自身抗体的检测

1、一、概述自身免疫耐受。自身免疫耐受。自身免疫自身免疫（autoimmunityautoimmunity）自身抗体自身抗体（autoantibodyautoantibody）或自身或自身致敏淋巴细胞致敏淋巴细胞自身免疫性疾病自身免疫性疾病二、自身抗体的检测二、自身抗体的检测（一）抗核抗体（一）抗核抗体 （antinuclear antibodyantinuclear antibody，ANAANA） 泛指抗各种泛指抗各种细胞核成分（细胞核成分（DNADNA，RNARNA，蛋白质和酶）蛋白质和酶）的抗体。的抗体。1 1、ANAANA的类型的类型（1 1）抗核蛋白抗体抗核蛋白抗体（2 2）抗）抗DN

2、ADNA抗体抗体抗双链抗双链DNADNA抗体（抗抗体（抗dsDNAdsDNA）抗单链抗单链DNADNA抗体（抗抗体（抗ssDNAssDNA）。）。（3 3）抗抗ENAENA抗体抗体 可提取性核抗原（可提取性核抗原（extractable nuclear extractable nuclear antigensantigens，ENAENA）2 2、ANAANA的检测方法的检测方法间接免疫荧光法间接免疫荧光法用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质，用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质，还可用核质丰富的培养细胞如还可用核质丰富的培养细胞如Hep-2Hep-2，作作为抗原。为抗原。用荧光显微镜观察用荧光显微镜

3、观察ANAANA荧光着染强度和免荧光着染强度和免疫荧光图形。疫荧光图形。稀释待检血清可检测稀释待检血清可检测ANAANA效价。效价。3.常见的常见的ANAANA图形及临床意义图形及临床意义均质型均质型（homogeneohomogeneousus，H H）斑点型斑点型（speckledspeckled，S S）核膜型核膜型（membranousmembranous，M M）核仁型核仁型（nucheolarnucheolar，N N）4.4.抗抗dsDNAdsDNA的检测的检测常用间接免常用间接免疫荧光法检疫荧光法检测，常用的测，常用的抗原基质是抗原基质是马疫锥虫或马疫锥虫或绿蝇短膜虫。绿蝇短膜

4、虫。（二）抗（二）抗ENAENA抗体谱抗体谱不同的自身免疫病可产生不同的不同的自身免疫病可产生不同的抗抗ENAENA抗体。通过检测抗抗体。通过检测抗ENAENA抗体抗体的类型及其组合，可综合诊断自的类型及其组合，可综合诊断自身免疫病的类型。身免疫病的类型。 1 1、检测方法、检测方法双向免疫扩散双向免疫扩散对流免疫电泳对流免疫电泳斑点酶免疫技术斑点酶免疫技术免疫印迹技术免疫印迹技术免疫印迹技术（最常用）免疫印迹技术（最常用）先将先将ENAENA混合抗原作凝胶电泳，混合抗原作凝胶电泳，分离开不同的区带，然后把这些分离开不同的区带，然后把这些区带转印到硝酸纤维膜上，加入区带转印到硝酸纤维膜上，加入

5、待检血清，最后用酶标待检血清，最后用酶标抗体使相抗体使相应的抗原带显色应的抗原带显色2 2、抗、抗ENAENA抗体的主要类型及抗体的主要类型及 临床意临床意义义（1 1）抗）抗SmSm抗体抗体 抗抗SmSm是是SLESLE的特异性标志之一的特异性标志之一 （2 2）抗核）抗核RNPRNP抗体（抗抗体（抗nRNPnRNP抗体）抗体）又称抗又称抗U U1 1RNPRNP抗体。抗体。 抗抗U U1 1RNPRNP抗体是诊断混合性结缔抗体是诊断混合性结缔组织病组织病（ MCTD MCTD）的重要血清学的重要血清学依据，是依据，是MCTDMCTD的诊断标准之一的诊断标准之一。 （3 3）抗）抗SSA/R

6、oSSA/Ro和抗和抗SSB/LaSSB/La 这两种抗体是干燥综合症这两种抗体是干燥综合症（SSSS）患者最常见的两种自身抗患者最常见的两种自身抗体体（4 4）抗）抗J J0 0 -1-1抗体抗体 最常见于多发性肌炎（最常见于多发性肌炎（PMPM）患者。患者。（5 5）抗）抗Scl-70Scl-70抗体抗体 几乎仅出现在几乎仅出现在PSSPSS（进行性进行性系统性硬皮病）患者体内，是系统性硬皮病）患者体内，是PSSPSS的特征抗体的特征抗体（三）类风湿因子（三）类风湿因子（rheumatoid factorrheumatoid factor，RFRF）RFRF是以变性是以变性IgGIgG为靶

7、抗原的抗体，为靶抗原的抗体，它能与人或动物的变性它能与人或动物的变性IgGIgG结合，结合，而不与正常而不与正常IgGIgG结合，结合，RFRF主要出主要出现在类风湿关节炎患者。现在类风湿关节炎患者。 RF RF的检测最常用的检测最常用IgGIgG致敏的胶乳致敏的胶乳颗粒凝集试验，或速度散射比浊颗粒凝集试验，或速度散射比浊法，但只能检测法，但只能检测IgMIgM类的类的RFRF。IgGIgG类，类，IgAIgA类和类和IgEIgE类类RFRF需需ELISAELISA等等方法检测。方法检测。（四）其他自身抗体四）其他自身抗体 1.1.抗中性粒细胞胞质抗体抗中性粒细胞胞质抗体 （anineutro

8、phil cytoplasmic anineutrophil cytoplasmic antibodiesantibodies，ANCAANCA） 以人中性粒细胞胞质为靶抗原，以人中性粒细胞胞质为靶抗原，与临床多种小血管炎性疾病有关。与临床多种小血管炎性疾病有关。分胞质型（分胞质型（cANCAcANCA）和核周型和核周型（pANCApANCA）。）。可用可用ELISAELISA或间接免或间接免疫荧光法测定。疫荧光法测定。2.2.抗心磷脂抗体（抗心磷脂抗体（anti-anti-phospholipid antibodyphospholipid antibody，APLAAPLA）靶抗原是血浆中的

9、磷脂结合蛋白。靶抗原是血浆中的磷脂结合蛋白。APLAAPLA包括一组自身抗体，如抗心包括一组自身抗体，如抗心磷脂抗体（磷脂抗体（ACLAACLA），），抗磷脂酸抗抗磷脂酸抗体（体（APAAAPAA）和抗磷脂酰丝氨酸抗和抗磷脂酰丝氨酸抗体等。体等。3.3.抗平滑肌抗体（抗平滑肌抗体（anti-smooth anti-smooth muscle antibodymuscle antibody，ASMAASMA） 是自身免疫性肝炎的血清学标志是自身免疫性肝炎的血清学标志性抗体。常用间接免疫荧光分析性抗体。常用间接免疫荧光分析检测。检测。4.4.抗角蛋白抗体（抗角蛋白抗体（anti-keratin anti-keratin antibodyantibody，AKAAKA）主要见于类风湿性关节炎患者，主要见于类风湿性关节炎患者，对于早期诊断对于早期诊断RARA有重要意义。可有重要意义。可用间接免疫荧光法检测。但敏感用间接免疫荧光法检测。但敏感性较低。与性较低。与RFRF不平行。不平行。5.5.抗乙酰胆碱受体抗体抗乙酰胆碱受体抗体是重症肌无力的标志性自身抗体，是重症肌无力的标志性自身抗体，对重症肌无力的诊断有特异性。对重症肌无力的诊断有特异性。可用可用ELISAELISA检测。检测。6