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文档简介
1、*医院*附属医院检验科标本采集手册编制人:*审核人:*发布日期:2015年06月01日实施日期:2015年06月1日【重要提示】检验结果,至关重要的是必须依赖于检测标本的高质量。所以我们要将每一份标本视为无法重新获得的唯一标本,必须小心细致地采集、保存、转运、检测。依据医学实验室(ISO15189:2007)认可文件分析前程序定义:按照时间顺序,从临床医生开出医嘱申请单开始,到分析检验程序开始前的全过程:包括检验申请、患者准备、原始样品的采集、运送到实验室并在实验室进行传输。从定义的过程中不难看出,大部分工作都是患者、医生、护士、运输人员在实验室外完成的,对于分析前质量控制工作至关重要,过程中
2、极易出现的问题,就是标本质量不符合要求,为此实验室工作人员很难控制。获得高质量标本:临床医生:主动明确告知患者如何进行配合。护理人员:严格按照标准规范采集标本。运输人员:及时安全转运、送达标本。前言随着检验医学快速发展、检验方法的不断改进,检测项目和检测结果的针对性、可靠性、有效性的不断提高,从而极大的丰富和满足了临床诊断与治疗评估对检验的需要。同时检验分析前的各种影响或干扰因素相对增多,对检测标本的留取与收集也提出了更高的要求。为此向医护人员提供以下标本采集规范。而患者也必需了解留取标本的基本知识,遵照医嘱,配合医护人员,使检验结果更加准确可靠,有效地服务临床工作。我们真诚的希望医护人员在临
3、床诊疗工作中发现问题,及时联系共同解决。同时我们也希望以此手册与临床交流沟通,不断地改进检验科各实验室质量控制工作,使标本的采集标准化、规范化,实现检验分析前各类影响因素的最小化,为临床医护人员、患者提供高质量的服务。*医院*附属*医院)检验科标本采集手册使用说明医护人员使用本手册前,请仔细阅读以下内容:检验科奉行“规范、准确、及时、领先”的质量方针,按照卫生部医疗机构临床实验室管理办法和ISO15189的要求进行全方位的改革,在不断听取临床意见的基础上,逐渐形成我科的服务特色:1、检测报告实现电子化(个别特殊项目除外)。2、常规检测在下午5点之前发报告,急诊标本按规定时间发报告,检测结果可到
4、HIS系统中查询,手工项目和特检项目的检测/报告时间请参阅本手册“附录2”。3、上班时间各专业咨询电话为临床提供检验结果的咨询、解释服务。4、为保证生物安全,急诊手术建议术前抽血送检输血四项,24h之内报告结果。5、检验科接受临时追加项目的申请,需与检验科联系。说明1、手册中“报告时间”指检验科收到标本至检测报告发出时间。2、标本采集运送直接影响检测结果的准确性,请严格遵循本手册。3、标本采集时间有助于分析、解释检测结果,请尽量准确。4、米集标本的容器一定要正确。附:检验科服务电话检验科各部门电话急诊检验电话门急诊组*临床检验组*急诊(中午)*生化检验组*免疫检验组*急诊(晚班、节假日)*微生
5、物检验组*其余上班时间急诊咨询请与各专业组联系目录前言3标本采集手册使用说明4目录51 标本采集与送检基本流程71.1 填写申请单或开电子医嘱71.2 生成条形码(原始样品标识)71.3 患者准备71.4 容器准备81.5 采集原始样品101.6 原始样品采集者身份标识121.7 标本运输121.8 接收与拒收131.9 拒收不合格标本的处理141.10 已接受标本的检验141.11 因分析失败而需再检标本处理141.12 检测后标本存放141.13 追加检测项目及时间限制1551.14 已测标本处理161.15 报告发布161.16 服务承诺172 标本采集、保存、送检的基本要求172.1
6、血液标本172.2 尿液标本192.3 粪便标本212.4 痰液标本212.5 阴道分泌物标本222.6 关节腔积液标本222.7 唾液标本222.8 细菌培养标本232.9 骨髓细胞学标本262.10 分子生物学标本293 各种标本的采集313.1 临检标本采集313.2 生化标本采集453.3 免疫标本采集493.4 微生物标本采集513.5 细胞分子遗传学检组标本采集694 影响分析前质量控制主要因素734.1 患者和标本采集者准备734.2 需要考虑的生物因素和药物干扰774.3 检验分析前质量控制存在的问题与对策815 附录855.1 检验项目采集容器、报告时间一览表851 标本采集
