溶出度试验国内外-讲课

1、 何笑荣何笑荣内容内容 1.中国药典与国外药典溶出度测定法的比较2.近年来溶出度测定的进展 溶出度试验是一种模拟口服固体制剂在胃肠道中的崩解和溶出的体外试验方法,它作为控制药物制剂质量与评价药物体内生物利用度的重要手段,已越来越为世界各国药物研究者所重视。 一般认为必须测定溶出度的药物 难溶或难吸收的药物; 治疗量与中毒量接近的药物; 要求缓释、控释或长效的药物; 用于治疗严重疾病的药物; 急救、抢救用药物。 随着生物药剂学工作的开展, 近年研究证明,易溶性药物也会因制剂配方和工艺不同而导致药物的溶出度的差异,从而影响药物生物利用度和疗效。溶出度应用范围日趋广泛,除在片剂应用外,其他剂型也广泛

2、应用, 在原料药、新药的开发及药物剂型改变。 6中国药典中国药典2005版版United States Pharmacopeia USP XXX (30)European Pharmacopoeia Ph. Eur. 5th Edition, Supplement 5.3British Pharmacopoeia BP 2007Japanese Pharmacopoeia JP XIV (14)一、国内、外药典溶出度测定方法7各国药典溶出度测定收载的仪器方法各国药典溶出度测定收载的仪器方法1. 转篮法转篮法Rotating Basket (ChP/USP/Ph.Eur./BP/JP)2. 浆法

3、浆法Paddle (ChP/USP/Ph.Eur./BP/JP)3. 往复筒法往复筒法Reciprocating Cylinder (USP/Ph.Eur.)4. 流室法流室法Through Cell (USP/Ph.Eur./BP/JP)5. 桨碟法桨碟法 Paddle Over Disk (USP/Ph.Eur.)6. 旋转筒法旋转筒法Rotating Cylinder (USP/Ph.Eur.)7. Reciprocating HolderReciprocating Holder(USP)8. 中国药典小杯法中国药典小杯法（ChP）中、美、英、日四国药典溶出度方法使用情况中、美、英、日四

4、国药典溶出度方法使用情况Rotating Basket Paddle Through Cell cannikinUSP2303973/BP41852/JP5460/ChP161146/33溶出介质溶出介质USP溶出介质包括:稀盐酸、缓冲溶液、人工胃液或肠液、水。不建议使用有机溶媒，除非进行详细论证。体积一般500 1000mL,常用900mL,最大可至2-4L 。BP溶出介质与USP相似。对一些水溶性差的药物，加入适当表面活性剂，如SDS等。JP溶出介质常用pH1.2的稀盐酸与pH6.8的磷酸盐缓冲液。日本国家药品审评部门编制参比目录需四种溶出介质（ pH1.2的溶液， pH4.8醋酸盐缓冲液

5、与pH6.8 磷酸盐缓冲液和水）。ChP未对溶出介质种类作特别要求，多参照外国药典。转速转速USP速释制剂转篮转速100r/min。桨为50 r/ min 或75 r/ min ,延长释放制剂如用桨法可达100 r/ min ,过快或过慢的转速(25 r/ min 或150 r/ min) 则需要进行全面的方法学验证或体内释放试验。BP规定篮法的转速最适为100 r/min ,桨法的转速最适为50 r/ min ,这与美国和日本药典相同。桨法的转速最大不超过100 r/ min ,篮法的转速最大不超过150 r/ min。JP未有转速的相关规定 参比目录提出溶出度试验应尽量选取弱条件(如桨法、

6、转速50 r/ min) 进行制剂处方筛选或两制剂之间的对比试验,而不应选取强参数(如桨法、转速100 r/min) 。ChP 未有特别说明,多小于或等于100 r/ min。药典和文献报道中有少数几个品种药物转速过快,达到了150 r/ min 。中、美、英、日药典转速的选择情况测定方法测定方法1.UV法（日本、英国和中国药典仍然多用UV 法,约占70 %）2.HPLC法（美国药典HPLC 法,约占40 %）自身对照法测定溶出度（取样通常10 片或粒 混匀,称取适量来替代对照品）1）中药制剂,由于缺少明确的标示量,可采用此法测定。2）部分抗生素类药物。评判方法：评判方法： 美国与日本药典对普

