北虫草子实体脂溶性化学成分的GC-MC分析

1、巾国医药导刊14412008年第lO卷第9期(总第62期北虫草子实体脂溶性化学成分的GC-MC分析蔡其辉1,2,田宏现1,2-,刘祝祥1,邓凯东1,侯丽华3,赵刚杰,罗江华t(-吉首大学生物资源与环境科学学院,吉首416000;:湖南林产化工重点实验室天然药物产物研究中心,吉首416000;3怀化食用菌种植基地,怀化418000【摘要】目的:研究北虫草子实体中的脂溶性成分。方法:采取新鲜的北虫草子实体,用低温烘干后,粉碎,分别用乙醚和石油醚(60-90陀回流提取6小时,提取物经浓缩后进行甲酯化,并由GcMs方法对北虫草子实体脂溶性成分进行分析和鉴定。结果:两种提取剂的提取结果基本一致,北虫草子

2、实体乙醚提出物中检测出23个物质峰,鉴定出17种脂洛性成分.主要成分为亚油酸、油酸、棕柏酸、硬脂酸、脱氧麦角甾醇和.反式角鲨烯的相对百分含量分别为37.78%,35.42%,6.67%,9.57%,333%,1.99%。结论:本法简便、快速,灵敏度商,可作为北虫革予实体及含北虫草子实体制剂中脂溶性物质的质量定性定晕研究。【关键词】北虫草子实体;脂溶性成分;气相色谱一质谱联用【中图分类号】R282.74【文献标识码】A【文章编号】10090959(200809一144l加2Determination of Fat-soluble Constituents in Cordyceps Militar

3、isFruitbodies Using GCMCCai Qihull72sTil/i Hong-xianl2'7Lin Zhu-xianl,et81.(1Jishou University0f biological resoul-ce￥and the environment Academy of Sciences Hunan41600,China;2Forest product chemical industry keylaboratory natural medicine Research center of Hunan Jishou Hunan416000,chinaABSTIO.

4、CTObjeeti,ve:To访ves啦ate the fat一luble constituents in Cordyceps nfi|itaris Fruitbodies ruth C,CMS method.Me出od墨:To takethe fresh Cordyceps militaris Fruitbodies,using lowtemperature drying,grinding.Then extracted by petroleum ether or ether in refluxing and;esteried,and inallydetermined using C,C-MC

5、.Resulta:Two kinds d fat-solubh constituents h petroleum ether extract and ether extract辨the阻me,Cordyceps militaris fruitbodies of ether to detect substances-23,identified17kinds of fat-soluble components,mainly includjng oetadecadienoie acid,octadecenoic acid,hexadecanoic acid,oetadecanoic acid,deh

6、ydroergoergosterol,2,6,10,14,18,22一tetmeomhexnene the÷relative percentage of37.78%,35.42%,6.67%.9.57%,3.33%,1.99%。Conclusion:The method is simple,fast,hjgb sensitivity,锄Cordyeel馏militails Fmitbodies ldentificatiOn On the quality.:。KEYwomYsl Cordyceps mditaris Fruitbodies;Fat-solublc comtituela如

7、;GCMC一鬈北虫草(Cordyceps militaris又称北冬虫夏草、蛹虫草、东北虫草等,是寄生在鳞翅目和鞘翅目等昆虫蛹体上的真菌,主要分布在我国东北、华北、西北等地区,华中、华南和西南地区也有发现【l】。北虫草是虫草属的模式种,与冬虫夏草为虫草属的同属异种真菌,两者的化学成分、营养成分和药用功能均非常相似,其主要成分虫草素等含量远高于野生冬虫夏草,而且比冬虫夏草更易于人工栽培,因此被选为冬虫夏草的最佳替代品而进行大量的人工培育Il】。如今,对作为药物和保健食品的北虫草的药化、药理、毒理和毒性等进行了大量的分析和安全评价,证明人工栽培的北虫草无毒副作用,具有明显的镇静、抗疲劳、抗肿瘤、抑

8、制细胞和具有雄性激素样作用,可增强机体免疫功能等【习。因此,北虫草作为药品和保健食品逐渐应用于人们的日常生活。为了进步研究其应用价值,我们于2007年12月一2008年10月在湖南吉首大学生物资源与环境科学学院天然药物产物研究中心实验室采用索氏提取器提取北虫草子实体中脂溶性物质,并用GCMC分析其成分,结果报告如下。1实验部分1.1仪器和试剂GCMSQP2010气相色谱一质谱联用分析仪(日本SHIMADZU公司,配NIST2005标准质谱库和WLEY质谱库。通讯作者无水乙醚、硫酸、甲醇、正己烷、石油醚(60900C、无水硫酸钠(均为分析纯。北虫草子实体由怀化食用菌生产基地生产。1.2GCMC联

