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文档简介

1、实验三果蝇唾腺染色体的制片与观察1一、实验目的1.了解唾腺CS的特点2. 学习分离唾腺的技术3. 掌握唾腺CS制片方法2二、实验原理永久间期CS复制而不分开体细胞联会横纹结构3果蝇唾腺染色体的特点：1.巨大染色体：这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普通染色体的100150倍，因而又称为巨大染色体。42.多线染色体：果蝇的唾腺细胞停止在分裂间期（永久间期 ），染色体核蛋白纤维不断复制，平行排列形成巨大而伸展的多线染色体唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约有10004000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体(polytene chromosome)。52

2、.体联会：类似有丝分裂中的同源染色体联会。由于同源染色体紧密配对几乎相互融合，使果蝇的唾腺染色体只有二倍体染色体数目的单元数。63.横纹结构：染色体上有横纹结构，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征；可用于基因定位；4.Puff结构：幼虫的不同发育期，浓缩的染色质纤维会成群解旋、松开，形成泡状松散结构，使相应的基因得以表达，这种泡状结构称Puff结构，亦称染色体的疏松。7三、实验材料、器具、药品试剂大果蝇(D. virilis)活体三龄幼虫解剖镜,显微镜,培养箱;培养瓶,解剖针,镊子, 载片,盖片,吸水纸0.7NaCl,1mol HCl; 醋酸洋红;培养基8四、实验步骤

3、1. 三龄幼虫培养 营养丰富 1518 肥大,大唾腺9培养要求饲料松软,含水量较高,营养丰富,发酵良好追加酵母液控制幼虫的密度低温培养102. 解剖幼虫肥大幼虫,洗去杂物1 d 0.7% NaCl左手持解剖针压住虫体后端1/3处,右手持针扎住头部,适当用力向前拉,唾腺随头部拉出1112唾液腺解剖针解剖针13唾液腺头部口器脂肪带挑出唾液腺14唾腺肠道唾腺与肠道的区别头尾唾腺15注意:剥离过程中,不能让载片上的生理盐水干涸16剔除脂肪173. 解离和染色剥离的唾腺置载片中央,加一滴HCl,解离23吸去HCl,冲洗23次,吸干;加1d染液,染色5184. 压片及观察载片置平整处,加盖片,轻敲;压片低倍至高倍镜检192021五、注意事项1. 水不可太多,否则幼虫会漂浮而且活跃2. 一定加生理盐水,否则唾腺易干3. 将脂肪组织清除干净4. 吸水时勿将唾腺一起吸走5. 染色时间不可过长,否则背景也着色6. 压片时要揉,用力要均匀22六、作业1. 制效果较好的唾腺CS临时片1-2张2. 真实绘制观察到的唾腺CS绘图3. 思考题

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