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文档简介
1、1.基因工程(基因工程(DNA重组技术)重组技术)通过通过体外体外DNA重组重组(基因表达载体构建,在体基因表达载体构建,在体外)和外)和转基因转基因等技术。等技术。 分析:分析:1.是是分子水平分子水平的技术的技术 2.理论基础是理论基础是“基因重基因重组组”3.先人工在体外实现先人工在体外实现基因基因重组,再导入受体细胞。目的基因能与载体重组,重组,再导入受体细胞。目的基因能与载体重组,又能整合到受体细胞的染色体又能整合到受体细胞的染色体DNA上(整合到受体细胞的基因组上),原因:上(整合到受体细胞的基因组上),原因:有相同的有相同的分子结构分子结构,组成单位和功能单位都是,组成单位和功能
2、单位都是脱氧核苷酸脱氧核苷酸,碱基配对方式相同。,碱基配对方式相同。外源基因可以在不同生物细胞内表达原因:生物共用一套外源基因可以在不同生物细胞内表达原因:生物共用一套遗传密码。遗传密码。都遵循中心都遵循中心法则。法则。基因工程对生物的性状进行定向改造,产生的变异是定向变异。基因工程基因工程对生物的性状进行定向改造,产生的变异是定向变异。基因工程育种的优点是育种的优点是定向改造生物的性状,定向改造生物的性状,可克服可克服远缘杂交不亲和的障碍远缘杂交不亲和的障碍。2.体外体外DNA重组操作的工具:重组操作的工具:限制酶限制酶、DNA连接酶连接酶、载体载体。限制酶主要来自。限制酶主要来自原原核核生
3、物,限制酶的功能:能识别双链生物,限制酶的功能:能识别双链DNA分子特定的分子特定的核苷酸序列核苷酸序列并在特定的位并在特定的位点将两个核苷酸之间的点将两个核苷酸之间的磷酸二酯键磷酸二酯键切断。供体生物的切断。供体生物的DNA(含目的基因)和载(含目的基因)和载体一般要被体一般要被同种同种限制酶切割,得到相同的黏性末端或者平末端,这样才能将目限制酶切割,得到相同的黏性末端或者平末端,这样才能将目的基因和载体拼接形成重组。的基因和载体拼接形成重组。DNA连接酶是将连接酶是将DNA片断片断连接起来,连接的不是连接起来,连接的不是碱基,两个核苷酸之间的碱基,两个核苷酸之间的磷酸二酯键磷酸二酯键(DN
4、A聚合酶聚合酶是以是以DNA母链为模板,将单母链为模板,将单个游离的脱氧核苷酸连在个游离的脱氧核苷酸连在DNA片段末端形成子链)。载体的化学本质是片段末端形成子链)。载体的化学本质是DNA,种类有质粒、种类有质粒、噬菌体噬菌体衍生物、动植物病毒等。它应具备条件:衍生物、动植物病毒等。它应具备条件:1.在受体细胞中在受体细胞中能进行能进行自我复制自我复制,或者整合到受体细胞的染色体上,随染色体,或者整合到受体细胞的染色体上,随染色体DNA同步复制。同步复制。2.有一个或者多个有一个或者多个限制酶限制酶的切点,的切点, 3.具有具有标记基因标记基因,便于重组,便于重组DNA的的鉴定和选择鉴定和选择
5、4.能在受体细胞稳定存在和无害。能在受体细胞稳定存在和无害。3.目的基因目的基因一般是一般是编码蛋白质编码蛋白质的结构基因,或的结构基因,或调控因子调控因子。来源:可以从。来源:可以从基因基因文库文库获取或者获取或者人工合成人工合成 基因文库:如果这个基因文库含有这种生物的基因文库:如果这个基因文库含有这种生物的所有基因所有基因,则它叫做这种生物的,则它叫做这种生物的基因组基因组文文库。库。cDNA是由生物某时期的是由生物某时期的mRNA逆转录逆转录得到的互补得到的互补DNA,cDNA是部分基因文库。是部分基因文库。获得目的基因后,为了获得大量的目的基因,要用获得目的基因后,为了获得大量的目的
