注射型磷酸钙骨水泥纤维蛋白胶作为BMP注射性载体的可行性研究

1、注射型磷酸钙骨水泥/纤维卵白胶作为BMP注射性载体的可行性研究刘通方,刘建,孟国林,袁志,吕荣,毕龙,王登虎,刘艳武,胡蕴玉【关键词】注射剂；磷酸钙类；骨粘合剂；纤维卵白构造粘着剂；骨形态产生卵白质类；载体；骨诱导【Abstrat】AI:Tevaluatethefeasibilityfinjetablealiuphsphateeent(IP)andfibrinsealant(FS)asaninjetablepundarrierfbnerphgeniprtEin(BP).ETHDS:ThepsitesfIP/FS/bBP,IP/FSrbBPereinjetedsubutanuslyriplant

2、edintthighuslepuhesf45ieatrand.Theeffetfetpibnefratinasevaluatedbybiheialexainatinfalkalinephsphatase(ALP)andhistlgialexainatin2and4eeksafterperatinandthenebnesereeighedinthe4thpstperativeeektparestatistiallytheabilityfbnefratinfdifferentpsites.RESULTS:IP/FS/bBPpsiteinduedthefratinfnebnesteffetively

3、.BBPstiulatedessstegenesishileIP/FSshednsignfnebnefratin.Thereasasignifiantdiffereneangthe(P0.05).NLUSIN:Theinjetablebnesubstitute,IP/FS/BP,exhibitedanexellentsteindutiveativity,andIP/FSasagdarrierfrBP.【Keyrds】injeti;aliuphsphates;bneeents;fibrintissueadhesive;bnerphgenetiprteins;arrier;steindutin【关

4、键词】注射剂；磷酸钙类；骨粘合剂；纤维卵白构造粘着剂；骨形态产生卵白质类；载体；骨诱导开放植骨是植骨术的传统方法，但比年来随着微创伤外科技能的生长,研制和应用可注射性骨交换质料已成为一个紧张的积极标的目的1-2.注射型磷酸钙骨水泥injetablealiuphsphateeent,IP具有精良的生物相容性和按照骨缺损外形暂时塑性的特性，使其成为如今最具潜力的植骨质料之一.但其清闲率低，落解迟钝，影响新骨的长入3-4.而纤维卵白胶fibrinsealant,FS不但具有精良的止血、粘结成效和可注射性,并且生物相容性精良、易于被人体汲取,是骨形态产生卵白bnerphgeniprtein,BP的抱负

5、载体5-6,已普及用于很多外科范畴.我们以研制具有骨诱导、可塑形和能落解的注射型骨移植质料为目的，在IP中参加落解快的FS，构成注射型复合载体，可望进步IP的落解速率，加快新骨的生长.1质料和要领1.1质料1.2要领统计学处置惩罚：数据以xs表现，ALP活性测定结果接纳两因素方差阐发,BP成骨活性测定接纳t查验，P0.05为差异有统计学意义.2结果2.1大要不雅察各组小鼠均无殒命,饮食、运动正常,伤口均正常愈合.术后14k,IP/FS/bBP组和bBP组植入区有半圆形包块形成,触之较韧,包块渐渐增大变硬.2.2ALP活性测定每个实行组各测定5份标本，取均匀值.术后2k和4k时，ALP程度由高到

6、低依次为：IP/FS/bBP组bBP组IP/FS组，IP/FS/bBP组和IP/FS组间差异有统计学意义P0.05，而IP/FS/bBP组和bBP组间差异无统计学意义(表1).表1ALP检测结果(2.3构造形态学不雅察术后2k：各组植入区可见有少量炎性细胞浸润，四周肌构造根本正常.IP/FS/bBP组(图1)中FS已大部门汲取，可见间充质细胞增殖、聚拢，并被由间充质细胞分化来的软骨样细胞和软骨样构造支解包绕IP；bBP组图2有散在的小软骨岛形成.IP/FS组图3见较多团块状剩余质料，以IP为主，FS部门汲取，无软骨细胞形成.术后4k：IP/FS/bBP组图4软骨细胞和软骨构造渐渐成熟，新骨形成

7、.剩余质料内FS已完全汲取，IP质料被进一步支解，落解，出现空泡化，其内部有细胞长入.bBP组图5可见少量交织骨、骨小梁，并有少量红骨髓.IP/FS组图6仍有较多团块状质料残留，其四周见纤维构造增生,未见新骨形成.2.4BP的成骨活性测定术后4k时,IP/FS/bBP组的BP成骨活性是bBP组的1.5倍,差异有统计学意义(P0.05,表2).表2术后4k时新骨量测定(3讨论图2bBP组术后2k：在小鼠大腿肌肉构造间有软骨细胞形成HE100图3IP/FS组术后2k：见较多团块状质料，无软骨细胞形成HE100图4IP/FS/bBP组术后4k：大量的新骨形成，IP质料落解显着HE100图5bBP组术