7、通片剂的溶出度评判方法相同,最多可以采用3 次:取供试品6 片(个) ,每片(个) 溶出量按标示量计算,均应不低于规定限度Q+ 5 %。 若不符合,另取6 片(个) 测试,初复试的12片(个) 中应无溶出量低于Q - 15 %者,且其平均溶出量应不低于规定限度； 若不符合,则再另取12 片(个) 测试,初复试的24 片(个) 中应无溶出量低于Q- 25 %者,且低于Q - 15 %者不多于2 片(个) ,其平均溶出量应不低于规定限度Q。 中国药典对普通片剂的溶出度评判方法,最多可采用2 次:取供试品6 片(个) ,每片(个) 的溶出量按标示含量计算,均应不低于规定限度Q ,如6 片(个) 中仅

8、有1片(个) 低于规定限度,但不低于Q - 10 % ,且其平均溶出度不低于规定限度时,仍可判为符合规定。 如6 片(个) 中有1 片(个) 低于Q - 10 % ,应另取6 片(个) 复试,初复试的12 片(个) 中仅有2 片(个) 低于Q - 10 % ,且其平均溶出度不低于规定限度时,亦可判为符合规定。供试品的取用量如为2 片(个)或2 片(个) 以上时,计算每片(个) 的平均溶出量,均不得低于规定限度(Q) ,不再复试。例1卡马西平片:中国药典（2005 年版二部）规定为：桨法、150 r/min，以0.1mol/L盐酸1000ml 为溶出介质，60 min，限度为65%。日本橙皮书中

9、规定：桨法、75r/min、在以上四种溶出介质中分别试验，体积均为900ml，在5 min和30 min时分别取样测定，限度要求分别为不得过60%和不得少于70%。例2 辛伐他汀片:国家药品标准WS1-(X-066)-2003Z 中拟定：以0.01mol/L NaH2PO3溶液（用HCl或NaOH液调pH 值为4.5）-正丙醇(2:1)900ml 为溶出介质、桨法、50 r/min、30 min限度为80%； 美国药典拟定为：以含0.5%十二烷基硫酸钠的0.01mol/L NaH2PO3溶液（用50% NaOH溶液调pH 值为7.0）900ml 为溶出介质、桨法、50 r/min、30 min

10、限度为80%。 日本企业（小林制药株氏会社）内部标准同美国药典，且还增加了另外三个溶出介质，且均要求要有一定的溶出量。三、近年来溶出度测定的进展1.日本于1998 年推出的“药品品质再評价工程” 主要目的是保证口服固体制剂对于不同患者均能具有较高的生物利用度; 使同一制剂的不同产品均能具有相同的生物等效性。 采用的手段是“在严格的溶出度试验条件下，在各种介质中均具有较高的、一定的溶出曲线”来提高体内外相关性,从而推动对药品对制剂工艺的研究。依据 人体内对药物的吸收部位主要是消化道。体内环境正常者或体质强壮者，胃肠道内存在有正常量和正常pH 值的胃酸和肠液；体内环境非正常者或体质虚弱者，胃酸和肠

11、液的量及pH 值会各种各样。据文献报道，随年龄的增长，胃酸缺乏人群的比例会逐渐增多，50 岁人群中有约50%，60、70 岁人群中则有近70%，因此，人体内环境各异，不能一概而论。同一制剂在不同患者体内溶出度与生物利用度同一制剂在不同患者体内溶出度与生物利用度的相关性的相关性两制剂在不同转速下的溶出曲线与年轻人和老年人的体内相关性 优质药品表现为：患有该疾病的任何人群服用都会有一定的疗效和作用，即对任何人群均有较高的生物利用度； 劣质药品，可能只会对一部分人群有效（如体内环境正常者），而对另一部分病人疗效甚微（如胃酸缺乏者、年老体弱者），即生物利用度随人体的差异而变化。 日本在进行药品质量再评