6、基因,要用PCR技术扩增。原理:技术扩增。原理:DNA复制。过复制。过程:先合成引物(不说加入),目的基因受热程:先合成引物(不说加入),目的基因受热变性变性解旋成为单链(变性,不用解旋酶)解旋成为单链(变性,不用解旋酶)目的基因单链与引物互补结合(目的基因单链与引物互补结合(复性复性)在耐高温在耐高温DNA聚合酶(聚合酶(Taq酶)的作用下延酶)的作用下延伸合成互补伸合成互补DNA单链(单链(延伸延伸)重复此循环。重复此循环。4.基因工程的基因工程的4步骤:获取目的基因、构建步骤:获取目的基因、构建基因表达载体基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目、将目的基因导入受体细胞、目的基因的的基因
7、的检测与鉴定检测与鉴定,最核心的是第二步,它可以使目的基因成功导入受体细胞,最核心的是第二步,它可以使目的基因成功导入受体细胞,并在受并在受体细胞体细胞稳定存在稳定存在和成功地和成功地复制和表达复制和表达基因表达载体本质上是一个基因表达载体本质上是一个DNA分子,必须含有启分子,必须含有启动子(与动子(与M-RNA上的起始密码子区别)、目的基因、终止子、上的起始密码子区别)、目的基因、终止子、标记基因标记基因四部分。启动子四部分。启动子是是RNA聚合酶聚合酶识别和结合的部位,启动识别和结合的部位,启动转录转录过程。终止子位于目的基因的末端,是终止过程。终止子位于目的基因的末端,是终止转录的转录
8、的DNA片段。标记基因作用是片段。标记基因作用是鉴定和选择鉴定和选择。转化转化:将目的基因导入受体细胞内,并且在受体细胞内:将目的基因导入受体细胞内,并且在受体细胞内稳定维持稳定维持和和表达表达的过程。的过程。农杆菌转化法(双子叶植物和裸子植物)方法是:将目的基因插入农杆菌的农杆菌转化法(双子叶植物和裸子植物)方法是:将目的基因插入农杆菌的Ti质粒质粒的的T-DNA上上,整合到植物细胞的染色体,整合到植物细胞的染色体DNA上。还有上。还有基因枪法基因枪法和和花粉管通道法花粉管通道法。 导入动物细胞一般用导入动物细胞一般用显微注射技术显微注射技术。注射进。注射进受精卵受精卵内(如果是植物,受体细
9、胞可以是内(如果是植物,受体细胞可以是体细胞体细胞,有全能性),再进行,有全能性),再进行早期胚胎培养早期胚胎培养和和胚胎移植胚胎移植 如果导入原核生物细胞,则一般先用如果导入原核生物细胞,则一般先用Ca2+(CaCl2)处理,增大细胞壁的通透性,使)处理,增大细胞壁的通透性,使其成为其成为感受态感受态细胞。在受体细胞是否细胞。在受体细胞是否导入?(导入?(DNA分子杂交分子杂交)转录?()转录?(分子杂交分子杂交)表达?)表达?( 抗原抗体杂交)个体生物学水平检测:如抗虫棉抗原抗体杂交)个体生物学水平检测:如抗虫棉接种接种对照试验对照试验EcoliDNA连接酶只能连接黏性末端,连接酶只能连接
10、黏性末端,T4DNA连接酶既能连接黏性末端,又能连接平末连接酶既能连接黏性末端,又能连接平末端。终止子终止端。终止子终止转录转录(是(是DNA序列),终止密码子是终止翻译,是序列),终止密码子是终止翻译,是mRNA上三个相邻的上三个相邻的碱基。启动子是位于目的基因的首端,它是碱基。启动子是位于目的基因的首端,它是RNA聚合酶聚合酶识别和结合的识别和结合的DNA序列,而起始序列,而起始密码子是启动密码子是启动翻译翻译的的mRNA上三个相邻的碱基。终止子、启动子的化学本质是上三个相邻的碱基。终止子、启动子的化学本质是DNA,而,而终止密码子和起始密码子的本质是终止密码子和起始密码子的本质是RNA。
11、应用:将外源生长激素或某些药用蛋白基因(如血清蛋白基)与乳腺蛋白基因的应用:将外源生长激素或某些药用蛋白基因(如血清蛋白基)与乳腺蛋白基因的启动子启动子等重组导入动物的受精卵内,使动物的乳房能分泌血清蛋白(乳房等重组导入动物的受精卵内,使动物的乳房能分泌血清蛋白(乳房生物反应器生物反应器)。)。基因治疗基因治疗把正常基因导入病人体内把正常基因导入病人体内(不用替换异常基因)表达发挥作用。分为不用替换异常基因)表达发挥作用。分为体外基体外基因治疗因治疗和体内基因治疗。因只有个别细胞获得正常基因,所以病人基因型不变,和体内基因治疗。因只有个别细胞获得正常基因,所以病人基因型不变,“转基转基因因”的
