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文档简介
1、第四章 茶产品特定成分检验茶叶特定成分概述茶产品特定成分检验.教学目的和要求了解茶产品特定成分检验的含义、作用 了解茶产品特定成分检验的普通内容、原理掌握茶产品特定成分检验的根据方法 .第一节 茶产品特定成分概述茶作为一种特殊的食品,广受消费者的欢迎。茶叶曾经成为世界性饮品,目前全世界有30多亿人饮茶。茶叶的品饮是人们任务、生活的重要组成部分。茶叶的质量平安直接或间接与人们的生活质量亲密相关。消费者从单纯追求茶叶产品的品味、营养开展到关注食品的质量平安和对身体的调理功能,从解渴功能类食品开展到天然、营养、以及有益于安康的质量平安型食品。.茶叶区别于其他食品的主要缘由是其特有的化学成分。茶产品特
2、定成分检验是对茶主要的化学成分进展的检验,主要有水分检验,灰分检验,水浸出物检验,茶多酚检验,咖啡碱检验,其他茶普通成分检验茶红素、茶黄素、粗纤维、茶味道 等。.茶产品特定成分检验的意义和作用茶产品特定成分是其区别于其他食品的重要标志,是衡量茶产质量量的重要根据;提高茶产质量量,可以推进消费的开展;茶产质量量是进入市场的通行证;茶产质量量是茶产业生存、开展的根底;茶产质量量是消费者生活安康的重要保证 。.茶产品检验的类别出厂检验:每批产品均应做出厂检验,经检验合格签发合格证后,方可出厂。检验工程普通为:感官质量、碎茶和粉末、水分、总灰分、净含量等;型式检验:产质量量规范中的检验工程都进展检验。
3、检验周期每年2次。有以下情况时,应进展型式检验:如原料有较大改动,能够影响产质量量时;停产半年以上恢复消费时;国家法定质量监视机构提出型式检验要求时。茶学研讨检验.第二节 特定化学成分检验一、水分检验水分:在常压条件下,试样经规定的温度加热至恒重时的质量损失。检验方法根据:水分测定方法较多,检验时根据各类茶产品水分检验规范,在此以GB/T8304-2021为例。测定原理:试样于1032 的电热恒温枯燥箱中加热至恒重,称重,并计算试样损失的质量即为水分。.仪器及器具样品容器:清洁、枯燥、避光、密闭的玻璃或不与样品发生反响的的资料制成;大小以能装满磨碎样为宜铝质或玻璃质烘皿:具盖,内径75mm80
4、mm电热鼓风恒温枯燥箱:温控1032 枯燥器:内盛有效枯燥剂分析天平:感量0.001g.操作方法取样:按GB/T 8302的规定取样。试样制备:按GB/T 8303的规定制备样茶。烘皿的预备:将干净的烘皿连同盖置于 1032 的枯燥箱内皿盖翻开斜至皿边,加热1h,加盖取出,于枯燥器内冷却至室温。称量准确至0.001g 。.测定仲裁法 1032 恒重法:称取5g准确至0.001g 试样于知质量的烘皿中,置于1032 枯燥箱内皿盖翻开斜至皿边。加热4h,加盖取出,于枯燥器内冷却至室温,称量。再置于枯燥箱内加热1h,加盖取出,于枯燥器内冷却,称量准确至0.001g 。反复加热1h的操作,直至延续两次
5、称量差不超越0.005g,即为恒重,以最小称量为准。快速法120 烘干法:称取5g准确至0.001g 试样于知质量的烘皿中,置于120枯燥箱内皿盖翻开斜至皿边。以2min内上升到120 时计算 ,加热1h,加盖取出,于枯燥器内冷却至室温,称量准确至0.001g 。.结果计算:茶叶水分含量以质量分数%表示 假设符合反复性要求,取两次测定的算术平均值作为结果保管小数点后1位。反复性:在反复条件下同一样品获得的测定结果的绝对差值不得超越算术平均值的5%。 注:用第二法测定茶叶水分,反复性达不到要求时,按第一法规定进展测定。.二、水浸出物检验水浸出物:在规定条件下,用沸水浸出茶叶中的水可溶性物质。检验
6、方法根据:GB/T 8305-2021测定原理:用沸水回流提取茶叶中的水可溶性物质,再经过滤、冲洗、枯燥、称量浸提后的茶渣,计算水浸出物含量。.仪器及器具电热鼓风恒温枯燥箱:温控1202 沸水浴布氏漏斗连同减压抽滤安装铝质或玻璃质烘皿:具盖,内径75mm80mm枯燥器:内盛有效枯燥剂分析天平:感量0.001g锥形瓶:500mL磨碎机:由不吸收水分的资料制成;死角尽能够小,易于清扫;内装孔径为3mm的筛子。.操作方法取样:按GB/T 8302的规定取样。试样制备:先用磨碎机将少量试样磨碎,弃去,在磨碎其他部分。烘皿预备:将干净的烘皿连同15cm定性快速滤纸置于 1202 的恒温枯燥箱内,皿盖翻开