12、价中拟定以下四种基本溶出介质来涵盖消化道内的体液，且要求在以下四种溶出介质中均应有“一定弧度”的溶出曲线，以便能保证该药品用于任何患者时，均有一定的疗效。(1) pH = 1.2 溶液（取氯化钠2.0g，加水适量使溶解，加HCl7ml，再加水稀释至1000ml，即得）。Chp通常采用的0.1mol/L HCl液。(2) pH = 4.0 醋酸盐缓冲液（0.05mol/L 醋酸-0.05mol/L 醋酸钠16.4:3.6；且若参比制剂在6 h内仍未能达到85%以上的溶出，则可追加其他pH 值的缓冲液）。该介质的离子浓度较我国药典附录中记载得低，且在该介质里的溶出度试验研究，我国目前还进行得比较少

13、。(3) pH = 6.8 磷酸盐缓冲液。(取磷酸二氢钾3.4g 和无水磷酸氢二钠3.55g，加水适量使溶解后，定容至1000ml，再稀释一倍，即得。离子浓度较Chp附录中记载的低）。(4) 水 日本将该思路引伸至仿制药的质量评价日本将该思路引伸至仿制药的质量评价, 要求要求仿制药必须达到以下仿制药必须达到以下3 项要求项要求:(1) 生产规模不少于生产规模不少于10 万单位、个别昂贵品万单位、个别昂贵品种可适当降低生产规模。种可适当降低生产规模。(2) 在至少在至少4 种种p H 值溶出介质中与原研制剂值溶出介质中与原研制剂的溶出曲线进行比较的溶出曲线进行比较, 均应一致、亦均应一致、亦f2

14、 因子大于因子大于50 ; 且溶出度试验条件应尽可能选用严格的参数。且溶出度试验条件应尽可能选用严格的参数。(3) 产品上市后的市场抽查、处方在一定范围产品上市后的市场抽查、处方在一定范围内的变更、生产产地的变更等内的变更、生产产地的变更等, 均采用溶出曲线的一致均采用溶出曲线的一致性来评价。性来评价。2.美国药典所收载的溶出度标准在世界范围内有很大影响,在化学药方面已发展得较为完善, 溶出度检测有很多值得我们借鉴。 美国美国FDA 药品审评中心的仿制药办公室药品审评中心的仿制药办公室属下的生物等效部于属下的生物等效部于2004 年年1 月起月起, 推出了采推出了采用溶出曲用溶出曲线来评价药品

15、内在质量, 即延伸至仿制药与原研药是否生物等效的情况; 其中详细罗列了溶出度试验各参数以及取样时间点, 并规定采用f2 因子对溶出曲线的一致性进行评估(f2 因子需大于50) ; 在FDA 和WHO 都有关于可免除进行人体生物等效性试验的条件规定, 其思路基本相同, 主要基于药物分子的生物药剂学性质分类，或处方比例相似的多规格产品,都需进行制剂的溶出曲线相似性比较。按BCS药物的分类：Class 1: High Solubility High Permeability Class 2: Low Solubility High Permeability Class 3: High Solubil

16、ity Low Permeability Class 4: Low Solubility Low Permeability Dissolution Testing in the 21st Century: USP PerspectiveWHO EXPANDS APPLICATION OF BCS BCS Class 1: HS/HPRapid/Very Rapid dissolution (VRD) in pH 1.2, 4.5 and 6.8 BCS Class 2: LS/HP/Weak AcidsRapid dissolution in pH 6.8 and similar dissol

17、ution profile in pH 1.2, 4.5 and 6.8AAPS Hot TopicRole of Dissolution Test in the 21st Century Nov 1, 2006FDA BCS Guidance Criteria: Class I Only Dissolution Testing CriticalRapidly dissolving: 85% or greater by USP I at 100 rpm or USP II at 50 rpm in 900 ml in pH 1.2, 4.5 and 6.8 For a waiver of BE

18、, T and R products should exhibit similar dissolution profile (f2 50)AAPS Hot TopicRole of Dissolution Test in the 21st CenturyComparative dissolution testingSimilarity factor f2n = number of time pointsR(t) = mean % API dissolved of reference product at time point xT(t) = mean % API dissolved of test product at time point xMinimum of 3 time points (zero excluded) 12 units (each in own dissolution vessel) for each product (for “official” purposes)Only one measurement should be considered after both products have reached 85 % dissolutionRSD at higher time points 10%我国的溶出度现状