12、性状也不能遗传。的性状也不能遗传。蛋白质工程:以蛋白质分子的结构规律与其生物功能的对应关系作为基础,通过蛋白质工程:以蛋白质分子的结构规律与其生物功能的对应关系作为基础,通过基因修基因修饰饰或者或者基因合成基因合成,对现有,对现有蛋白质蛋白质进行改造。步骤:预期生物功能进行改造。步骤:预期生物功能设计预期蛋白质空间设计预期蛋白质空间结构结构推测氨基酸序列推测氨基酸序列推出相应的的推出相应的的脱氧核苷酸脱氧核苷酸序列序列合成基因(合成基因(DNA)转录、翻转录、翻译译蛋白质。蛋白质。 蛋白质工程不是对蛋白质直接进行改造,而是先改造蛋白质工程不是对蛋白质直接进行改造,而是先改造基因基因。细胞工程细
13、胞工程通过通过细胞细胞水平或者水平或者细胞器细胞器水平上的操作水平上的操作一、植物细胞工程(主要研究一、植物细胞工程(主要研究植物组织培养植物组织培养和植物和植物体细胞杂交体细胞杂交)植物组织培养:原理植物组织培养:原理植物细胞植物细胞全能性全能性。在特定的时间和空间内基因。在特定的时间和空间内基因选择性表选择性表达达,分化分化成各种组织器官。只有成各种组织器官。只有离体离体的细胞才能使其全能性得到表达。是的细胞才能使其全能性得到表达。是无性无性繁繁殖,相当于植物克隆。过程:离体的植物器官、组织、细胞,在殖,相当于植物克隆。过程:离体的植物器官、组织、细胞,在无菌无菌和和人工控制人工控制的条件
14、下,离体植物器官、组织、细胞的条件下,离体植物器官、组织、细胞(脱分化)成为(脱分化)成为愈伤组织愈伤组织(再分化)(再分化)成为成为胚状体胚状体、丛芽、丛芽完整植株完整植株 条件:条件:离体离体,需要提供,需要提供无菌无菌条件,离体器官组织条件,离体器官组织要经过要经过消毒消毒,用具、培养基要,用具、培养基要灭菌灭菌,需要无机盐等营养物质,植物激素(主要是,需要无机盐等营养物质,植物激素(主要是细胞分裂素和生长素),在细胞分裂素和生长素),在再分化再分化需要光照,形成叶绿素,进行光合作用。需要光照,形成叶绿素,进行光合作用。植物组织培养的应用:植物组织培养的应用:1.微型繁殖快速繁殖大量的种
15、苗,无性状分离,能保持优微型繁殖快速繁殖大量的种苗,无性状分离,能保持优良品种的良品种的优良特性优良特性。 2.作物脱毒(培养无病毒植物):(如茎尖)进行组织培养。作物脱毒(培养无病毒植物):(如茎尖)进行组织培养。 3.生产人工种子:用组织培养得到胚状体、不定芽等,包上人工薄膜(人工种皮生产人工种子:用组织培养得到胚状体、不定芽等,包上人工薄膜(人工种皮要透水透气)成为人工种子。要透水透气)成为人工种子。4.单倍体育种:离体单倍体育种:离体花药花药单倍体植株单倍体植株用用秋水仙秋水仙素素使染色体数目加倍成为使染色体数目加倍成为纯合纯合植株(用了植株(用了“植物细胞全能性植物细胞全能性”和和“
16、染色体数目变染色体数目变异异”原理。花药离体培养其实就植物组织培养技术。单倍体育种最后得到的不是原理。花药离体培养其实就植物组织培养技术。单倍体育种最后得到的不是单倍体,而是正常纯合子植株单倍体,而是正常纯合子植株 生产细胞产物:利用愈伤组织细胞生产人参皂甙、生产细胞产物:利用愈伤组织细胞生产人参皂甙、紫草素、紫杉醇等物质。紫草素、紫杉醇等物质。(二)植物体细胞杂交:如白菜(二)植物体细胞杂交:如白菜-甘蓝。甘蓝。1.用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,原生质体原生质体(圆球形)(圆球形)(利用细胞膜具有一定的(利用细胞膜具有一定的流动性流动性)人工诱导原生质体融合)人