7、与送检基本流程1.1 填写申请单或开电子医嘱临床医生须熟知检验项目的临床意义。住院部:医师开出电子医嘱;门急诊:医师开出电子申请单。医嘱/申请单应含但不限于以下信息:门诊号或住院号、患者的姓名、性别、出生日期/年龄、科室、床号、临床诊断、特殊检验注意事项、申请检查项目、标本类型、申请时间、医生姓名等。1.2 生成条形码(原始样品标识)1.2.1 临床医护人员必须根据医嘱/检验申请单检验项目,做好患者准备,生成条形码。1.2.1.1 病房条形码应含有以下信息:住院号、患者姓名,性别、年龄、科室、床号、条码号,检验项目。1.2.1.2 门诊条形码应含有以下信息:病员号、患者姓名,性别、年龄、条码号
8、、检验项目、科室。1.2.2 条形码必须清晰,纵向粘贴在对应的真空采血管(见附录1)上,具体以覆盖住原标签为准,并留有一定的透明区(如左图),以观察标本状况用。病人的姓名端向上(如右图),条码区的任何区域不得被覆盖,禁止在条码上涂写,必须保持条码的完整和清晰。1.3 患者准备1.3.1 住院病人静脉血标本原则上应清晨空腹抽取。1.3.2门诊病人应避免疾走、跑步等剧烈运动,并应静坐半小时以上采集标本。1.3.3 采血前一天起忌用烟、酒、茶、咖啡,并应尽可避免使用任何药物,不能停用的药物应予注明。如抗生素、皮质激素、维生素及其他影响代谢或干扰测试反应的药物,以便解释结果时参考。1.3.4 血清脂质
9、或脂蛋白测定应在空腹1214小时采集血液标本。1.3.5 为提高对糖尿病筛查和诊断的敏感性,测定早餐后2小时血糖优于空腹血糖,糖尿病治疗监测和疗效评价,有时须分别测定空腹和餐后血糖。1.3.6 有些特殊试验如外周血微丝蝴检查、肌酊清除率、尿成分定量分析等,请参考本手册中标本采集要求进行病人准备。1.4 容器准备1.4.1 静脉血为推进检测技术的准确及快速化,真空采血管的临床应用,已成为采集血液标本的主要方式。采血管中添加分离胶、促凝剂,缩短了血液凝固时间,血清分离的效果好,缩短了报告结果的时间,同时也减少了交叉污染等生物安全隐患,规范了采血技术,提高了检测标本质量,方便了医护人员及患者。1.4
10、.1.1 真空采血管的种类真空采血管添加剂包括多种成分,如抗凝剂、促凝剂、分离胶等,其品种、性能、浓度直接影响血样的性状和检测结果。真空采血技术则在品种、浓度方面做到规范一致,并能长期维持其有效性,使添加剂对检测结果的影响降到最小。由于血液分析的多样性,故抗凝剂的使用种类较多,抗凝及促凝原理,效果也不一样,我科常用的有如下几种:管帽颜色添加剂适用范围规格(ml)淡紫红EDTA-K2血常规等2*蓝枸檬酸钠凝血机制1.8.黑枸檬酸钠血沉1.6黄分离胶/促凝剂血生化、免疫3.红无分子生物学及其它3-51.4,1.2真空采血管使用中应注意的几个问题a)真空采血管的选择:按检验项目的要求选择相应的真空管
11、,这点至关重要。b)采血顺序:为血清管(红色、黄色、粉红色帽)一枸檬酸钠管(蓝色帽)一EDTA管(紫色帽)一血沉管(黑色帽)。主要原因是第一管内往往含有组织液,易造成凝血,不适于做血凝测定,当该患者不需采血清管标本时,应先采其它抗凝管,再采蓝色管。c)标本采集:取血时患者应松弛,环境温暖,防止静脉挛缩,束膊时间不可过长,禁止拍打手臂,否则可造成局部血液浓缩或激活凝血系统。观察采血是否顺利,采血量是否符合要求。采集后要充分混匀,否则抗凝剂将达不到抗凝效果,血液凝固后将严重影响检测结果。d)血液与抗凝剂的比例:抗凝剂在血标本中的绝对含量可改变血浆中钙离子浓度进而影响实验结果。钙的绝对浓度越高,PT
12、、APTT凝固时间越短。每种真空管按照试管里的添加剂(抗凝剂或促凝剂)都有一定的真空量(试管上有一个黑色方块标志,为该真空管的标定容量),每次采集标本时都要达到标定容量,采集过多过少都会影响检测结果。e)申请单号与试管号的一致性:申请单与标本唯一对应,采集血标本前应粘贴条形码,并确认粘贴牢固,避免标本送检过程中脱落。f)血标本采集后,绝不可将真空管帽与管体分离,避免混淆和氧化。1.4.2 尿液1.4.2.1 住院患者带胶盖的塑料尿杯。1.4.2.2 门诊患者带胶盖的塑料尿杯。1.4.3 粪便1.4.3.1 住院患者带胶盖的塑料便杯。1.4.3.2 门诊患者带胶盖的塑料便杯。1.5 采集原始样品
