饲料显微镜检与质量控制手册

1、 程序： 1.将 0.1 克试样放在陪替氏培养皿中。 2.加 3-5 滴二甲替甲酰胺氢氧化钾试剂或 Sakaguchi 试剂。 阳性反应： 1.二甲替甲酰胺氢氧化钾试剂：吩噻嗪呈现出绿黄色。 2.Sakaguchi 试剂：吩噻嗪呈现出粉红色。 氨丙嘧吡啶（安普洛里）试验 第一步 第二步 第三步 第四步 第五步 第六步 第一步 注溶液 A 和溶液 B。 第二步 将溶液 A 和 B 混合。 第三步 溶液 A 和 B 的混合液。 第四步 向试样上倒溶液 C。 第五步 将试样的上层清液滗入溶液 A 和 B 的混合液，并混合之。 第六步 阳性反应：溶液呈紫色。 对氨基苯胂酸或对氨基苯胂酸钠试验 第一步

2、第二步 第一步 提取试样（盐酸、亚硝酸钠和氨基磺酸钠）后，加 1 毫升 N-1-萘基乙烯 二胺。 第二步 阳性反应：呈紫色。 杆菌肽和红霉素试验 第一步 第二步 第三步 第四步 第五步 第六步 第一步 试验用试剂。 第二步 用茚满三酮溶液浸湿滤纸，在烘箱中干燥。 第三步 将试样放到滤纸上。 第四步 加醋酸盐缓冲液，再放进烘箱干燥。 第五步 杆菌肽的阳性反应：呈紫粉红色。 第六步 红霉素的阳性反应：呈紫粉红色。 卡巴多试验 第一步(a 第一步(b 第二步 第三步(a 第三步(b 第四步 第五步 卡巴多阴性和阳性反应的比较 第一步 称 1 克试样，往试样上倒 10 毫升溶液 A。 第二步 摇晃烧杯

3、，即成黄色。 第三步 加 20 毫升溶液 B。 第四步 摇晃烧杯。 第五步 卡巴多的阳性反应：溶液呈紫色。 金霉素、土霉素和维生素 A 试验 第一步(a 第一步(b 第一步(c 第二步(a 第二步(b 第三步(a 第三步(b 第四步(a 第四步(b 第一步 用 2-3 滴改进的 Sakaguchi 试剂处理每一试样。 第二步 用低倍数显微镜观察。 第三步 维生素 A 小粒呈现出与金霉素几乎相同的颜色，但保持其球形特征。 第四步 比较同一滴试板上的金霉素、土霉素和维生素 A。 痢特灵和呋喃西林试验 第一步(a 第一步(b 第二步(a 第二步(b 第三步(a 第三步(b 第一步 痢特灵颗粒在 Wi

4、rthmore 溶液中沉降时呈现蓝色踪迹。 第二步 呋喃西林颗粒在 Wirthmore 溶液中沉降时呈现红色踪迹。 第三步 比较同一滴试板上的痢特灵和呋喃西林。 青霉素或普鲁卡因青霉素试验 第一步 第二步 第三步 第一步 将少量试样放入陪替氏培养皿中。 第二步 用 2-3 滴缓冲液润湿试样，加 2-3 滴 Ehrlich 试剂，即呈现浓黄色。 第三步 用低倍数显微镜观察，青霉素晶粒透明，溶于 Ehrlich 试剂。 胡椒嗪试验 第一步 第二步 吩噻嗪试验 用二甲替甲酰胺-氢氧化钾试剂试验的阳性 反应：呈现绿黄色 第一步 用 2-5 滴 1M 氢氧化钠溶液润湿滤纸。 第二步 加 2-5 滴溶液

5、A。 第三步 将试样撒在滤纸上，即呈现亮红色。 用 Sakaguchi 试剂试验的阳性反应：呈现粉红色 维生素的快速检测 这里介绍的检验方法取自文献资料，本人已对其中某些方法作了改进以派作特 定用途。由于维生素有水溶性和脂溶性两类，为了获得满意的检测结果，须用 适当的溶剂将维生素化合物制成溶液。为了使某种维生素的颜色特征明显有别 于其它维生素，应采用多种试剂，一些维生素可用与药物、抗生素及矿物质相 同的试验鉴别出。维生素的细小颗粒与溶剂表面接触的反应区只有针尖大小， 为了观察在如此之小的面积上所显现的颜色，要使用解剖显微镜。记录下颜色 反应的形式。积累一些经验后，显微镜检人员就有能力判别色影的

