专题四 实验动物基本方法和技术

1、医学动物实验的基本技术医学动物实验的基本技术与方法与方法n医学动物实验的基本技术医学动物实验的基本技术n医学动物实验中的手术技术医学动物实验中的手术技术n医学动物实验中常用指标的检测医学动物实验中常用指标的检测一、实验动物的抓取与固定方法一、实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与实验动物的抓取与固定方法固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取实验动物的抓取与固定方法与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方

2、法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法实验动物的抓取与固定方法二、编号和标记方法二、编号和标记方法n染色法染色法n挂牌法挂牌法n烙印法烙印法n耳孔法耳孔法编号和标记方法编号和标记方法n染色法染色法n挂牌法挂牌法n烙印法烙印法n耳孔法耳孔法编号和标记方法编号和标记方法n染色法染色法n挂牌法挂牌法n烙印法烙印法n耳孔法耳孔法编号和标记方法编号和标记方法n染色法染色法n挂牌法挂牌法n烙印法烙印法n耳孔耳孔法法编号和标记方法编号和标记方法n染色法染色法n挂牌法挂牌法n烙印法烙印法n耳孔法耳孔法三、分组方法三、分组方法n

3、随机分组随机分组- -随机数字法随机数字法n分层随机分组分层随机分组动物动物编号编号随机数随机数目目归归组组组：组：动物号码动物号码随机数目随机数目除了后的余除了后的余数数00000归组归组组：组：组：组：组：组：四、被毛去除方法四、被毛去除方法n剪毛法剪毛法n拔毛法拔毛法n剃毛法剃毛法n脱毛法脱毛法n常用脱毛剂的配方：常用脱毛剂的配方：n硫化钠硫化钠3g、肥皂粉、肥皂粉1g，淀粉，淀粉7g，加水，加水适量调成糊状。适量调成糊状。n硫化钠硫化钠8g、淀粉、淀粉7g、糖、糖4g、甘油、甘油5g、硼砂硼砂1g，加水，加水75ml。n硫化钠硫化钠8g，溶于，溶于100ml水中。水中。n以上脱毛剂配方

4、适用于家兔、大白鼠、小以上脱毛剂配方适用于家兔、大白鼠、小白鼠等小动物的脱毛。白鼠等小动物的脱毛。n硫化钠硫化钠10g、生石灰、生石灰15g，溶于，溶于100ml水内，此配方适用于狗等大动物的脱毛。水内，此配方适用于狗等大动物的脱毛。五、实验动物给药途径和方法五、实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途径和方法实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉

5、注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途径和方法实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途径和方法实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途

6、径和方法实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途径和方法实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途径和方法实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给

7、药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途径和方法实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途径和方法实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途径和方法实验动物给药

8、途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药实验动物给药途径和方法实验动物给药途径和方法n皮内注射皮内注射n皮下注射皮下注射n腹腔注射腹腔注射n肌肉注射肌肉注射n静脉注射静脉注射n灌胃给药灌胃给药n呼吸道给药呼吸道给药n淋巴囊注射淋巴囊注射n椎管内给药椎管内给药n经皮给药经皮给药六、实验动物的采血技术方法六、实验动物的采血技术方法大鼠与小鼠的采血方法大鼠与小鼠的采血方法n尾静脉采血尾静脉采血n眼眶动脉和静脉采血眼眶动脉和静脉采血n后眼眶静

9、脉丛采血后眼眶静脉丛采血n心脏采血心脏采血实验动物的采血技术方法实验动物的采血技术方法大鼠与小鼠的采血方法大鼠与小鼠的采血方法n尾静脉采血尾静脉采血n眼眶动脉和静脉采血眼眶动脉和静脉采血n后眼眶静脉丛采血后眼眶静脉丛采血n心脏采血心脏采血实验动物的采血技术方法实验动物的采血技术方法大鼠与小鼠的采血方法大鼠与小鼠的采血方法n尾静脉采血尾静脉采血n眼眶动脉和静脉采血眼眶动脉和静脉采血n后眼眶静脉丛采血后眼眶静脉丛采血n心脏采血心脏采血实验动物的采血技术方法实验动物的采血技术方法豚鼠的采血方法豚鼠的采血方法n心脏采血心脏采血n耳缘剪口采血耳缘剪口采血实验动物的采血技术方法实验动物的采血技术方法兔的采

10、血方法兔的采血方法n耳中央动脉采血耳中央动脉采血n耳缘静脉采血耳缘静脉采血n心脏采血心脏采血实验动物的采血技术方法实验动物的采血技术方法兔的采血方法兔的采血方法n耳中央动脉采血耳中央动脉采血n耳缘静脉采血耳缘静脉采血n心脏采血心脏采血实验动物的采血技术方法实验动物的采血技术方法犬的采血方法犬的采血方法n前后肢皮下静前后肢皮下静脉采血脉采血n股动脉采血股动脉采血n心脏采血心脏采血n颈静脉采血颈静脉采血实验动物的采血技术方法实验动物的采血技术方法犬的采血方法犬的采血方法n前后肢皮下静前后肢皮下静脉采血脉采血n股动脉采血股动脉采血n心脏采血心脏采血n颈静脉采血颈静脉采血实验动物的采血技术方法实验动物