9、用条件质谱条件:电离方式:EI;电离能量:70eV;离子源温度:200。C;接口温度:230。E;溶剂切除时间:3min,选取全扫描(SCAN模式时,质量扫描范围为28。600amR。1.3样品处理从培养基上采取新鲜的北虫草子实体,用低温烘干后,粉碎,称取2.09置于索氏提取器中,加无水乙醚回流提取6小时,用无水硫酸钠干燥,得具有特殊香味的金黄色透明液体,浓缩待测。另以石油醚为提取溶剂,操作同上,制样待测。2实验结果北虫草子实体乙醚提取的脂溶性成分和石油醚(60。90提取的脂溶性成分经用1%硫酸一甲醇酯化法诩甲酯化后进行GCMC分析,两种提取物的总离子流图(TIc基本一致。北虫草子实体乙醚提取

10、的脂溶性成分甲酯化(下转1443页万方数据由国医药导刊14432008年第lO卷第9期(总第62期上者逐年增多。笔者认为街头献血比例:逐渐增多以及固定献血者队伍不断强大是无偿献血血液不合格率显著下降的主要原因之一。因为街头献血人群的血液合格率显著高于单位计划献血人群问,笔者未做进一步分析。ALT不合格占血液检测不合格的第一位,占血总量的2.71%,里显著下降趋势(x2=234.1,P<0.01。ALT的升高的原因很多,除病理因素外,与献血者的生理因素和药物因素、饮酒、运动等均有一定关系嗍;另外该站尚未开展对无偿献血者的ALT初筛试验,也是ALT不合格血液较高的原因之一。HBsAg阳性的率

11、为0.82%,占不合格第二位。该站自2002年6月起,对无偿献血者增加了金标法快速筛查HBsAg的试验。阳性率呈显著下降趋势(XZ=62.79,P<0.01。可见,采血前快速筛查HBsAg的试验,是降低无偿献血HBsAg阳性的率的有效途径。抗一HCV阳性率为0.41%,占总不合格的第三位(X:=307.81,P<0.01。梅毒阳性率为0.40%,(X2=829.02,P<0.01,P<0.01。也呈现显著下降趋势,与国内有关报道不一至M,主要是潍坊市固定献血者逐渐增多的原因,笔者未做进一步分析。抗一HIV阳性血液,经山东省艾滋病筛查中心确认4例为抗一HIV阳性。但是5年

12、来共有199个单位血液经本站初筛为抗一HIV阳性而报废。因此提高抗一HIV检测试剂的特异性应引起试剂生产厂家的注意。参考文献1胡立功,操奇谋,徐曲明.19992006马鞍山市献血者血液检测结果分析忉.临床输血与检验,2008;10(2:161究杂志.2005;5(3:2692004;60f1985周宗敏,姚富柱,谢坤华,等.云南昆明血液中心20012002年报废血液对比分析J.临床输血与检验.2004;6(2:1276朱燕霞,郭菲。酉红霞,等.上海市部分县献血者梅毒感染率初步调查分析.中国输血杂志,2004;17(4:269(上接1441页后的总离子流色谱图(11C共检23个峰(具体见图1,经

13、GCMC联用仪标准质谱数据库NIST2005和WLEY的计算机检索,鉴定出其中17种脂肪酸并用面积归一法确定了它们的相对百分含量(具体见表1。严I .,暑.,f_-一.-d-一图1北虫草子实体脂溶性成分GCMS总离子流图3讨论(1研究证明,高级不饱和脂肪酸具有增强人体免疫力、降血脂、抗动脉粥样硬化和抗血栓形成等功效问。由表1可以看出,北虫草子实体中亚油酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸相对含量最高,其中不饱和脂肪酸含量达到74.87%。本研究的结果为北虫草子实体的在药品、保健食品开发与研究领域提供了新的科学依据。(2方法考察:样品用乙醚和石油醚(60。90。C回流提取6小时,延长提取时间其提取率不再改变,故采用提取时间为6小时。(3近年来,也有文献报道51用GCMC方法分析样品中的成分,故本法简便、快速,灵敏度高,可作为北虫草子表1北虫草子实体中脂溶性成分化合物及相对含量实体质量定性定量研究。参考文献intefleukin一10produ