17、工诱导原生质体融合物理法:物理法:离心、离心、振动、电激振动、电激;化学法:用;化学法:用PEG(聚乙二醇聚乙二醇)作为诱导剂)作为诱导剂杂种细胞杂种细胞用用植物组织培养植物组织培养技技术培育成新植物体。植物体细胞杂交成功的标志是杂种细胞产生新的细胞壁(高尔基术培育成新植物体。植物体细胞杂交成功的标志是杂种细胞产生新的细胞壁(高尔基体)。体)。 可能有可能有A、B、AA、BB、AB(后三种属于融合后的细胞)(后三种属于融合后的细胞) 体细胞杂交后的新体细胞杂交后的新品种是可育的。品种是可育的。 优点、意义:优点、意义:1.可以克服远缘杂交不亲和的障碍可以克服远缘杂交不亲和的障碍 2.可以培育出
18、兼有不同可以培育出兼有不同物种品质的优良新品质。物种品质的优良新品质。二、动物细胞工程(二、动物细胞工程(动物细胞培养动物细胞培养、动物细胞、动物细胞核移植核移植、动物细胞融合动物细胞融合、生产单、生产单克隆抗体克隆抗体,最基础的技术是最基础的技术是动物细胞培养动物细胞培养)(一)动物细胞培养过程:离体动物(一)动物细胞培养过程:离体动物胚胎胚胎组织、组织、幼龄幼龄动物的组织剪碎动物的组织剪碎用用胰蛋白酶胰蛋白酶或胶或胶原蛋白酶分散成单个细胞原蛋白酶分散成单个细胞投进培养液制成细胞悬液投进培养液制成细胞悬液原代培养原代培养(第一次培养叫原代培(第一次培养叫原代培养)养)传代培养(传代培养(2-
19、50代,代,10代以后的叫代以后的叫细胞株细胞株)癌变,无限增殖(癌变,无限增殖(细胞系细胞系),它的),它的细胞核型(核基因)发生改变。细胞核型(核基因)发生改变。 有有贴壁生长贴壁生长现象,和现象,和接触抑制接触抑制。用。用胰蛋白酶胰蛋白酶处理,然处理,然后后分瓶分瓶继续培养,让细胞继续增殖。条件:继续培养,让细胞继续增殖。条件:1.无菌、无毒,培养液和用具要灭菌,培养无菌、无毒,培养液和用具要灭菌,培养液添加液添加抗生素抗生素,定时更换培养液,定时更换培养液 2.营养:和体内内环境成分类似,合成培养基里一定要营养:和体内内环境成分类似,合成培养基里一定要添加添加动物血清或血浆动物血清或血
20、浆。 3.温度和温度和pH,36.5正负正负0.5,pH7.2-7.4(人内环境(人内环境7.35-7.45) 4.气体环境气体环境O2和和CO2,给,给95%空气和空气和5%CO2,CO2为了维持培养液的正常为了维持培养液的正常pH值。值。动物体细胞核移植技术和克隆动物(克隆原理:动物细胞核全能性)动物体细胞核移植技术和克隆动物(克隆原理:动物细胞核全能性)动物动物体细胞核体细胞核去核的卵母细胞(减数第二次分裂中期,去核的卵母细胞(减数第二次分裂中期,M中期)中,得到重组细胞,中期)中,得到重组细胞,由重组细胞发育成一个新的胚胎,由新的胚胎发育成动物(要进行胚胎移植)。卵母细由重组细胞发育成
21、一个新的胚胎,由新的胚胎发育成动物(要进行胚胎移植)。卵母细胞质有全能性得以表达的胞质有全能性得以表达的物质和条件物质和条件。且体积大,易操作。克隆动物的遗传特性多数与。且体积大,易操作。克隆动物的遗传特性多数与细胞核的细胞核的供体动物相同(如性别),但卵母细胞的供体动物相同(如性别),但卵母细胞的细胞质基因细胞质基因也有影响。核基因和细胞也有影响。核基因和细胞质基因共同控制。应用:保护濒危动物;克隆组织和器官进行器官移植,避免质基因共同控制。应用:保护濒危动物;克隆组织和器官进行器官移植,避免免疫排斥免疫排斥反应;反应;转基因转基因的的克隆克隆动物的细胞、组织、器官可以作为异种移植的供体。动