7、斜至皿边,烘干1h,加盖取出,在枯燥器内冷却至室温。称量准确至0.001g 。.测定步骤:称取2g准确至0.001g 磨碎试样于500mL锥形瓶中,加沸蒸馏水300mL,立刻移入沸水浴中浸提45min每隔10min摇动一次。浸提终了后立刻趁热减压过滤用途置过的滤纸。用约150mL沸蒸馏水洗涤茶渣数次,将茶渣连同知质量的滤纸移入烘皿内,然后移入1202 的恒温枯燥箱内,皿盖翻开斜至皿边,烘干1h,加盖取出,冷却1h后再烘1h,立刻移入枯燥器内冷却至室温,称量准确至0.001g 。.结果计算计算方法:茶叶中水浸出物含量以干态质量分数%表示: 假设符合反复性要求,取两次测定的算术平均值作为结果,结果
8、保管小数点后1位。反复性:在反复条件下同一样品获得的测定结果的绝对差值不得超越算术平均值的2%。.三、总灰分检验总灰分:在规定条件下,茶叶经525 25 灼烧灰化后所得的残渣。检验方法根据:GB/T 8306-2021测定原理:试样经525 25 加热灼烧,分解有机物至恒重。.仪器及器具坩埚:铂金、瓷质或者其他不会被测定条件影响的材质。高型、容量30mL。电热板。高温电炉:能温控525 25 。枯燥器:内盛有效枯燥剂。坩埚钳。分析天平:感量0.001g。.操作方法取样:按GB/T 8302的规定。试样制备:按GB/T 8303的规定。坩埚的预备:将干净的坩埚置于 525 25 高温电炉内,灼烧
9、1h,待炉温降至300 左右时 取出坩埚,于枯燥器内冷却至室温,称量准确至0.001g 。.测定方法:称取混匀的磨碎试样2g准确至0.001g 于坩埚内,在电热板上徐徐加热,使试样充分炭化至无烟,将坩埚移入52525 高温电炉内,灼烧至无炭粒不少于2h,待炉温降至300 左右时,取出坩埚,置于枯燥器内冷却至室温,称量。再移入高温电炉内以52525 温度灼烧1h,取出,冷却,称量。再移入高温电炉内,灼烧30min,取出,冷却,称量。反复此操作,直至延续两次称量差不超越0.001g 为止。以最小称量为准。其他:必要时,可保管总会分供水溶性灰分和水不溶性灰分的测定。.结果计算计算方法:茶叶总灰分含量
10、以干态质量分数%表示: 假设反复性符合要求,取两次测定的算术平均值作为结果保管小数点后1位。反复性:在反复条件下同一样品获得的测定结果的绝对差值不得超越算术平均值的5%。.四、水溶性灰分和水不溶性灰分检验水溶性灰分:在规定条件下,总灰分中溶于水的部分。水不溶性灰分:在规定条件下,总灰分中不溶于水的部分。检验方法根据:GB 5009.4-2021替代原GB/T 8307-2021 茶 水溶性灰分和水不溶性灰分测定、GB/T 8308-2021 茶 酸不溶性灰分测定。测定原理:用热水提取总灰分,经无灰滤纸过滤、灼烧、称量残留物,测得水不溶性灰分,由总灰分和水不溶性灰分的质量之差计算水溶性灰分。.仪
11、器及器具高温炉:最高温度950。分析天平:感量分别为0.1mg、1mg、0.1g。石英坩埚或瓷坩埚。枯燥器(内有枯燥剂)。无灰滤纸。漏斗。外表皿:直径6cm。烧杯(高型):容量100mL。恒温水浴锅:控温精度2。.操作方法坩埚预处置:取大小适宜的石英坩埚或瓷坩埚置高温炉中,在55025下灼烧30min,冷却至200左右,取出,放入枯燥器中冷却30min,准确称量。反复灼烧至前后两次称量相差不超越0.5mg为恒重。称样:灰分大于或等于10g/100g的试样称取2g3g(准确至0.0001g);灰分小于或等于10g/100g的试样称取3g10g(准确至0.0001g,对于灰分含量更低的样品可适当添
12、加称样量)。.总灰分制备:按GB/T 8306的规定。测定方法:用约25mL热蒸馏水分次将总灰分从坩埚中洗入100mL烧杯中,盖上外表皿,用小火加热至微沸,防止溶液溅出。趁热用无灰滤纸过滤,并用热蒸馏水分次洗涤杯中残渣,直至滤液和洗涤体积约达150mL为止,将滤纸连同残渣移入原坩埚内,放在沸水浴锅上小心地蒸去水分,然后将坩埚烘干并移入高温炉内,以55025灼烧至无炭粒(普通需1h)。待炉温降至200时,放入枯燥器内,冷却至室温,称重(准确至0.0001g)。再放入高温炉内,以55025灼烧30min,如前冷却并称重。如此反复操作,直至延续两次称重之差不超越0.5mg为止,记下最低质量。.结果计