13、1.5.1 采集静脉血1.5.1.1 遵照医嘱/申请单作好样品采集前所用的真空采血管以及消毒器材、一次性采血针等备用。采血前应向患者作适当解释,以消除疑虑和恐惧。如遇患者采血后发生晕厥,可让患者平卧,通常休息片刻即可恢复,必要时可通知急诊科医生诊治。1.5.1.2 采集部位:通常采用肘部静脉,如肘部静脉不明显时,可改用手背静脉或内踝静脉,必要时也可从股静脉采血。小孩可用颈外静脉采血,但有危险性,以少用为宜。1.5.1.3 严格按照无菌技术操作(除按规定穿戴工作服外,还应穿戴一次性手套和口罩),防止患者采血部位感染,保证一人一针,杜绝交叉感染。1.5.1.4 使用真空采血器采集,当采血针穿刺进入
14、血管后,由于采血管内的负压作用,血液自动流入采血管内;整个采血过程无血液外溢和污染。1.5.1.5 如果有血标本外溢应立即对其用500毫克/每升安尔碘消毒处理。1.5.1.6 样品采集过程中,对所使用的采集材料应妥善处置,严格执行无菌操作,使用合格的材料,使用前进行严格检查,保证安全;1.5.1.7 静脉采血时,止血带压迫时间宜小于1min,若止血带结扎超过2min,大静脉血流受阻而使毛细血管内压上升,可有血管内液与组织液交流,能使相对分子质量小于5000的物质溢入组织液;随着压迫时间的延长,局部组织发生缺氧而引起血液成分变化渐大,检查结果时出现不应有的增高或减低。1.5.1.8 标本采集后,
15、应立即将抗凝标本轻轻颠倒混匀数次,再次核对患者姓名和号码。1.5.1.9 为保证检测结果准确,禁止在静脉输液同侧臂或输液三通处进行采血。1.5.1.10 样品采集过程完成后,用过的一次性采血针应弃于专用利器盒,具他废弃物应放在固定的医用垃圾箱内,决不能任意丢弃,污染环境对所使用的采集材料应及时、妥善处置,保证环境和人员安全。1.5.2 采集末梢血1.5.2.1 采集过程门诊患者由检验科人员收取检验申请单。1.5.2.2 采集部位通常采用无名指,婴幼儿手指太小可用大拇趾或足跟采血。末梢血采血法操作方便,但血循环较差,受气温影响较大,检查结果不够恒定,特别是冬季波动幅度更大,一般情况下不宜使用。1
16、.5.2.3 采血时患者应松弛。1.5.2.4 采血人员应技术熟练,“一针见血”,并避免过度挤压,否则将影响检测结果。1.5.2.5 标本采集后,立即将抗凝标本轻弹或吹吸混匀数次。最后再次核对病人姓名和号码。1.5.2.6 用过的一次性采血针、毛细吸管应弃于专用利器盒,其他废弃物应放在固定的医用垃圾箱内,决不能任意丢弃,污染环境。1.5.2.7 严格按照无菌技术操作(除按规定穿戴工作服外,还应穿戴一次性手套和口罩),防止患者采血部位感染,保证一人一针,杜绝交叉感染。如果有血液标本外溢应立即对其用75%乙醇溶液消毒处理。样品采集过程中,对所使用的采集材料应妥善处置,严格执行无菌操作,使用合格的材
17、料,使用前进行严格检查,保证安全。样品采集过程完成后,对所使用的采集材料应及时、妥善处置,保证环境和人员安全。1.5.2.8 皮肤采血时,应尽量避开有炎症、化脓、冻伤等皮肤损害部位处采血。皮肤出汗时,应先用干棉球擦干。以免血液稀释。1.5.2.9 采用末梢血时,不要用力挤压皮肤,血液应自然流出。1.5.3 米集尿液标本尿液标本可在临床医护人员的指导下,由患者本人或家属或其授权人员采集。必要时(如需采集导管尿、穿刺尿等)由有资质并经过培训的临床医护人员采集。采尿时,应避免经血、白带、精液、粪便等混入,此外还应注意避免烟灰、糖纸等异物混入。应根据不同实验要求,留取不同种类的尿液标本、不同的取样方式
18、和尿量。标本留取后,应及时送检,以免细菌繁殖、细胞溶解等。其它按照“标本采集、保存及运送的基本要求中尿液标本”执行。1.5.4 采集粪便标本1.5.4.1 取少量标本(蚕豆大小)放于塑料容器内加盖;常规检查选取有粘液、脓血等病变成分的粪便;外观无异常及粪便潜血检测标本须从表面、深处多处取材。1.5.4.2 应避免月经血、尿液、消毒剂及污水等污染粪便标本。1.5.5 采集浆膜腔积液标本1.5.5.1 浆膜腔积液标本一般由医护人员采集。浆膜腔积液采集一般分别行胸腔穿刺术、腹腔穿刺术,心包腔及关节穿刺术采集标本。样品采集过程完成后,用过的一次性注射器应弃于专用利器盒,其他废弃物应放在固定的医用垃圾箱
