动物细胞培养(ali)

1、 上 节 回 顾1、阻碍植物(zhw)细胞杂交的结构？解除阻碍的方法？ 2、诱导原生质融合的方法？原理？植物细胞融合的标志？3、如何将杂种细胞培育成杂种植株？原理？植物体细胞杂交成功的标志？4、植物体细胞杂交技术的流程？和传统杂交育种相比，植物体细胞杂交技术的优点？5、微型繁殖属于哪种繁殖方式？优点？6、作物脱毒的选材？单倍体育种的步骤？优点？7、突变体的获得利用的是什么原理？培养细胞一直处于分生状态指的是哪一时期的细胞？ 共二十三页动物细胞工程(gngchng)共二十三页阅读课本(kbn)44页第一段，回答问题：动物细胞工程(gngchng)常用的技术手段其中， 是基础。 动物细胞培养、动物

2、细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体动物细胞培养共二十三页动物(dngw)细胞培养和核移植技术共二十三页一、动物(dngw)细胞培养1、概念(ginin)：2、原理： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.细胞增殖共二十三页动物(dngw)组织块制成细胞(xbo)悬液传代培养胰蛋白酶处理分散成单个细胞（原因）幼龄动物的器官组织或胚胎（原因）用胰蛋白酶等处理贴壁细胞适宜条件，原代培养3、动物细胞培养的过程（原因）细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养使细胞与培养液充分接触，利于吸收营养加入培养液细胞间的物质主

3、要是蛋白质细胞生长特点：接触抑制，贴壁生长共二十三页强调(qing dio)一：细胞贴壁过程细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散(fnsn)的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。共二十三页当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖(zngzh)，这种现象称为细胞的接触抑制。强调(qing dio)二：接触抑制不死性细胞共二十三页原代培养： 人们常将动物组织消化后的初次(ch c)培养称为原代培养。传代培养： 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新

4、的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程）细胞株： 传代细胞一般能传到40-50代，遗传物质一般不会发生改变，叫细胞株。细胞系： 传代50代以后不能再传下去，部分细胞遗传物质发生了改变，能连续传代，获得不死性，叫细胞系。 共二十三页4.动物细胞培养的条件(tiojin)（阅读课本46页）:1）无菌无毒的环境(hunjng)： 适宜的温度：人和哺乳动物细胞最适温度为36.50.5。适宜的酸碱度：PH：7.2-7.4液体合成培养基：（葡萄糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）等；通常还需加入血浆、血清等天然成分。4）气体环境：2）营养：3）温度和pH：“95空气+5CO2”的混

5、合气体培养箱。氧气是细胞代谢必须的； CO2维持培养液的PH。对培养液和所有培养用具无菌处理；培养液中添加抗生素防止培养过程中污染；定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。共二十三页5、动物细胞培养技术的应用（阅读(yud)课本46-47页）:1）蛋白质生物制品的生产 如病毒(bngd)疫苗、干扰素、单克隆抗体2）基因工程技术中常用的受体细胞3）检测有毒物质，判断某种物质的毒性 4）细胞的生理、药理、病理研究 如用于筛选抗癌药物 共二十三页 复 习 回 顾1、动物细胞工程常用的技术手段？基础技术？2、动物细胞培养的原理？培养的材料取自？取材原因？3、动物组织块的处理？所用酶种类？

6、使用该酶的目的？4、动物单个细胞加入营养液制成？目的？5、动物细胞生长的特点？原代培养与传代培养的区别？能无限(wxin)增殖的细胞是？6、动物细胞培养的条件？O2与CO2的作用？抗生素的作用？营养成分？血清、血浆的作用？共二十三页获得(hud)细胞或细胞产物细胞(xbo)的全能性细胞群体植物体培养结果快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较共二十三页二、动物体细胞核移植技术(jsh)和克隆动物（阅读课本47页）1、概念(ginin)：3、核移植分类：

7、胚胎细胞核移植体细胞核移植（难度高） 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物2、原理：动物细胞核具有全能性共二十三页克隆：指从一个共同的祖先，通过无性繁殖的方式产生出来的一群遗传特性相同(xin tn)的DNA分子，细胞或个体。克隆包括三个层次 分子水平：如PCR扩增DNA 细胞水平：如动物细胞培养 个体水平：如克隆动物共二十三页克隆羊多利培育(piy)过程：黑面绵羊去核卵母细胞白面绵羊乳腺细胞核细胞核移植重组细胞电脉冲刺激早期重组胚胎胚胎移植另一头绵羊(minyng)的子

8、宫妊娠、出生克隆羊多利供体受体代孕受体共二十三页 取供体细胞传代培养10代以内(y ni)的细胞.为什么？用的是去核的减数第二次分裂中期(zhngq)细胞（M期）为什么？激活方法：激活目的：促融方法：电刺激胚胎移植至代孕受体内 妊娠、分娩4、核移植流程供体：优质高产奶牛受体：普通奶牛（卵母细胞的采集与培养） 1.体积大，易操作。2.含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。共二十三页 你认为(rnwi)用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？绝大部分DNA来自(li z)于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细

9、胞。此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物100%的复制。共二十三页5、体细胞核移植技术的应用(yngyng)前景：在畜牧业中可以加速家畜遗传改良(giling)的进程保护濒危物种医药卫生领域生产医用蛋白质及组织器官的移植了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病（性别）共二十三页6、体细胞核移植技术(jsh)存在的问题看书(kn sh)P49-50页共二十三页在克隆羊多利的过程中，没有运用(y

10、nyng)到下列哪项技术（ ）A、细胞培养技术B、细胞核移植(yzh)技术C、胚胎移植技术D、基因工程技术D共二十三页下列关于体细胞克隆(k ln)的叙述中，错误的是（ ）A、供体为体细胞的细胞核B、受体为去核的卵母细胞C、细胞核移植(yzh)是体细胞克隆的关键步骤D、克隆出的后代与供体的遗传物质和表现型完全一致D共二十三页内容摘要上 节 回 顾。5、微型繁殖属于哪种繁殖方式。7、突变体的获得利用的是什么原理。细胞生长特点：接触抑制，贴壁生长。细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为(chn wi)细胞贴壁。培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称