13、算计算方法:以试样质量计水不溶性灰分的含量 X1=m1-m2/m3-m2100 式中: X1水不溶性灰分的含量,单位为克每百克(g/100g); m1坩埚和水不溶性灰分的质量,单位为克(g); m2坩埚的质量,单位为克(g); m3坩埚和试样的质量,单位为克(g); 100单位换算系数。.水溶性灰分的含量,按式(6)计算: X2 =m4 -m5/m0100 式中: X2水溶性灰分的质量,单位为克(g/100g); m0 试样的质量,单位为克(g); m4总灰分的质量,单位为克(g); m5 水不溶性灰分的质量,单位为克(g);.以干物质计水不溶性灰分的含量: X1 =m1 -m2/ (m3 -
14、m2)100 式中: X1水不溶性灰分的含量,单位为克每百克(g/100g); m1坩埚和水不溶性灰分的质量,单位为克(g); m2坩埚的质量,单位为克(g); m3坩埚和试样的质量,单位为克(g); 试样干物质含量(质量分数),%; 100单位换算系数。.水溶性灰分的含量: X2 =m4 -m5/m0 100 式中: X2 水溶性灰分的质量,单位为克(g/100g); m0 试样的质量,单位为克(g); m4 总灰分的质量,单位为克(g); m5 水不溶性灰分的质量,单位为克(g); 试样干物质含量(质量分数),%; 100单位换算系数。 试样中灰分含量10g/100g时,保管三位有效数字;
15、试样中灰分含量10g/100g时,保管两位有效数字。精细度反复性:在反复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超越算术平均值的5%。.五、酸不溶性灰分检验酸不溶性灰分:在规定条件下,总灰分经盐酸处置后的残留部分。检验方法根据:GB 5009.4-2021替代原GB/T 8307-2021 茶 水溶性灰分和水不溶性灰分测定、GB/T 8308-2021 茶 酸不溶性灰分测定。测定原理:用盐酸溶液处置总灰分,过滤、灼烧、称量残留物。.仪器及器具高温炉:最高温度950。分析天平:感量分别为0.1mg、1mg、0.1g。石英坩埚或瓷坩埚。枯燥器(内有枯燥剂)。无灰滤纸。漏斗。外表皿:直径6cm。
16、烧杯(高型):容量100mL。恒温水浴锅:控温精度2。.操作方法坩埚处置:见前称样:见前总灰分处置:见前.测定方法 用25mL10%盐酸溶液将总灰分分次洗入100mL烧杯中,盖上外表皿,在沸水浴上小心加热,至溶液由浑浊变为透明时,继续加热5min,趁热用无灰滤纸过滤,用沸蒸馏水少量反复洗涤烧杯和滤纸上的残留物,直至中性(约150mL)。将滤纸连同残渣移入原坩埚内,在沸水浴上小心蒸去水分,移入高温炉内,以55025灼烧至无炭粒(普通需1h)。待炉温降至200时,取出坩埚,放入枯燥器内,冷却至室温,称重(准确至0.0001g)。再放入高温炉内,以550 25 灼烧30min,如前冷却并称重。如此反
17、复操作,直至延续两次称重之差不超越0.5mg为止,记下最低质量。.结果计算以试样质量计:酸不溶性灰分的含量: X1 =m1 -m2/m3 -m2100 式中: X1 酸不溶性灰分的含量,单位为克每百克(g/100g); m1 坩埚和酸不溶性灰分的质量,单位为克(g); m2坩埚的质量,单位为克(g); m3 坩埚和试样的质量,单位为克(g); 100单位换算系数。.以干物质计:酸不溶性灰分的含量: X1 =m1-m2/(m3 -m2)100 式中: X1酸不溶性灰分的含量,单位为克每百克(g/100g); m1坩埚和酸不溶性灰分的质量,单位为克(g); m2坩埚的质量,单位为克(g); m3坩
18、埚和试样的质量,单位为克(g); 试样干物质含量(质量分数),%; 100单位换算系数。 试样中灰分含量10g/100g时,保管三位有效数字;试样中灰分含量10g/100g时,保管两位有效数字。精细度反复性:在反复性条件下同一样品获得的测定结果的绝对差值不得超越算术平均值的5%。.六、水溶性灰分碱度检验水溶性灰分碱度:中和水溶性灰分浸出液所需求酸的量,或相当于该酸量的碱量。检验方法根据:GB/T 8309-2021。测定原理:用甲基橙作指示剂,以盐酸规范溶液滴定来自水溶性灰分的溶液。.仪器及器具滴定管:容量50mL。三角烧瓶:250ml。试剂和溶液盐酸:0.1mol/L规范溶液,按GB/T 6
