实验6_小篮子法测定种子呼吸速率

1、呼吸速率是植物生命活动最重要的指标之一。呼吸速率是植物生命活动最重要的指标之一。测定呼吸速率的方法很多，可以分成两大类：测定呼吸速率的方法很多，可以分成两大类：测定吸氧速率或者测定放出测定吸氧速率或者测定放出CO2速率。前者有速率。前者有测压法、氧电极法；后者有小篮子法、红外线测压法、氧电极法；后者有小篮子法、红外线CO2气体分析仪（气体分析仪（IRGA）等方法。）等方法。测压法、氧电极法是测定植物呼吸过程对测压法、氧电极法是测定植物呼吸过程对O2的的吸收，样品用量少，且精确度高。利用红外线吸收，样品用量少，且精确度高。利用红外线CO2气体分析仪测定植物呼吸速率比较快速、气体分析仪测定植物呼吸

2、速率比较快速、准确，是科研上常采用的方法。准确，是科研上常采用的方法。1）学习呼吸强度的碱吸收测定方法；）学习呼吸强度的碱吸收测定方法；2）了解环境因素（如温度）对呼吸强度的）了解环境因素（如温度）对呼吸强度的影响。影响。 植物进行呼吸时放出植物进行呼吸时放出CO2，计算一定的植物样，计算一定的植物样品在单位时间内放出品在单位时间内放出CO2的数量，即为该样品的数量，即为该样品呼吸速率。呼吸速率。呼吸放出的呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收，实验可用氢氧化钡溶液吸收，实验结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液，结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计

3、算从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的出呼吸过程中释放的CO2的量。的量。 Ba(OH)2 +CO2 BaCO3+ H2OBa(OH)2（剩余）（剩余）+ H2C2O4BaC2O4+ 2H2O每毫升每毫升144 mol/l 的草酸相当于的草酸相当于1mg CO21）材料：）材料： 发芽的小麦种子和煮死的小麦种子发芽的小麦种子和煮死的小麦种子2）仪器设备：）仪器设备： 呼吸测定装置（小篮子）；呼吸测定装置（小篮子）； 电子天平；电子天平； 酸式及碱式滴定管。酸式及碱式滴定管。饱和饱和Ba(OH)2溶液溶液144mol/l 草酸溶液草酸溶液酚酞指示剂酚酞指示剂 1）取）取50

4、0ml 广口瓶广口瓶4个，个，标记为标记为0、1、2、3号，号，瓶口用橡皮塞塞紧，瓶瓶口用橡皮塞塞紧，瓶塞下面挂一铁丝小篮，塞下面挂一铁丝小篮，以便装植物样品，整个以便装植物样品，整个装置即谓装置即谓“广口瓶呼吸广口瓶呼吸测定装置测定装置”。Ba(OH)2溶液溶液2）称取）称取20g死种子，放入其中的一个小篮子中；再死种子，放入其中的一个小篮子中；再称取称取3份活种子，每份份活种子，每份20g，分别放入另外，分别放入另外3个小个小篮子中；篮子中；3）分别在）分别在4个广口瓶中准确加入个广口瓶中准确加入20ml饱和饱和Ba(OH)2溶液；溶液；4）将）将3个放有活种子的小篮子分别挂在编号为个放有

5、活种子的小篮子分别挂在编号为13的广口瓶内，盖紧瓶塞，在低温（的广口瓶内，盖紧瓶塞，在低温（1号，冰箱冷号，冰箱冷藏室）、室温（藏室）、室温（2号）和高温（号）和高温（3号，号，40C）中）中处理，经常摇动，以破坏碱液表面的硬膜；处理，经常摇动，以破坏碱液表面的硬膜；5）将放有死种子的小篮子挂在）将放有死种子的小篮子挂在0号广口瓶内，在号广口瓶内，在室温中按以上步骤处理；室温中按以上步骤处理；6）20min后，取出广口瓶中的小篮子，加入后，取出广口瓶中的小篮子，加入12滴酚酞指示剂，盖紧瓶盖；滴酚酞指示剂，盖紧瓶盖；7）用草酸滴定广口瓶中的碱液至红色刚好消失）用草酸滴定广口瓶中的碱液至红色刚好

6、消失为止，记录空白及各个温度处理下的草酸用为止，记录空白及各个温度处理下的草酸用量（记为量（记为V0、V1、V2、V3）；）；编号编号0123种子种子（10g）死种子死种子 活种子活种子 活种子活种子 活种子活种子 温度温度室温室温 低温低温4C室温室温 高温高温40CBa(OH)220ml 反应时间反应时间20min草酸体积草酸体积V0V1V2V3实验处理情况列表实验处理情况列表处理处理空白滴定空白滴定草酸用量草酸用量（ml）处理滴定处理滴定草酸用量草酸用量（ml）空白与处理空白与处理草酸用量差草酸用量差值（值（ml）呼吸速率呼吸速率（mgCO2 g1 fw h1）低温低温 室温室温 高温高温 呼吸速率呼吸速率v（mgCO2 g1 fw. h1）：）：上式中，上式中，V0：空白滴定用去的草酸量（：空白滴定用去的草酸量（ml） Vn：处理滴定用去的草酸量（：处理滴定用去的草酸量（ml）v =（V0-Vn）X 草酸浓度草酸浓度 X CO2分子量分子量种子质量（种子质量（g）X 反应时间（反应时间（h）=（V0-Vn）X X 4410 X0.3 X（V0-Vn）=4416020防止口中呼出的气体进入广口瓶！防止口中呼出的气体进入广口瓶！滴