6、特点，从面 增强其应用这些检测方法的信心。 这类检测方法的基本原理包括两种已使用成功了的试剂面。一种是将滤纸放入 小陪替氏培养皿，用试剂润湿，再将饲料撒在湿的表面上。这种方法显现出较 大的表面积，容易用显微镜仔细观察。另一种可采用白瓷滴试板，试剂可直接 混合在其空穴中。然后将试样直接撒在试剂表面上。使用带滴管的小试剂瓶便 于操作。不管哪种检测方法都简单迅速。 维生素、药物和抗生素大多都存在于同一饲料或预混料中。附表介绍了用相同 试剂检测的各种维生素、药物和抗生素所发生的反应。反应方式应记录下来， 并与表中所列的对比。 维生素 A 和红、黄卡诺费尔（carophyll） 试剂： 1.Sakagu

7、chi 试剂：将 1 克硼酸溶解于 100 毫升 80的硫酸中。 程序： 1.将 0.2 克试样或饲料放在白瓷滴试板上。 2.加入 10 毫升 Sakaguchi 试剂。 3.维生素显现深褐色。如果维生素 A 已陈，有时需将饲料即维生素样品粉碎以 便把维生素 A 从小颗粒中释放出来。 4.红卡诺费尔显现深绿色。 5.黄卡诺费尔显现深紫罗兰色。 维生素 A 和红、黄卡诺费尔 采用 Sakaguchi 试剂检测产生的阳性反应：维生素 A 显深褐色，红卡诺费尔显 深绿色，黄卡诺费尔显深紫罗兰色。 核黄素（维生素 B2） 试剂： 1.乙二胺（试剂级） 2.Sakaguchi 试剂：与维生素 A 检测所

8、用相同。 程序： 1.样品制备与抗坏血酸检测一项所述相同。 2.将 1 克样品放入白瓷滴试板。 3.用乙二胺或 Sakaguchi 试剂浸湿试样。 4.用乙二胺试剂，核黄素显现出由粉末产生的深黄色踪迹。 5.用 Sakaguchi 试剂；核黄素显现出桔黄色到黄色踪迹。 核黄素检测 核黄素晶粒结构 用乙二胺试剂检测， 阳性反应显现出由粉末产生的深黄色踪迹。 用 Sakaguchi 试剂检测，阳性反应显现出由粉末 产生的桔黄色到黄色踪迹。 抗坏血酸（维生素 C） 试剂： 1.硝酸银酒精溶液：将 3 克硝酸银溶解于 100 毫升乙醇（95）中。 2.四氯化碳或氯仿。 程序： 1.用四氯化碳或氯仿将饲

9、料中的矿物质和有机物浮选分离开来。 2.取 0.1 克矿物质放在白瓷滴试板上。 3.用硝酸银酒精溶液浸湿试样。 4.沉淀物的兰黑色表示有抗坏血酸存在。 抗坏血酸检测 用硝酸银酒精溶液检测，阳性反应产生兰 黑色沉淀物。 维生素 K(甲萘醌和亚硫酸氢钠甲萘醌 试剂： 1.乙二胺（试剂级） 2.四氯化碳 程序： 1.试样制备与抗坏血酸检测相同。 2.取 0.1 克样品放在白瓷滴试板上。 3.用乙二胺试剂将样品浸湿。 4.甲萘醌显现不明亮灰绿色到黄褐色。 5.亚硫酸氢钠甲萘醌显现橄榄绿色。 甲萘醌和亚硫酸氢钠甲萘醌检测 用乙二胺试剂检测甲萘醌，阳性反应显现 不明亮灰绿色黄褐色。 用乙二胺试剂检测亚硫酸氢钠甲萘醌，阳性反应显现橄榄绿色。 注意： （JSK 溶液的替代品） 我们收到许多读者提出的对 JSK 溶剂混合液的需求。由于中国使用者很难从泰 国进口该溶液，所以我们已请美国加利福尼亚州大学的普兰· 沃拉教授建议代替 JSK 的其它溶剂。下面是沃拉教授