19、01配置与标定。甲基橙指示剂:甲基橙0.5g,用热蒸馏水溶解后稀释至1L。.操作方法取样:按GB/T 8302的规定。试样制备:按GB/T 8303的规定。水溶性灰分溶液的制备:按GB 5009.4的规定。测定:将水溶性灰分溶液冷却后,加甲基橙指示剂2滴,用0.1mol/L盐酸溶液滴定。运用两次测定水溶性灰分和水不溶性灰分的滤液,平行测定两次。.结果计算计算方法:碱度的表示,即中和100g干态磨碎样品所需的一定浓度盐酸的物质的量,或换算为相当于干态磨碎样品中所含氢氧化钾的质量分数。碱度用100g干态磨碎样品所需盐酸物质的量mol/100g表示 式中: V滴定时耗费0.1mol/L盐酸规范溶液的
20、体积,单位为毫升mL; m0试样的质量,单位为克g; w 试样干物质含量质量分数,%。 注:假设运用盐酸规范溶液的浓度未准确到所要求的浓度,那么计算时用校正系数滴定浓度/0.1。 .碱度用氢氧化钾的质量分数%表示 水溶性灰分碱度=56V/(10*1000*m0*w)*100% 式中: V、m0、w与上一样; 56氢氧化钾的摩尔质量,单位为克每摩尔g/mol。 假设符合反复性的要求,那么取两次测定的算术平均值作为结果保管小数点后1位。反复性:在反复条件下同一样品获得的两次测定结果的绝对差值不得超越算术平均值的10%。.七、粗纤维检验粗纤维:植物细胞壁的主要组成成分,包括纤维素、半纤维素、木质素及
21、角质等成分。检验方法根据:GB/T 8310-2021。测定原理:用一定浓度的酸、碱消化处置试样,残留物再经灰化、称量。由灰化时的质量损失计算粗纤维含量。.仪器及器具:分析天平:感量0.001g。尼龙布:孔径50m相当于300目。玻璃质砂芯坩埚:微孔平均直径80m160m,体积30mL。高温电炉: 525 25 。电热鼓风枯燥箱:温控120 2 。枯燥器:内盛有效枯燥剂。.试剂和溶液除非另有阐明,所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水。1.25%硫酸溶液:汲取6.9mL浓硫酸密度为1.84g/mL,质量分数为98.3%,渐渐参与少量水中,冷却后,定容至1L,摇匀。1.25%氢氧化钠溶液。1%盐酸溶液体
22、积分数:取10mL浓盐酸密度1.18g/mL,质量分数37.5%,加水定容至1L。摇匀。乙醇95%。丙酮.操作方法:取样:按GB/T 8302的规定。试样制备:按GB/T 8303的规定。.测定:酸消化:称取试样约2.5g准确至0.001g于400mL于烧杯中,参与约100的1.25%硫酸溶液200mL,放在电炉上加热在1min内煮沸。准确微沸30min,并随时补加热水,以坚持原溶液的体积。移去热源,将酸消化液倒入内铺50m尼龙布的布氏漏斗中,渐渐抽气减压过滤,并用每次50mL沸蒸馏水洗涤残渣,直至中性,10min内完成。.碱消化:用约100的1.25%氢氧化钠200mL,将将尼龙布上的残渣全
23、部洗入原烧杯中,放在电炉上加热在1min内煮沸。准确微沸30min,并随时补加热水,以坚持原溶液的体积。将碱消化液连同残渣倒入衔接抽滤瓶的玻质砂芯坩埚中,渐渐抽气减压过滤,用50mL左右沸蒸馏水洗涤残渣,再用1%盐酸洗涤一次,然后用沸蒸馏水洗涤数次,直至中性,最后用乙醇洗涤二次,丙酮洗涤三次并抽滤至干,除去溶剂。.枯燥:将上述坩埚及残留物移入枯燥箱中,120烘4h,放在枯燥器中冷却,称量准确至0.001g。灰化:将已称量的坩埚,置于高温炉中, 525 25 灰化2h,待炉温降至300 左右时,取出坩埚,于枯燥器中冷却,称量准确至0.001g。.结果计算计算方法:茶叶中粗纤维含量以干态质量分数%
