水产品中天然毒素及检验方法

1、水产品天然毒素及其检测技术水产品天然毒素分类鱼类毒素贝类毒素河豚毒素河豚毒素 1.1西加毒素西加毒素 1.2其他等其他等麻痹性毒素麻痹性毒素腹泻性毒素腹泻性毒素神经性毒素神经性毒素失忆性毒素失忆性毒素两类重要水产品天然毒素两类重要水产品天然毒素不够美观1.1 河豚毒素河豚毒素 毒素来源毒素来源 河豚毒素河豚毒素(TTX)主要存在于鱼纲硬骨鱼亚纲豚形目的近百种河豚鱼和其他生物体内近百种河豚鱼和其他生物体内,是一种生物碱类是一种生物碱类天然毒素天然毒素。 中毒机理中毒机理：河豚毒素阻抑神经和肌肉的电信号传导，阻止肌肉、神经细胞膜的离子通道，使神经末梢及神经中枢麻痹，使机体不能运动。毒素量大时，迷走

2、神经麻痹，呼吸减慢至停止，迅速死亡。河豚毒素的检验方法河豚毒素的检验方法生物检测法：小鼠生物检测法和组织培养分析法小鼠生物检测法和组织培养分析法。仪器检测法：荧光检测法是检测方法之一, 主要是利用河豚毒素加碱水解后生成C9 碱, 该物质在特定波长发荧光, 从而可进行检测。薄层层析(TLC)用于河豚毒素的定量测定。高效液相色谱(HPLC)反相色谱, 用硅胶柱作固定相。免疫检测法：主要有单克隆抗体法(McAb)应用原理是指在特异性抗原刺激机体后，产生相应抗体。抗原与抗体都是蛋白质，抗体为免疫球蛋白。它们之间可以相互识别，并发生结合反应，从而确定是否有毒。尽量用图解方式表达1.2 西加毒素西加毒素

3、西加鱼毒西加鱼毒(ciguatera)(ciguatera)是指加勒比海地是指加勒比海地区除河豚中毒之外的所有鱼肉中毒现象，区除河豚中毒之外的所有鱼肉中毒现象，它包含它包含雪卡毒素雪卡毒素(CTX)(CTX)、刺尾鱼毒素刺尾鱼毒素(MTX) (MTX) 。 西加西加毒素毒素在鱼的内脏中浓度比较高。在鱼的内脏中浓度比较高。西加毒素( c iguatox in, CTX)是20世纪60年代从毒爪哇裸胸鳝肝脏中提取发现的, 它是深海藻类分泌的毒素, 被热带或亚热带食草性鱼类蓄积并在鱼体内被氧化而成的一类强毒性聚醚类毒素, 通过食物链逐级传递和积累, 最终传递给人类。据报道全世界每年至少2万人不同程度

4、的遭受CTX的伤害, 食入0. 1 Lg的CTX 可使一个成年人致病。CTX中毒最显著的特征是干冰的感觉和热感颠倒, 即当触摸热的东西会感觉冷, 把手放入水中会有触电或摸干冰的感觉。尽量用图解方式表达CTX的检测方法生物毒性试验( 小白鼠法)方法的原理是对毒素采用适宜的提取方法, 将样品中的毒素转移到提取液中; 通过向固定种系和体重的小白鼠腹腔注射样品提取液, 记录小白鼠的存活时间以计算样品毒素的量。高效液相色谱分析(HPLC)方法的原理是利用毒素分子结构上的羟基反应生成荧光性物质, 然后在FLD上检测, 线性较好, 极限浓度可达3. 5 ng /kg。细胞毒性试验( cell bioassa

5、y)细胞毒性试验是CTX 主要作用于神经末梢和中枢神经节利用毒素对细胞的毒性来检测毒素的一种技术。免疫学测定法( immunoassays)该方法是利用抗原与抗体专一、特异结合的特点, 从而对毒素进行定性定量的检测。尽量用图解方式表达2 2 贝类毒素贝类毒素 定义：贝类动物因摄取有毒藻类而在体内积累的毒素。 种类：麻痹性贝类毒素（PSP）、腹泻性贝类毒素（DSP）、神经毒性贝类毒素（NSP）、失忆性贝类毒素（ASP）。 2.1麻痹性贝类毒素（麻痹性贝类毒素（PSP） 麻痹性贝类毒素专指摄食有毒的涡鞭毛藻,莲状原膝沟藻,塔马尔原膝沟藻被毒化的双壳贝类所产生的生物毒素。 按结构可分为氨甲酰基类毒素

6、如石房蛤毒素、新石房蛤毒素、膝沟藻毒素及氨甲酰N磺基类毒素。化学结构示意图？2.2 腹泻性毒素（腹泻性毒素（DSP）腹泻型贝类中毒一般分布于生长环境中的浮游生物，特别是赤潮生物鳍藻有关，在赤潮区生长的贝类很容易积累腹泻型贝类毒素。化学结构示意图？2.3 神经性贝类毒素（神经性贝类毒素（NSP）引起人产生以神经麻痹为主的中毒症状，毒性较低，未见有死亡报道。神经性贝毒分布范围较小，主要分布在美国佛罗里达海岸和墨西哥湾沿岸，以及欧洲和新西兰。化学结构示意图？2.4 记忆缺损贝类毒素（记忆缺损贝类毒素（ASP）ASP 的主要成分是一种具有生理活性的氨基酸类物质-软骨藻酸（Domoic acid，DA）

7、是浮游植物代谢的产物，他能提高钙离子的渗透性，使细胞长时间处于去极化的兴奋状态而导致死亡8。ASP 能够导致头晕眼花，短时期内失去记忆力，但在人体内的降解速度也快。目前许多国家对贝类中DA 的控制标准为20 g/g。化学结构示意图？贝类毒素的检测方法一、生物测定法：小鼠生物测定法(MBA)、家蝇或蝗虫生物检验法、细胞毒性测试法（也称组织培养分析法）二、物理、化学检测法：HPLC-FDL原理是将PSP毒素分子的环结构在碱性条件下氧化再酸化生成荧光生色团，进行荧光检测。此外还有液一质联用技术、薄层色谱（TLC）法三、免疫检测法 免疫学方法检测贝毒的技术已经得到了初步的应用，但是免疫技术和贝毒本身存在的一些问题,如产生抗体的交叉反应、系列标准毒素的缺乏以及像酶联免疫吸附试验、钠离子通道受体结