8、后4k：少量的骨形成HE100图6IP/FS组术后4k：未见新骨形成,仍有较多团块状质料残留HE100BP的重要生物作用是诱导未分化的间充质细胞向软骨和骨的标的目的分化，其促进成骨作用的发挥依靠于与相宜的载体缓释体系结合,不然极易被体液稀释转运,或被敏捷落解8.磷酸钙骨水泥aliuphsphateeent,P对多种药物有缓释作用9-10，但将P直接用作BP的载体，在国表里报道很少，更未见P与BP的注射利用，其重要缘故原由大概是BP与P的复合历程中很轻易损伤其分子立体布局，进而影响骨诱导作用的发挥.同时由于BP的分子量较大，倒霉于开释.我们起首将BP与FS复合，是由于FS是一种研究和应用较多的B

9、P缓释载体5-7,11，是BP的抱负庇护剂，对付加强BP的不变性，延伸开释时间具有明白的结果11-12.FS自然的网状微不雅布局有助于BP的附着和BP与靶细胞打仗,其强盛的粘着力有利于BP的迟钝开释.别的，随着FS的快速落解,在植入质料的四周可形成BP的浓度梯度,增长了BP与靶细胞作用的时间7,12；同时，使复合质料的清闲率渐渐增长，为新骨的形成和血管长入提供了有用的立体空间,反过来也加快了IP自身的落解.本实行证明了上述假想：将IP/FS/bBP注射在小鼠肌袋内2k时可见间充质细胞增殖、聚拢，并被由间充质细胞分化来的软骨样细胞和软骨样构造支解包绕IP；4k时软骨细胞和软骨构造渐渐成熟，大量新

10、骨形成.IP质料出现空泡化，其内部有细胞长入.反响了随着质料的落解，新骨渐渐长入IP质料内的趋势.4k时BP活性，定量地说明白IP/FS/bBP组新骨形成量显着优于单纯bBP组.别的，IP/FS/bBP组AKP含量显着升高，而bBP组AKP只轻度升高,也从生化角度反响了新骨的形成13.总之,以IP/FS为载体复合BP的注射型骨修复质料在充实发挥FS对BP缓释作用的同时,又使载体得到了精良的机器性能.具有明白的骨诱导本领、制备简朴、能注射利用等突出长处.【参考文献】1张胜,胡蕴玉,吴道澄.骨形态产生卵白纳米型缓释制剂的制备及性子J.第四军医大学学报,2002,2318:1686-1689.2郑正

11、庭，马平，吕荣，等.经皮注射骨形态产生卵白和自体红骨髓修复兔骨缺损与骨不连J.第四军医大学学报,1999,208:726-729.3DelRealRP,lkeJG,ValletRegi,etal.AneethdtprduearpresinaliuphsphateeentsJ.Biaterials,2002,23(7):3673-3680.4Bhner.aliurthphsphatesinediine:FreraistaliuphsphateeentsJ.Injury,2000,31(Suppl4):SD37-SD47.5Kaaura,UristR.Huanfibrinisaphysilgial

12、deliverysystefrbnerphgenetiprtEinJ.linrthp,1988,235:302-310.6陈克明,李旭升,刘兴炎，等.骨形态产生卵白复合纤维卵白载体修复骨缺损的实行研究J.中华骨科杂志，1998,218:58-70.7雷伟,崔赓,胡蕴玉，等.以纤维卵白胶为载体复合BP和bFGF的注射型骨修复质料诱导异位成骨的实行研究J.中国矫形外科杂志，2022,1012:765-767.8RileyEA,LaneJ,UristR,etal.Bnerphgenetiprtein2:BilgyandappliatinJ.linrthp,1996,324:39-46.9Driess

13、ensF,PlanellJA,BltngG,etal.stetransdutivebneeentsJ.PrInstehEng,1998,212(6):427-435.10TungI.InvitrdrugreleasefantibitiladedprushydrxyapatiteeentJ.ArtifellsBldSubstitIbilBitehnl,1995,23(1):81-88.11Radseivh,GubranHI,BurnufT.Fibrinsealant:Sientifiratinale,prdutinethds,prperties,andurrentlinialuseJ.VxSang,1997,72(3):133-143.12uraS,izukiN,KaabeR,etal.AarrierfrlinialusefrebinanthuanBP2:dehydrtherallyrsslinkedpsiteffibrillaranddenatured