24、表示: 式中: m0试样的质量,单位为克g; m1灰化前坩埚及残留物的质量,单位为克g; m2灰化后坩埚、灰分的质量,单位为克g; w试样干物质含量质量分数,%。 假设符合反复性的要求,取两次测定的算术平均值作为结果保管小数点后2位。反复性:在反复条件下同一样品获得的两次测定结果的绝对差值不得超越算术平均值的5%。.八、咖啡碱检验咖啡碱:一种黄嘌呤生物碱化合物,是一种中枢神经兴奋剂,可以暂时的驱走睡意并恢复精神。检验方法根据:GB/T 8312-2021。测定原理:高效液相色谱法:茶叶中咖啡碱经沸水和氧化镁混合提取后,经高效液相色谱仪、C18分别柱、紫外检测器检测,与规范系列比较定量。紫外分光
25、光度法:茶叶中的咖啡碱易溶于水,除去干扰物质后,用特定波长测定其含量。.高效液相色谱法仪器及器具高效液相色谱仪:具有紫外检测器。分析柱: C18ODS柱反相色谱柱。分析天平:感量0.0001g。.试剂和溶液除非另有阐明,所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水。氧化镁:重质,分析纯。甲醇:色谱纯。高效液相色谱流动相:取600mL甲醇倒入1400mL蒸馏水,混匀,过0.45m膜。咖啡碱规范液:称取125mg咖啡碱纯度不低于99%加乙醇:水1:4溶解,定容至250mL,摇匀,规范贮藏液1mL中相当于含0.5mg咖啡碱。汲取1.0mL、2.0mL、5.0、10.0mL上述规范贮藏液,分别加水定容至50mL作为
26、系列规范任务液,每1mL该系列规范任务液中,分别相当于含10g、20g、50g、100g咖啡碱。.操作方法取样:按GB/T 8302的规定。试样制备:按GB/T 8303的规定。测定:试液预备:称取1.0g准确至0.001g磨碎试样或0.5g固态速溶茶准确至0.001g,置于500mL烧瓶中,加4.5g氧化镁及300mL沸水,于沸水浴中加热,浸提20min每隔5min摇动一次,浸提终了后立刻趁热减压过滤,滤液移入500mL容量瓶中,冷却后,用水定容至刻度,混匀。取一部分试液,经过0.45m滤膜过滤,待测。.色谱条件: 检测波长紫外检测器,波长280nm; 流动相; 流速:0.5mL/min1.
27、5mL/min; 柱温:40; 进样量:10LL。测定:准确汲取制备液10L20L,注入高效液相色谱仪,并用咖啡碱系列规范任务液制造规范曲线,进展色谱测定。.结果计算计算方法:比较试样和规范样的峰面积进展定量,茶叶中咖啡碱含量以干态质量分数%表示: 式中: C1根据规范曲线上计算得出的测定液中咖啡碱浓度,单位为微克每毫升g/mL; V1样品总体积,单位为毫升mL; m试样的质量,单位为克g; w试样干物质含量质量分数,% 假设符合反复性的要求,取两次测定的算术平均值作为结果,结果保管小数点后1位。反复性:在反复条件下同一样品获得的测定结果的绝对差值不得超越算术平均值的10%。.紫外分光光度法仪
28、器和器具紫外分光光度仪分析天平:感量0.001g。试剂和溶液除非另有阐明,所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水。碱式乙酸铅溶液:称取50g碱式乙酸铅,加水100mL,静置过夜,倾出上清液过滤。0.01mol/L盐酸溶液:取0.9mL浓盐酸,用水稀释至1L,摇匀。4.5 mol/L硫酸溶液:取250mL浓盐酸,用水稀释至1L,摇匀。咖啡碱规范液:称取100mg咖啡碱纯度不低于99%溶于100mL水中,作为母液。准确汲取5mL,加水至100mL作为任务液1mL含咖啡碱0.05mg。.操作方法试液预备:称取3g准确至0.001g磨碎试样于500mL锥形瓶中,加沸蒸馏水450mL,立刻移入沸水浴中,浸提45
29、min每隔10min摇动一次,浸提终了后立刻趁热减压过滤,残渣用少量热蒸馏水洗涤23次。将滤液转入500mL容量瓶中,冷却后用水定容至刻度,摇匀。.测定:用移液管准确汲取10mL试液至100mL容量瓶中,参与4mL0.01mol/L盐酸和1mL碱式乙酸铅溶液,用水定容至刻度,混匀,静置廓清过滤。准确汲取滤液25mL,注入50mL容量瓶中参与0.1mL4.5mol/L硫酸溶液,加水稀释至刻度,摇匀,静置廓清过滤。用10min石英比色杯,在波长274nm处以试剂空白溶液作参比,测定吸光度A。.咖啡碱规范曲线的制造:分别汲取0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.
