纸上时,尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在酶的催化作用下形成水和原子氧,原子氧可以将试纸上无色的化合物氧化成有色化合物,使试纸呈现特定的颜色,再与标准比色卡比对,即可知道尿样中葡萄糖的含量。探究培养液中酵母菌数量的动态变化酵母菌、无菌马铃薯培养液或肉汤培养液,试管、血球计
10、数板、显微镜培养酵母菌定期(每天一次)取样计数统计、分析观察计数的过程:加盖玻片在盖玻片边缘加培养液让培养液处行渗入用滤纸吸去多余培养液待细胞沉降后观察计数。(1)对培养液中的酵母菌计数采用抽样检测的方法;取出的样品用血球计数板计数(2)计数方法:计数一个小方格内的酵母菌数量计算盖玻片下0.1mm内的酵母菌数量计算10mL培养液中的酵母菌数量(3)取样前,要对试管震荡;若酵母菌数量太多,需要稀释;每次取样时要进行重复实验土壤中动物类群丰富度的研究取样器,诱虫器,吸虫器取样采集小动物观察和分类丰富度的调查常用的方法有记名计数法和目测估计法(1)取样时要拨去表层落叶(2)利用避光、避热的特点,采集
11、到的小动物如果用于培养,试管中应放湿棉球,如果用于制作标本,试管中放酒精(3)简易采集法是用解剖针拨找小动物,同时用放大镜观察,较大的小动物用包着纱布的镊子取出,较小的用吸虫器采集。吸虫器吸一玻璃管在试管内的一端用纱布包裹(4)观察动物时,最好用实体镜。若用普通显微镜,可在4倍物镜和5倍目镜下观察。探究水族箱中群落的演替实验原理:在有限的空间内,依据生态系统原理,将生态系统具有的基本成分进行组织,构建一个人工微生态系统是可能的。但同时,这个人工生态系统的稳定性是有条件的,也可能是短暂的,它会发生群落的演替。实验过程:制作一个生态缸,放在室内温度和光照适宜的地方,每天观察一次生物种类和数量的变化
12、,并做好记录。DNA的粗提取和鉴定鸡血、洋葱等,2mol/L NaCl溶液,洗涤剂、食盐,95%酒精,二苯胺,水浴装置鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,过滤,收集滤液在滤液中加入NaCl溶液,使其浓度为2mol/L过滤,收集滤液向滤液中加水,使NaCl溶液浓度为0.14mol/L过滤,取沉淀物向沉淀物中加2mol/L NaCl溶液,使DNA溶解加95%冷酒精,使DNA析出用玻璃棒取出放在2mol/L NaCl溶液中,加二苯胺,水浴加热,观察颜色变化(1)这个过程中教材中的第一种方案,原理是DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同(注意曲线)以及DNA和蛋白质在酒精中的溶解度不同,DNA在酒精中溶解度
13、低,低温下溶角度更低。(2)若采用方案二和方案三,在第一次过滤后实施,方案二的原理是酶具有专一性,方案三的原理是在6075条件下蛋白质发生变性,而DNA不会。方案二和三最后也需要用冷酒精进行提取。说明(shumng):(1)关于酶的两个实验表中未列出,复习(fx)时要作为重点内容,不但要注意实验过程和操作步骤,更需要注意实验中变量的控制,包括自变量控制和无关变量控制,以及不同实验(shyn)中因变量的观察方法。(2)黑体字的三个实验是我们用的人教版教材中没有的,但考纲有要求,可以作为参考,理解其实验原理及基本步骤。生物实验中颜色反应的总结1.斐林试剂检测可溶性还原糖原理(yunl):还原糖+菲
14、林试剂砖红色(hngs)沉淀注意:菲林试剂的甲液和乙液要混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件是需要(xyo)加热。应用:检验和检测某糖是否还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。2.苏丹、苏丹检测脂肪原理:苏丹+脂肪橘黄色;苏丹+脂肪红色注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察。应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪。3.双缩脲试剂检测蛋白质原理:蛋白质+双缩脲试剂紫色注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件不需要加热。应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。4.碘液检测淀粉和观察动植物细胞的基本结构的染色剂原理:淀粉+碘液蓝色;碘液
15、能使动植物细胞着色。注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘。应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉;验证光合作用产生淀粉;在观察动植物细胞基本结构细胞膜、细胞质、细胞核时用碘液做染色剂,使细胞核染上颜色便于观察。5.DNA的染色与鉴定染色原理:DNA+甲基绿绿色应用:可以显示DNA在细胞中的分布鉴定原理:DNA+二苯胺蓝色应用:用于DNA粗提实验的鉴定试剂6.吡罗红使RNA呈现红色原理:RNA+吡罗红红色应用:可以显示RNA在细胞中的分布。7. 台盼蓝使死细胞染成蓝色原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可
16、被台盼蓝染成蓝色。应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。8.线粒体的染色(rns)原理(yunl):健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。应用:可以(ky)用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。9.酒精的检测原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色。应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。10.CO2的检测原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2
