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文档简介

1、1会计学艾滋病实验室检查艾滋病实验室检查23AIDSAIDS患者患者正常正常( (10109 9/L)/L)CD4CD40.20.21(0.81(0.81.2)1.2)CD4/CD8CD4/CD8111.21.22.12.1淋巴细胞总淋巴细胞总数数112 23 3R2M14ELISA（酶联免（酶联免疫试验）疫试验）5血清学检测血清学检测（）（）Western blot （免疫印迹（免疫印迹试验）试验）6ELISA夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性特异性稍差（可有假阳性）7RT-PCR（逆转录（逆转录-聚

2、合酶链反应）聚合酶链反应） 核酸定量技术原理PCRPCR：高温变性：高温变性(94)(94)低温退火低温退火(55)(55)适温延伸适温延伸(72)(72)；经；经25302530个循环，成倍数扩增个循环，成倍数扩增荧光定量荧光定量PCRPCR：比常规：比常规PCRPCR多一个寡聚多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）和一个荧光淬灭分子）应用：应用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查血浆中的病毒查血浆中的病毒RNARNA8淋巴细胞淋巴细胞HIV RNA检测检测Northern印迹杂交印迹杂

3、交( (Northern blot) 原理：原理： RNARNA片段经电泳分片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂纤维素滤膜，再用探针杂交交9Sanger测序法测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生特定的碱基处终止，产生A A、T T、C C、G G四组不同长度的一系列四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的核苷酸，通过在尿素变性的PAGEPAGE胶上电泳，获得胶上电泳，获得DNADNA序列序列101112实验室检查实验室检查：HIV抗体阳性，并经确证试验确抗体阳性，并经确证试验确认。认。CD4+T淋巴细胞数明显减少。淋巴细胞数明显减少。HIV RNA和和P24抗原的检测有助于早期诊断新生儿抗原的检测有助于早期诊断新生儿的的HIV感染。感染。131415 HIV抗体阳性抗体阳性 CD4+T淋巴细胞数淋巴细胞数200/mm200/mm3 3 无上述表现或症状无上述表现或症状1617181920ELISA夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性特异性稍差（可有假阳性）21

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