实验：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂汇总-精

1、实验：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂实验：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂一、实验原理一、实验原理: : 1 1、 高等植物体内，有丝分裂高等植物体内，有丝分裂常见根尖、茎尖等分常见根尖、茎尖等分生区细胞。生区细胞。各个细胞的分裂是独立的各个细胞的分裂是独立的。通过在显微。通过在显微镜下观察各个时期细胞内染色体（染色质）的存在镜下观察各个时期细胞内染色体（染色质）的存在状态，判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期状态，判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期（间期、前期、中期、后期和末期）。（间期、前期、中期、后期和末期）。2 2、碱性染料（、碱性染料（龙胆紫溶液或醋酸洋红液龙胆紫溶液或醋酸洋红液）能

2、将染色）能将染色体（或染色质）染成深色。体（或染色质）染成深色。3 3、盐酸盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散，用盐酸处使植物细胞之间的果胶质层松散，用盐酸处理植物的根尖，可以使根尖细胞彼此理植物的根尖，可以使根尖细胞彼此容易分离容易分离。二、材料用具：二、材料用具：1 1、洋葱（或大蒜）根尖，、洋葱（或大蒜）根尖，2 2、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管等，、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管等，3 3、解离固定液、解离固定液 ：盐酸和酒精混合液盐酸和酒精混合液(1:1(1:1）4 4、染色：、染色：龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）龙胆紫溶液（或醋酸洋红液） 1.生根培养生根培养：将切除老根的洋葱

3、或将切除老根的洋葱或 大蒜的磷基置于盛水大蒜的磷基置于盛水 的小烧杯上，的小烧杯上， 于于2225下进行生根培养。下进行生根培养。 三、实验步骤三、实验步骤磷磷 基基培养根尖：培养根尖：应每天应每天换水换水 ( (防止水中缺氧烂根防止水中缺氧烂根) ) 取材取材：取生长取生长旺盛、带有旺盛、带有分生分生区的根尖区的根尖，长度，长度为根尖的为根尖的2-3mm2-3mm。解离解离：解离液解离液（15%15%盐酸盐酸95%95%酒精溶液酒精溶液1111）；）； 时间：时间：室温室温3-53-5分钟，至根尖酥软；分钟，至根尖酥软；目的：目的：使组织细胞分离开，杀死并固定细胞使组织细胞分离开，杀死并固定

4、细胞漂洗漂洗漂洗漂洗：用用清水清水漂洗漂洗10min10min，目的目的是洗去组织中的解是洗去组织中的解 离液，便于染色离液，便于染色( (防止酸碱中和防止酸碱中和) )。染染色色染色染色：染液染液（0.01g/mL0.01g/mL的龙胆紫或的龙胆紫或0.02g/mL0.02g/mL的醋酸洋的醋酸洋红）红）; ;时间时间为为3 35 5分钟；分钟；目的目的是使染色体或染色质被碱性是使染色体或染色质被碱性染料染成深色，便于观察。染料染成深色，便于观察。制制片片压片压片：目的目的是使细胞分散开。是使细胞分散开。方法方法（用镊子弄碎（用镊子弄碎根尖，盖上盖玻片，再放上一块载玻片，压片）根尖，盖上盖玻

5、片，再放上一块载玻片，压片）（压片过重过猛可能将组织压碎、压烂；过轻则细（压片过重过猛可能将组织压碎、压烂；过轻则细胞未充分分散开而重叠。）胞未充分分散开而重叠。）低倍镜观察：低倍镜观察：找到找到分生区分生区细胞（特点：细细胞（特点：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂）胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂） 高倍镜观察高倍镜观察：找各时期细胞。可见找各时期细胞。可见处于间处于间期的细胞最多期的细胞最多，中期最少中期最少。不能看到某个细。不能看到某个细胞连续分裂的过程，因细胞在解离时已被杀胞连续分裂的过程，因细胞在解离时已被杀死。死。看一看植物看一看植物细胞的细胞的分裂（根尖）分裂（根尖

6、）根冠根冠分生区分生区伸长区伸长区成熟区成熟区根尖纵剖结构示意图根尖纵剖结构示意图3、装片的制作：、装片的制作：解离解离漂洗漂洗染色染色制片制片盐盐 酸酸使植物细胞之间的果胶质使植物细胞之间的果胶质层松散，层松散，细胞细胞相互相互分离分离放入请水中漂洗放入请水中漂洗洗去盐酸，便于碱性染料染色洗去盐酸，便于碱性染料染色使染色体着色，便于显使染色体着色，便于显微镜下观察微镜下观察用镊子压扁，加盖用镊子压扁，加盖玻片玻片,再加载玻片压再加载玻片压散细胞散细胞使使细胞分散开细胞分散开观察观察先用低倍镜观察先用低倍镜观察在低倍镜下找到分生区细胞；在低倍镜下找到分生区细胞；正方形、排列紧密正方形、排列紧密