17、的产生情况。11.染色体(或染色质)的染色原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液、醋酸洋红溶液、改良苯酚品红染液)染成深色。应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂;观察低温诱导植物细胞染色体数目变化;植物花药离体培养时,可以通过染色镜检来确定其中的花粉是否处于适宜离体培养的发育期。12.吲哚酚试剂与维C溶液呈褪色反应原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维C具有还原性,能将其褪色。维生素C溶液在中性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成无色,在酸性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成粉红色。也可以用氯化铁溶液代替吲哚酚试剂,维生素C溶液可把黄色的氯化铁溶液还原成无色的氯化亚铁溶液。应用:可用于检
18、测食品营养成分中是否含有维生素C。13.亚硝酸盐的检测出现玫瑰红原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。应用:将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。14.脲酶的检测原理:细菌合成的脲酶可以将尿分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红。应用:在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。15.伊红美蓝检测(jin c)大肠杆菌原理:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物(chnw)(有机酸)与伊红
19、美蓝结合使菌落呈深紫色。应用:用滤膜法测定水中大肠杆菌(d chn n jn)的含量。16.刚果红检测纤维素分解菌原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。应用:筛选纤维素分解菌。17.植物花粉细胞核的染色原理:在做月季的花药离体培养实验时,选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素,一般在单核靠边期花药培养成功率最高。选择花药
20、时,一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的最常用的方法有醋酸洋红法(花粉细胞核内有染色体,染色体主要由DNA和蛋白质组成,醋酸洋红为碱性染色剂,染色体易被碱性染料染色。通过染色,可以确定细胞核为单核期,还是双核期,还可以确定其花粉的发育是单核居中期还是单核靠边期)。但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。应用:月季花药离体培养时,通过染色镜检确定花粉是否处于适宜的发育期。不同浓度的酒精及盐酸在高中生物实验中的应用使用酒精的实验浓度作用原理脂肪的鉴定50%洗去浮色苏丹是弱酸性染料,易溶于体积分数为50%酒精土壤中动
21、物类群丰富度的研究70%防腐剂酒精在体积分数为70%时,对于细菌有强烈的杀伤作用,可以作防腐剂微生物的培养、组织培养、果酒和果醋的制作消毒体积分数为70%的酒精,能够顺利地渗入到细菌体内,吸收细菌蛋白的水分,使其脱水变性凝固而失去功能观察植物细胞的有丝分裂95%解离时固定细胞分裂相用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精11混合,使细胞的原生质凝固,不发生变化,固定细胞分裂相,以尽可能保持原来的结构供观察低温诱导染色体加倍洗去多余的试剂卡诺氏液可溶于体积分数为95%的酒精中DNA的粗提取与鉴定提取含杂质较少的DNADNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质(
22、蛋白质等)可以溶解于酒精。 生物组织中还原糖的鉴定、比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率等需要加热的实验燃烧加热酒精是富含能量的有机物,燃烧能释放大量的热量叶绿体中色素的提取与分离100%无水酒精提取色素色素是有机物,能溶解在有机溶剂中,各色素在无水酒精中的溶解度较大,且酒精无毒,方便操作(一)体积分数为50%的酒精 1.1 作用(zuyng):洗去浮色。 1.2 原理(yunl):苏丹是弱酸性染料,易溶于体积(tj)分数为50%酒精。 1.3 应用:脂肪的鉴定实验。在该实验中,用苏丹对花生子叶薄片染色后,在薄片上滴12滴体积分数为50%的酒精溶液,可以洗去被染玻片标本上的苏丹染液浮色。 (二)
23、体积分数为95%的酒精 2.1 作用: 解离; 析出提取含杂质较少的DNA。 2.2 原理: 解离原理:用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精11混合,能使组织中的细胞相互分离开来; 析出提取含杂质较少的DNA的原理:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精。 2.3 应用 观察植物细胞的有丝分裂; DNA的粗提取与鉴定。 (三)体积分数为75%的酒精 3.1 作用:消毒杀菌。 3.2 原理: 体积分数为75%的酒精,能够顺利地渗入到细菌体内,吸收细菌蛋白的水分,使其脱水变性凝固而失去功能,以达到消毒杀菌的目的。高于体积分数为75%浓度的酒精与细菌接触时,就可能使得菌体表面迅速凝固,形成一层薄膜,阻止了酒精继续向菌体内部渗透,待到适当时机,薄膜内的细胞可能将薄膜冲破而重新复活。在此高浓度下,酒精迅速凝固蛋白质的作用往往随着其浓度升高而增强,因此,其消毒杀菌的效果也就越差。若酒精的浓度低于75,也因不
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