22、物的细胞、组织、器官可以作为异种移植的供体。 动物核移植分为动物核移植分为胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植和和体细胞核移植体细胞核移植。胚胎细胞分化程度低,容易恢复全能性。胚胎细胞分化程度低,容易恢复全能性。 (二)动物细胞融合与单克隆抗体(二)动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合也叫动物细胞杂交:结构基础是细胞膜具有动物细胞融合也叫动物细胞杂交:结构基础是细胞膜具有一定的流动性一定的流动性。诱导融合的方。诱导融合的方法与植物类似,另外,还可以用法与植物类似,另外,还可以用灭活的病毒灭活的病毒(如灭活的仙台病毒)做诱导剂。(如灭活的仙台病毒)做诱导剂。单克隆抗体:特异性强、纯度高、灵敏度高的产量高
23、特点和优点。单克隆抗体:特异性强、纯度高、灵敏度高的产量高特点和优点。单克隆抗体的制备:分泌特异抗体的单克隆抗体的制备:分泌特异抗体的效应效应B细胞细胞和骨髓瘤细胞融合,得到杂交瘤细胞,和骨髓瘤细胞融合,得到杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能分泌单一的特异性抗体,又能无限增殖(特点、优点)。两次的筛选:杂交瘤细胞既能分泌单一的特异性抗体,又能无限增殖(特点、优点)。两次的筛选:第一次是用第一次是用选择性培养基选择性培养基将融合的将融合的杂交瘤杂交瘤细胞选择出来(就是细胞选择出来(就是A、B、AA、BB细胞死细胞死亡,而亡,而AB型杂交瘤细胞存活);第二次是将上述杂交瘤细胞进行克隆培养,然后进行型杂交瘤
24、细胞存活);第二次是将上述杂交瘤细胞进行克隆培养,然后进行抗体抗体检测,筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞,得到杂交瘤细胞后,生产单克隆抗体检测,筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞,得到杂交瘤细胞后,生产单克隆抗体的途径有的途径有2条,一:在条,一:在体外体外细胞培养,从细胞培养液中提取单克隆抗体;二:将杂交瘤细胞培养,从细胞培养液中提取单克隆抗体;二:将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖,从小鼠腹水提取单克隆抗体。细胞注射到小鼠腹腔内增殖,从小鼠腹水提取单克隆抗体。单克隆抗体用途的用作体外单克隆抗体用途的用作体外诊断试剂诊断试剂,单克隆抗体与药物结合后,成为,单克隆抗体与药物结合后,成为“生物导弹生
25、物导弹”,借助单克隆抗体的借助单克隆抗体的导向导向作用准确导向作用准确导向 细胞全能性比较:细胞全能性比较: 受精卵(全能)受精卵(全能)胚胎干细胞(多能)胚胎干细胞(多能)造血干细胞、(专能)造血干细胞、(专能)卵卵细胞细胞神经细胞神经细胞 (卵细胞、精子的分化程度较高)(卵细胞、精子的分化程度较高)胚胎工程胚胎工程定义:对动物定义:对动物早期胚胎早期胚胎或或配子配子进行处理,获得胚胎,移植到雌性动物体内生产进行处理,获得胚胎,移植到雌性动物体内生产后代,它的许多技术都在体外完成,如体外受精、早期胚胎的培养、胚胎分割后代,它的许多技术都在体外完成,如体外受精、早期胚胎的培养、胚胎分割等。等。
26、一、精子发生:睾丸的曲细精管。在一、精子发生:睾丸的曲细精管。在初情期初情期(人是青春期,卵细胞在胎儿期)(人是青春期,卵细胞在胎儿期)开始。第一阶段精原细胞开始。第一阶段精原细胞有丝分裂有丝分裂,产生多个精原细胞,染色体复制后成为初,产生多个精原细胞,染色体复制后成为初级精母细胞;第二阶段:初级精母细胞级精母细胞;第二阶段:初级精母细胞减数分裂减数分裂产生产生精子细胞精子细胞 ;第三阶段:尖;第三阶段:尖子细胞子细胞变形变形成精子,细胞核变成精子头部,成精子,细胞核变成精子头部,高尔基体高尔基体变成顶体;变成顶体;中心体中心体变成尾;变成尾;线粒体在尾部变成线粒体鞘;细胞的其他物质浓缩成线粒