30、0mL咖啡碱任务液于一组25mL容量瓶中,各参与1.0mL盐酸,用水稀释至刻度,混匀,用10min石英比色杯,在波长274nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度A。将测得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制规范曲线。.结果计算计算方法:茶叶中咖啡碱含量以干态质量分数%表示 式中: C2根据试样测得的吸光度A,从咖啡碱规范曲线上查的的咖啡碱相应含量,单位为毫克每毫升mg/mL; V2试液总量,单位为毫升mL; m试样用量,单位为克g; w试样干物质含量质量分数,%。 假设符合反复性的要求,取两次测定的算术平均值作为结果,结果保管小数点后1位。反复性:在反复条件下同一样品获得的测定结果的绝对差值不得超
31、越算术平均值的10%。.九、茶多酚和儿茶素类检验茶多酚:茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花样苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。主要为黄烷醇儿茶素类,儿茶素占6080%。 研讨阐明,茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用,能有效地阻止放射性物质侵入骨髓,并可使锶90和钴60迅速排出体外,被安康及医学界誉为“辐射克星。儿茶素:又称儿茶精,茶单宁。为黄烷醇的衍生物,分子式C15H14O6。儿茶素最初由儿茶中提取出。为无色结晶形固体;能溶于水;其水溶液受热或在无机酸存在下,容易聚合成无定形鞣质。和咖啡因同属茶叶中的两大重要机能性成分,但是又以儿茶素为茶汤中最主要的成分。儿茶素可以经过血液循环进入全身
32、,加强新陈代谢,加强脂肪的氧化和能量耗费从而到达抑制肥胖的作用,尤其是对内脏脂肪的抑制造用,能到达理想的减肥效果。.检验方法根据:GB/T 8313-2021。测定原理茶多酚:茶叶磨碎样中的茶多酚用70%的甲醇在70水浴上提取,福林酚试剂氧化茶多酚中-OH基团并显蓝色,最大吸收波长为765nm,用没食子酸做校正规范定量茶多酚。儿茶素类:茶叶磨碎样中的儿茶素用70%的甲醇在70水浴上提取,儿茶素类的测定用C18柱、检测波长278nm、梯度洗脱、HPLC分析,用儿茶素类规范物质外标法直接定量,也可用儿茶素类与咖啡碱的相对校正因子RRFStdISO国际环试结果来定量。.茶叶中儿茶素类的检测HPLC法
33、仪器及器具分析天平:感量0.0001g。水浴:701 。离心机:转速3500r/min。混匀器。高效液相色谱仪HPLC:包含梯度洗脱及检测器检测波长278nm。数据处置系统。液相色谱柱:C18粒径5m,250mm*4.6mm。.试剂所用水均为重蒸馏水,除特殊规定外,所用试剂为分析纯。乙腈:色谱纯。甲醇。乙酸。甲醇水溶液体积比:7+3.乙二胺四乙酸EDTA溶液:10mg/mL现配。抗坏血酸溶液:10mg/mL现配。.稳定溶液:分别将25mLEDTA溶液、25mL抗坏血酸溶液、50mL乙腈参与500mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。液相色谱流动相:流动相A:分别将90mL乙腈、20mL乙酸、2m
34、LEDTA参与1000mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。溶液需过0.45m膜。流动相B:分别将800mL乙腈、20mL乙酸、2mLEDTA参与1000mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。溶液需过0.45m膜。.规范贮藏溶液:咖啡碱贮藏溶液:2.00mg/mL。没食子酸GA贮藏溶液: 0.100mg/mL。儿茶素类贮藏溶液:+C1.00mg/mL,+EC1.00mg/mL,+EGC2.00mg/mL,+EGCG2.00mg/mL,+ECG2.00mg/mL。规范任务溶液:用稳定溶液配制。 规范任务溶液的浓度:没食子酸5g/mL25g/mL、咖啡碱50g/mL150g/mL、+C50g/mL15
35、0g/mL、+EC50g/mL150g/mL、+EGC100g/mL300g/mL、+EGCG100g/mL400g/mL、+ECG50g/mL200g/mL。.操作方法取样:按GB/T 8302的规定。试样制备:按GB/T 8303的规定。测定:干物质含量测定:按GB/T 8303的规定。.供试液的制备: 母液:称取0.2g准确到0.0001g均匀磨碎的试样于10mL离心管中,参与在70中预热过的70%甲醇溶液5mL,用玻璃棒充分搅拌均匀润湿,立刻移入70水浴中,浸提10min隔5min搅拌一次,浸提后冷却至室温,转入离心机在3500r/min转速下离心10min,将上清液转移至10mL容量
