第4章 紫外-可见分光光度法

1、1，cchhEE，注：光基态激发态释放能量发光hMM*发射光谱激发态光基态吸收辐射能量*MhM吸收光谱盛放试样的吸收池由光透明的材料制成。分为：盛放试样的吸收池由光透明的材料制成。分为：紫外光区工作时，采用石英材料紫外光区工作时，采用石英材料可见光区工作时，采用硅酸盐玻璃可见光区工作时，采用硅酸盐玻璃红外光区工作时，可根据不同的波长范围选用不同红外光区工作时，可根据不同的波长范围选用不同材料的晶体制成吸收池的窗口材料的晶体制成吸收池的窗口 能级：电子能级、振动能级、转能级：电子能级、振动能级、转动能级动能级 跃迁：电子受激发，从低能级转跃迁：电子受激发，从低能级转移到高能级的过程移到高能级的过

2、程平转振电分EEEEEchhE能级差转振电分EEEE转振电EEE远红外吸收光谱红外吸收光谱可见吸收光谱紫外转振电mevEmevEmevE2525005. 0005. 025. 125105. 025. 106. 0201 预备知识：预备知识：1. *跃跃迁：迁： 饱饱和和烃烃（ （甲甲烷烷，乙，乙烷烷） ） E很高，很高， n * * n *backback蓝移蓝移红移红移back 描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系lCEIIBeerLamber0lg定律表达式CABeerlALamber定律：定律：lCETAIITlg0吸

3、光度透光率lECAT1010或讨论讨论： ：吸光系数EcbaAAAA总1吸光系数的物理意义：吸光系数的物理意义： 单位浓度、单位厚度的吸光度单位浓度、单位厚度的吸光度lCAE3吸收光吸收光谱谱（吸收曲（吸收曲线线）：）：A%1110cmEM%11cmE4吸光度吸光度测测量的条件量的条件选择选择： ：下测定须在lCAE较小的A左右测定灵敏度高Amaxmaxmaxmax样参调节光路光学性质和厚度相同样品池样品溶液，参比池空白溶液样品池参比池配制样品的溶剂空白溶液ATA%1000依据依据Beer定律，定律，A与与C关系应为关系应为 经过原点的直线经过原点的直线偏离偏离Beer定律的主要因素表现为定律

4、的主要因素表现为 以下两个方面以下两个方面lCEA UV-Vis spectrophotometer1光源：光源：2 单单色器：色器：包括狭包括狭缝缝、准直、准直镜镜、色散元件、色散元件 棱镜棱镜对不同波长的光折射率不同对不同波长的光折射率不同色散元件色散元件 分出光波长不等距分出光波长不等距 光栅光栅衍射和干涉衍射和干涉 分出光波长等距分出光波长等距钨灯或卤钨灯钨灯或卤钨灯可见光源可见光源 3501000nm氢灯或氘灯氢灯或氘灯紫外光源紫外光源 200360nm光电池光电池光电管光电管光电倍增管光电倍增管二极管阵列检测器二极管阵列检测器backmin%11maxmax，shcmElECA定量

5、依据：要求单色光前提：iECAmLgCigW 求含样过程：已知稀释)/(/)(lEAmLgCi100/lALmolCi/%100%样CCiimLgmLgCi/1045. 2100/1045. 21207507. 053mLgC/105 . 210010100105 . 252样%0 .98%1001050. 21045. 2%100%5512样CCBi条件前提：固定仪提：固定CACKA样样同上条件固定条件查得测定样品曲线分别测定配制标准系列过程：CAACAmLmgmLmLmLmg250 . 32550/200. 0样品标样分别移取 注：当样品溶液与标准品溶液的注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释

6、倍数相同时稀释倍数相同时标样与样品浓度相近；截距为固定仪器和测定条件；前提：0标样和分别测定一定过程：AASiSiAACCsCiCCSiSiAAmm%100%mmiimLgCCii/1 .98518. 0508. 0100010000.25105 . 2%1 .98%100%12标示量标示量iCBcbaAAAA总定量依据：aaaaaaEACCEA1111由bbbbbbEACCEA2222由bbaaAEAE222111；测定；测定过程：babaaaAEEAE2222111；和测定；测定过程：aaaaaaEACCEA1111由bbaababaCECEAAA22222由baababECEAC2221

7、、分光光度法测定海洋生物样品中的痕量铝、分光光度法测定海洋生物样品中的痕量铝2、分光光度法测定海洋河弧菌、分光光度法测定海洋河弧菌510 脂多糖脂多糖3、海水和海洋沉积物中总磷的测定、海水和海洋沉积物中总磷的测定4、古糖酯的分光光度法测定、古糖酯的分光光度法测定5、海洋监测石油标准物质的研制、海洋监测石油标准物质的研制6、应用分光光度法监测大连湾海水、应用分光光度法监测大连湾海水COD7、紫外分光光度法测定水中油含量、紫外分光光度法测定水中油含量8、紫外分光光度法测定贻贝体内石油烃的方法研究、紫外分光光度法测定贻贝体内石油烃的方法研究思考题思考题1、分子光谱是如何产生的？、分子光谱是如何产生的

8、？2、试说明有机化合物紫外光谱产生的原因。有机化合物紫外光谱的电、试说明有机化合物紫外光谱产生的原因。有机化合物紫外光谱的电子跃迁有哪几种类型？吸收带有哪几种类型？子跃迁有哪几种类型？吸收带有哪几种类型？3、在分光光度法测定中，为什么尽可能选择最大吸收波长为测量波长？、在分光光度法测定中，为什么尽可能选择最大吸收波长为测量波长？4、紫外、紫外-可见分光光度计由哪几个主要部件组成？可见分光光度计由哪几个主要部件组成？5、CH3Cl分子中有几种类型的价电子？在紫外光辐照下可能发生何种分子中有几种类型的价电子？在紫外光辐照下可能发生何种类型的电子跃迁？类型的电子跃迁？6、某酮类化合物，当溶于极性溶剂

9、中时，溶剂对、某酮类化合物，当溶于极性溶剂中时，溶剂对n *和和 * 跃跃迁各产生什么影响？迁各产生什么影响？ 7、将下列吸光度值换算为百分透射比。、将下列吸光度值换算为百分透射比。 0.010；0.050；0.300；1.00；1.708、将下列吸光透射比换算为吸光度。、将下列吸光透射比换算为吸光度。 5.00%；10.0%；75.0%；90.0%；99.0%9、已知、已知KMnO4的的545=2.2103Lmol-1cm-1，计算：，计算： （1）此波长下质量分数为）此波长下质量分数为0.002%的的KMnO4溶液在溶液在3.0cm吸收池中的吸收池中的透射比。（透射比。（2）若溶液稀释）若

10、溶液稀释1倍后，其透射比是多少？倍后，其透射比是多少？10、有两份不同浓度的某一有色配合物溶液，当液层厚度均为、有两份不同浓度的某一有色配合物溶液，当液层厚度均为1.0cm时，时，对某一波长的透射比分别为对某一波长的透射比分别为：（：（a）65%;(b)41.8%。求：（。求：（1）两份溶）两份溶液的吸光度；（液的吸光度；（2）如果溶液（）如果溶液（a）的浓度为）的浓度为6.510-4molL-1，求溶液，求溶液（b）的浓度；（）的浓度；（3）计算在该波长下有色配合物的摩尔吸光系数。）计算在该波长下有色配合物的摩尔吸光系数。11、强心药托巴丁胺（摩尔质量为、强心药托巴丁胺（摩尔质量为270）在）在260n