27、体在尾部变成线粒体鞘;细胞的其他物质浓缩成原生质滴原生质滴。二、卵细胞发生:在胚胎产生在二、卵细胞发生:在胚胎产生在胎儿期胎儿期性别分化后,在雌性胎儿卵巢内的卵原性别分化后,在雌性胎儿卵巢内的卵原细胞细胞有丝分裂有丝分裂产生多个卵原细胞,并经过染色体复制成为初级卵母细胞,被卵产生多个卵原细胞,并经过染色体复制成为初级卵母细胞,被卵巢的卵泡包围着。减数第一次分裂在巢的卵泡包围着。减数第一次分裂在排卵排卵(即卵泡排出初级(即卵泡排出初级/或次级卵母细胞)或次级卵母细胞)前后完成,进入输卵管。减数第二次分裂是在前后完成,进入输卵管。减数第二次分裂是在精子和卵子结合精子和卵子结合的过程中完成,的过程中
28、完成,产生一个成熟的卵子和第二极体。当在产生一个成熟的卵子和第二极体。当在卵黄膜和透明带卵黄膜和透明带之间看到两个极体时,之间看到两个极体时,标志完成了受精作用。标志完成了受精作用。形成精子的减数分裂是形成精子的减数分裂是连续连续的,精子要的,精子要变形变形。卵细胞减。卵细胞减1在排卵前后,减在排卵前后,减2在受在受精过程中,不连续。精过程中,不连续。排卵排卵是指初级是指初级/或次级或次级卵母细胞卵母细胞从从卵泡卵泡中排出(不是卵泡从中排出(不是卵泡从卵巢排出,进入输卵管。卵巢排出,进入输卵管。三、受精作用:精子在生殖道三、受精作用:精子在生殖道获能获能,在,在输卵管输卵管受精。受精阶段:精子
29、穿越受精。受精阶段:精子穿越放射放射冠冠和和透明带透明带,进入卵黄膜,进入卵黄膜形成雄原核与雌原核形成雄原核与雌原核两个原核结合成合子。两个原核结合成合子。1.顶体顶体反应,穿越放射冠反应,穿越放射冠穿越透明带,接触卵黄膜(顶体酶溶出一条通道),发生穿越透明带,接触卵黄膜(顶体酶溶出一条通道),发生透明带反应透明带反应,接触卵细胞膜后,产生,接触卵细胞膜后,产生卵细胞膜反应(卵细胞膜反应(第二道屏障第二道屏障)完成受精。完成受精。 个体发育个体发育从受精卵开始,分为胚胎发育(在母体内的发育)和胎后发育。从受精卵开始,分为胚胎发育(在母体内的发育)和胎后发育。四、胚胎发育:受精卵四、胚胎发育:受
30、精卵卵裂卵裂桑椹胚桑椹胚囊胚(开始出现细胞分化,个体较大囊胚(开始出现细胞分化,个体较大的细胞叫的细胞叫内细胞团内细胞团,将来发育成各种组织,外层的叫,将来发育成各种组织,外层的叫滋养层滋养层细胞,发育成细胞,发育成胎膜胎膜和胎盘和胎盘)原肠胚(出现原肠腔,出现内、中、外三个胚层原肠胚(出现原肠腔,出现内、中、外三个胚层胎儿胎儿 五、试管动物(是五、试管动物(是有性生殖有性生殖范畴)主要是范畴)主要是体外受精体外受精和和早期胚胎培养早期胚胎培养。1.体外受精:体外受精:1.精子获能,卵细胞要发育成熟(减精子获能,卵细胞要发育成熟(减2中期)才能完成受精。中期)才能完成受精。2.胚胎早期培养:将
31、受精卵移入胚胎早期培养:将受精卵移入发育培养液发育培养液中培养。当胚胎发育到中培养。当胚胎发育到桑椹胚桑椹胚或或囊胚囊胚阶段,再做阶段,再做胚胎移植胚胎移植或者冷冻保存。或者冷冻保存。3.胚胎移植:移植到同种的、胚胎移植:移植到同种的、生理状态生理状态相同的其他雌性动物体内继续发育。是胚相同的其他雌性动物体内继续发育。是胚胎工程的最后一道工序。为充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力,供体要做胎工程的最后一道工序。为充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力,供体要做超数超数排卵排卵处理,供体和受体要做处理,供体和受体要做同期发情同期发情处理。胚胎移植成功的原因是;处理。胚胎移植成功的原因是;1.哺乳动物哺乳动物同期发情后,供、受体生殖器官的同期发情后,供、受体生殖器官的生理变化生理变化是相同的,为供体胚胎的移入
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