36、瓶。残渣再用5mL的70%甲醇溶液提取一次,反复以上操作。合并提取液定容至10mL,摇匀,过0.45m膜,待用该提取液在4 下可至多保管24h 。 测试液:用移液管移取母液2mL至10mL容量瓶中,用稳定溶液定容至刻度,摇匀,过0.45m膜,待测。.色谱条件 流动相流速:1mL/min。柱温:35 。紫外检测器:波长278nm。 梯度条件:100%A相坚持10min 15min内由100%A相68%A相、32%B相 68%A相、32%B相坚持10min 100%A相.测定待流速和柱温稳定后,进展空白运转。准确汲取10L混合规范系列任务液注射入HPLC。在一样的色谱条件下注射10L测试液。测试液
37、以峰面积定量。.结果计算计算方法:以儿茶素类规范物质定量: 式中: A所测样品中被测成分的峰面积; fStd所测成分的校正因子浓度/峰面积,浓度单位g/mL; V样品提取液的体积。单位为毫升mL; d稀释因子通常为2mL稀释成10mL,那么其稀释因子为5; m1样品称取量,单位为克g; m样品的干物质含量,%。.计算方法:以咖啡碱规范物质定量 式中: RRfStd所测成分相对与咖啡碱的校正因子; SCaf咖啡碱规范曲线的斜率峰面积/浓度,浓度单位g/mL 。儿茶素类相对咖啡碱的校正因子表名称GA+EGC+C+EC+EGCG+ECGRRfStd0.8411.243.583.671.721.42.
38、儿茶素类总量计算公式反复性:同一样品儿茶素类总量的两次测定值相对误差应10%,假设测定值的相对误差在此范围,取两次测得值的算术平均值为结果,保管小数点后2位。.茶叶中茶多酚的检测仪器及器具分析天平:感量0.001g。水浴: 701 。离心机:转速3500r/min。分光光度计。.试剂所用水均为重蒸馏水,除特殊规定外,所用试剂为分析纯。乙腈:色谱纯。甲醇。碳酸钠。甲醇水溶液体积比:7+3。福林酚试剂。10%福林酚试剂现配:将20mL福林酚试剂转移到200mL容量瓶中,用水定容并摇匀。.7.5%碳酸钠质量浓度:称取37.50g0.01g碳酸钠,加适量水溶解,转移至500mL容量瓶中,定容至刻度,摇
39、匀室温下可坚持1个月。没食子酸规范贮藏溶液1000 g/mL :称取0.110g0.001g没食子酸,于100mL容量瓶中溶解并定容至刻度,摇匀现配。没食子酸任务液:用移液管分别移取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL的没食子酸规范贮藏溶液于100mL容量瓶中,分别用水定容至刻度,摇匀,浓度分别为10、20、30、40、50 g/mL。.操作方法供试液的制备母液:同儿茶素类测定母液制备。测试液:移去母液1.0mL于100mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀,待测。.测定用移液管分别移取没食子酸任务液、水做空白对照用及测试液各1.0mL于刻度试管内,在每个试管内分别参与5.0mL的福林酚试剂
40、,摇匀。反响3min8min内,参与4.0mL7.5%碳酸钠溶液,加水定容至刻度,摇匀。室温下放置60min,用10mm比色皿、在765nm波长下用分光光度计测定吸光度A。根据没食子酸任务液的吸光度A与各任务溶液的没食子酸浓度,制造规范曲线。.结果计算计算方法:比较试样和规范任务液的吸光度 式中: A样品测试液吸光度; V样品提取液体积,10mL; d稀释因子通常为1mL稀释成100mL,那么其稀释因子为100; SLOPEStd没食子酸规范曲线的斜率; m样品干物质含量,% m1样质量量,单位为克g。.反复性:同一样品的两次测定值,每100g试样不得超越0.5g,假设测定值相对误差在此范围,
41、那么取两次测定值的算术平均值为结果,保管小数点后1位。本卷须知:样品吸光度应在没食子酸规范任务曲线的校准范围内,假设样品吸光度高于50 g/mL浓度的没食子酸规范任务溶液的吸光度,那么应重新配置高浓度没食子酸规范任务液进展校准。.十、游离氨基酸总量检验游离氨基酸:茶叶水浸出物中呈游离形状存在的具有-氨基的有机酸。检验方法根据:GB/T 8314-2021。测定原理: -氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮共热,构成紫色络合物,用分光光度法在特定的波长下测定其含量。仪器及器具分析天平:感量0.001g。分光光度计。比色管:具塞,25mL。.试剂和溶液除非另有阐明,所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水。p