11、的采血技术方法实验动物的采血技术方法实验动物的采血技术方法实实验验动动物物的的采采血血技技术术方方法法动物品种动物品种最大安全采血量最大安全采血量（ml）最小致死采血量（最小致死采血量（ml）小鼠小鼠0.20.3大鼠大鼠12豚鼠豚鼠510兔兔1040狼狗狼狗100500猎狗猎狗50200猴猴1560常用实验动物的最大安全采血量与最小致死采血量常用实验动物的最大安全采血量与最小致死采血量 七、实验动物各种体液的采集方法七、实验动物各种体液的采集方法n消化液消化液n脑脊液脑脊液n尿液尿液八、实验动物用药量的确定八、实验动物用药量的确定及计算方法及计算方法n动物给药剂量的确定动物给药剂量的确定n实验

12、动物用药量的计算方法实验动物用药量的计算方法n人与动物及各类动物间药物人与动物及各类动物间药物剂量的换算方法剂量的换算方法动物给药剂量的确定动物给药剂量的确定n全新化合物的剂量确定全新化合物的剂量确定n不同种属动物间的剂量换算不同种属动物间的剂量换算n相同动物整体与离体器官、组织相同动物整体与离体器官、组织间的剂量换算间的剂量换算n相同动物整体与细胞培养液间剂相同动物整体与细胞培养液间剂量换算量换算全新化合物的剂量确定全新化合物的剂量确定n求得该化合物的求得该化合物的LD50LD50n以以LD50LD50的的1/201/20开始摸索最小有效量开始摸索最小有效量n若最小有效量大于若最小有效量大于

13、1/101/10，一般应放弃，一般应放弃不同种属动物间的剂量换算不同种属动物间的剂量换算n按动物间体表面积换算按动物间体表面积换算n按动物间每公斤体重等效剂量按动物间每公斤体重等效剂量换算换算按动物间体表面积换算按动物间体表面积换算n先竖后横查表先竖后横查表n折算折算A A种动物的标准体重剂量种动物的标准体重剂量n根据体表面积折算系数换算根据体表面积折算系数换算B B种动物种动物的标准体重剂量的标准体重剂量n折算折算B B种动物单位剂量种动物单位剂量按动物间每公斤体重等效剂量换算按动物间每公斤体重等效剂量换算B种动物剂量（mg/kg)=WA种动物剂量（mg/kg)九、实验动物的麻醉方法九、实验

14、动物的麻醉方法n动物麻醉前的准备与处理动物麻醉前的准备与处理n常用麻醉药的用法与用量常用麻醉药的用法与用量n麻醉深度的判断和麻醉后麻醉深度的判断和麻醉后动物的护理动物的护理实验动物的麻醉方法实验动物的麻醉方法麻醉注意事项麻醉注意事项n静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张性、角膜反静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张性、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，立即停止注射。配制的药液浓度要适中，不可过时，立即停止注射。配制的药液浓度要适中，不可过高，以免麻醉过急；但也不能过低，以减少注入溶液高，以免麻醉过急；但也不能过低，以减少注入溶液的

15、体积。的体积。n麻醉时需注意保温。麻醉期间，动物的体温调节机麻醉时需注意保温。麻醉期间，动物的体温调节机能往往受到抑制，出现体温下降，可影响实验的准确能往往受到抑制，出现体温下降，可影响实验的准确性。此时常需采取保温措施。保温的方法有，实验桌性。此时常需采取保温措施。保温的方法有，实验桌内装灯，电褥，台灯照射等。无论用哪种方法加温都内装灯，电褥，台灯照射等。无论用哪种方法加温都应根据动物的肛门体温而定。常用实验动物正常体温：应根据动物的肛门体温而定。常用实验动物正常体温：猫为猫为38.638.61.01.0，兔为，兔为38.438.41.01.0，大鼠为，大鼠为39.339.30.50.5。n

16、作慢性实验时，在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加作慢性实验时，在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平。热至动物体温水平。 十、实验动物的急救与处死方法十、实验动物的急救与处死方法n实 验 动 物 的实 验 动 物 的急救措施急救措施n实 验 动 物 的实 验 动 物 的处死方法处死方法十一、实验动物活检和尸检方法十一、实验动物活检和尸检方法动物尸检方法动物尸检方法n体表检查体表检查n观察胸腹部皮下组织变化观察胸腹部皮下组织变化n腹腔检查腹腔检查n胸腔的切开和检查胸腔的切开和检查n胸腔器官的取出和剖检胸腔器官的取出和剖检n腹腔脏器的取出和剖检腹腔脏器的取出和剖检n脑与脊髓的取出和剖检脑与脊髓

17、的取出和剖检实验动物活检和尸检方法实验动物活检和尸检方法动物脏器组织活检方法动物脏器组织活检方法n肝脏活检方法肝脏活检方法n淋巴结活检方法淋巴结活检方法十二、动物实验的基本操作技能十二、动物实验的基本操作技能n气管插管气管插管n动脉插管动脉插管n左心室插管左心室插管n椎动脉注射椎动脉注射n输尿管插管输尿管插管n胆汁引流胆汁引流动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能活体肾切除术活体肾切除术活体睾丸切除术活体睾丸切除术动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本操作技能动物实验的基本