7、依次观察分裂中期、前期、依次观察分裂中期、前期、后期、末期、的细胞间期、后期、末期、的细胞间期、再用高倍镜观察再用高倍镜观察4、显微镜观察：、显微镜观察：思考：思考： 为何只截取根尖为何只截取根尖23mm23mm？ 有利于找到分生区细胞有利于找到分生区细胞 解离的目的：解离的目的：使组织中的细胞相互分离开使组织中的细胞相互分离开。 漂洗的目的：漂洗的目的： 洗去药液，防止洗去药液，防止解离过度解离过度。 用碱性染料染色目的用碱性染料染色目的： 使染色质和染色体着色，便于观察。使染色质和染色体着色，便于观察。 制片的目的：制片的目的： 使细胞分散开（成一层细胞），利于观察。使细胞分散开（成一层细

8、胞），利于观察。（6 6）分生区的特点是什么？）分生区的特点是什么？（7 7）本实验所观察到的细胞还能继续分裂吗？）本实验所观察到的细胞还能继续分裂吗？ 细胞小，排列密而整齐，细细胞小，排列密而整齐，细胞壁薄，细胞核大，细胞质浓，胞壁薄，细胞核大，细胞质浓，无液泡。具有很强的分裂能力，无液泡。具有很强的分裂能力，能够不断的分裂产生新细胞，能够不断的分裂产生新细胞，再由这些细胞分化形成其他组再由这些细胞分化形成其他组织。织。 原本细胞都是叠加在一起原本细胞都是叠加在一起的，在显微镜下很难观察清楚，的，在显微镜下很难观察清楚，酒精和盐酸就是使细胞分散分酒精和盐酸就是使细胞分散分离并杀死细胞，显微镜

9、观察的离并杀死细胞，显微镜观察的是死亡的细胞那时处于的状态，是死亡的细胞那时处于的状态，所以，有的细胞正处于中期，所以，有的细胞正处于中期，有的处于间期。有的处于间期。 已知一个完整的细胞周期划分为分裂间期和分裂期已知一个完整的细胞周期划分为分裂间期和分裂期(M期期)，其中分裂间期又分为，其中分裂间期又分为G1期期(DNA复制前期复制前期)、S期期(DNA复制期复制期)和和G2期期(DNA复制后期复制后期)。回答下列有关动物细胞培。回答下列有关动物细胞培养的问题：养的问题： 1)培养中的细胞其数目的增加和培养时间的关系如图培养中的细胞其数目的增加和培养时间的关系如图甲。据图读出该细胞完成一个细

10、胞周期所需的时间甲。据图读出该细胞完成一个细胞周期所需的时间(T)是是_h。(2)从图甲的从图甲的A点取出点取出6 000个细胞，测定每个细胞的个细胞，测定每个细胞的DNA含量，结果如图乙。图乙的含量，结果如图乙。图乙的B、C、D中，表示处中，表示处于于S期的是期的是_，表示处于，表示处于G2期和期和M期的是期的是_，表示处于，表示处于G1期的是期的是_。(3)若取样的若取样的6 000个细胞中，处于个细胞中，处于M期细胞的数目是期细胞的数目是300个，则处于个，则处于S期和期和G2期的细胞数分别是期的细胞数分别是_个和个和_个。个。(4)细胞周期中，完成各期所需时间的计算公式是细胞周期中，完

11、成各期所需时间的计算公式是tT(N是取样的总细胞数，是取样的总细胞数，n是各期的细胞数是各期的细胞数)，则该，则该细胞完成分裂期和间期的时间分别是细胞完成分裂期和间期的时间分别是_h和和_h。20CD生长健壮的小麦根尖，经过解离、漂洗、染色、取生长健壮的小麦根尖，经过解离、漂洗、染色、制片过程，制成临时装片，放在显微镜下观察。欲制片过程，制成临时装片，放在显微镜下观察。欲观察到细胞有丝分裂的前、中、后、末几个时期观察到细胞有丝分裂的前、中、后、末几个时期课课 堂堂 练练 习习A A应该选一个处于间期的细胞，持续观应该选一个处于间期的细胞，持续观察它从间期到末期的全过程察它从间期到末期的全过程B B如果在低倍镜下看不到细胞，可改用如果在低倍镜下看不到细胞，可改用高倍物镜继续观察高倍物镜继续观察C C如果在一个视野中不能看全各个时期，如果在一个视野中不能看全各个时期，可移动装片从周围细胞中寻找可移动装片从周围细胞中寻找D D如果视野过暗，可以转动细准焦螺旋如果视野过暗，可以转动细准焦螺旋增加视野的亮度增加视野的