42、H8.0磷酸盐缓冲液:1/15mol/L磷酸二氢钠:称取23.9g十二水磷酸氢二钠,加水溶解后转入1L容量瓶中,定容至刻度,摇匀。1/15mol/L磷酸二氢钾:称取经110烘干2h的磷酸氢二钾9.08g,加水溶解后转入1L容量瓶中,定容至刻度,摇匀。取1/15mol/L得磷酸二氢钠溶液95mL和1/15mol/L磷酸二氢钾5mL,混匀,该混合液的pH为8.02%茚三酮溶液:称取水合茚三酮纯度不低于99%2g,加50mL水和80mg氯化亚锡搅拌均匀。分次加少量水溶解,放在暗处,静置一昼夜,过滤后加水定容至100mL。.茶氨酸或谷氨酸系列规范任务液10mg/mL规范贮藏液:称取250mg茶氨酸或谷
43、氨酸纯度不低于99%溶于适量水中,转移定容至25mL,摇匀。该规范任务贮藏液1mL含有10mg的茶氨酸或谷氨酸。移取0.0mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL规范贮藏液,分别加水定容至50mL,摇匀。该系列规范任务液1mL分别含有0mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg茶氨酸或谷氨酸。.操作方法取样:按GB/T 8302的规定。试样制备:按GB/T 8303的规定。测定试液制备:按GB/T 8312中4.4.1的规定。测定:准确汲取试液1mL,注入25mL比色管中,加0.5mLpH8.0磷酸盐缓冲液和0.5mL2%茚三酮溶液,在沸水浴中加热
44、15min。待冷却后加水定容至25mL。放置10min后,用5mm比色杯,在570nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度A。.氨基酸规范曲线的制造:分别汲取1mL茶氨酸或谷氨酸系列规范任务液于一组25mL比色管中,各加pH8.0磷酸盐缓冲液0.5mL和2%茚三酮溶液0.5mL ,在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25mL,按上面方法测定吸光度A。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制规范曲线。.结果计算计算方法:茶叶中游离氨基酸含量以干态质量分数%表示: 式中: C根据测定的吸光度从规范曲线上查得的茶氨酸或谷氨酸的毫克数,单位为毫克mg; V1试液总量,单位为毫升mL; V2
45、测定用试液量,单位为毫升mL; m试样用量,单位为克g; w试样干物质含量质量分数0,%。. 假设符合反复性,取两次测定的算术平均值作为结果,保管小数点后1位。反复性:在反复条件下同一样品获得的测定结果的绝对误差值不得超越算术平均值的10%。.十一、茶黄素检验茶黄素:红茶中溶于乙酸乙酯呈橙黄色的物质,由多酚类及其衍生物氧化缩合而来,红茶中茶黄素类的含量普通为03%15%,对红茶的色香味及质量起着决议性的作用。由于茶黄素具有多种与人体安康有关的潜在功能,如抗氧化、防治心血管疾病、降血脂、抗癌防癌等,因此遭到国内外的广泛关注,成为茶叶质量化学与功能成分的研讨热点。检验方法根据:GB/T 30483
46、-2021.测定原理:茶叶磨碎试样中的茶黄素儿茶素用70%的甲醇在70水浴上提取,速溶茶用热的10%乙腈溶解。茶黄素儿茶素的测定用C18柱、检测波长278nm、梯度洗脱、HPLC分析,用茶黄素儿茶素规范物质外标法直接定量。仪器与设备分析天平:感量0.0001g。水浴。离心机:转速3500r/min。混匀器。高效液相色谱仪HPLC:包含梯度洗脱及紫外检测器检测波长278nm。液相色谱柱: C18粒径5m,250mm*4.6mm。.试剂除非另有阐明,所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水,。乙腈:色谱纯。甲醇。冰乙酸。70%甲醇水溶液体积分数。10mg/mLEDTA-2Na溶液:现配。10mg/mL抗坏血酸溶液:现配。.稳定溶液:分别将25mLEDTA-2Na溶液、25mL抗坏血酸溶液、50mL乙腈参与500mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。液相色谱流动相:流动相A:分别将90mL乙腈、20mL冰乙酸、2mLEDTA-2Na参与1L容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。溶液需过0.45m膜。流动相B:分别将800mL乙腈、20mL冰乙酸、2mLEDTA-2Na参与1L容量瓶中,用水定容
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