19、内,决不能任意丢弃,污染环境对所使用的采集材料应及时、妥善处置,保证环境和人员安全。1.5.5.2 为防止标本细胞变性、出现凝块或细菌破坏溶解等,送检及检查必须及时。为防止凝固,应在存放标本的容器中加抗凝剂。可用肝素10U或用100g/L浓度的EDTA溶液,其与标本量之比为1:10。理学检查和细胞学检查宜采用EDTA抗凝。1.5.6 采集脑脊液标本1.5.6.1 脑脊液标本由临床医师进行腰椎穿刺采集,必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。穿刺后应由医师做压力测定,正常脑脊液压力卧位为0.781.76kPa;儿童为0.41.0kPa。待压力测定后将脑脊液分别收集于3个无菌小瓶(或试管)中,每瓶1
20、2ml即可,第一瓶做细菌学检查,第二瓶做生化或免疫学检查,第三瓶做细胞计数。1.5.6.2 样品采集过程完成后,用过的一次性注射器应弃于专用利器盒,其他废弃物应放在固定的医用垃圾箱内,决不能任意丢弃,污染环境对所使用的采集材料应及时、妥善处置,保证环境和人员安全。1.6 原始样品采集者身份标识:标本采集后,采集者对所采集的标本进行电脑登记(通过扫描条形码录入电脑),以记录下标本采集时间和采集者的身份。1.7 标本运输1.7.1 采集标本的护士将已进行电脑登记的标本交给护工,然后严格按照标本运输要求将标本送至检验科,再在检验科标本接收处的电脑上扫描标本条形码(或由检验科标本接收人员扫描),以记录
21、检验科接受标本的时间。1.7.2 运送标本必须在安全、密闭的条件下进行,严防溢出,溢出后应立即对环境进行消毒处理。1.7.3 对有传染性的血液标本运送以确保不污染环境和保护人员的安全为原则。1.7.4 在标本送至检验部门之前所发生的一切安全问题和影响检测结果的问题,均由标本送检人员负责。1.8 接收与拒收1.8.1 合格标本的标准1.8.1.1 检验申请单(纸质或电子)应包含下列内容:患者姓名、性别、年龄、科别、床号、病案号、申请日期、标本类型、标本采集日期和时间、及申请检验的实验项目,接受标本时,电脑中须记录接收标本日期和时间。内容不全时住院患者以病案号为唯一识别,门诊患者以姓名和条形码为唯
22、一识别。1.8.1.2 标本容器标识应与患者姓名检验申请单的内容一致。1.8.1.3 标本种类、采集量符合所申请实验的要求。1.8.1.4 标本及时送检并实施了相应的正确保存措施。1.8.1.5 采集标本的过程,符合实验要求。1.8.1.6 合格的标本接收时,应对所接收的标本进行登记,包括患者姓名、科室、标本的类型、检验项目及接收标本日期和时间。1.8.2 拒收标本的标准1.8.2.1 检验申请单填写的内容与标本容器标识不一致、涂改、信息不完整、无明确标识、不能识别者;1.8.2.2 标本类型采集错误。1.8.2.3 标本送检超过送检要求时间。1.8.2.4 标本量过少,婴幼儿、严重烧伤等特殊
23、情况除外。1.8.2.5 送检的检验申请单和容器沾有污物。1.8.2.6 标本出现凝血、溶血、脂血。1.8.2.7 容器破裂、标本外溢者。1.8.3 不合格标本产生的常见原因1.8.3.1 未询问病人姓名,未核对标签,采错标本。1.8.3.2 在输液时抽血,造成血样污染或被稀释:由于前臂静脉存在广泛联系,同一手臂一侧输液另一侧抽血会污染,输液及输血的针头或滞留管内采血都会造成污染并稀释血样。1.8.3.3 抽血时压脉带使用时间过长,病人攥拳太紧,部分抽血困难,采血后未卸下针头直接快速注入试管,甚至注入气泡,造成溶血,这些都将影响检测结果。1.8.3.4 抽血量少或量不准,需要加抗凝剂的标本未按
24、血液和抗凝剂比例抽血,甚至没有及时颠倒混匀,造成标本明显凝固而失效。1.8.3.5 错过最佳采血时间:如血培养应在抗菌药物应用前或无法停药时下次用药前并在发热时采集,且需多次采集。1.8.3.6 尿液留取时间过长,有效成分已分解,或混入其它分泌物。1.8.3.7 粪便标本未及时送检,或未使用便盒容器。1.9 拒收不合格标本的处理1.9.1 不合格标本,检验科应对标本进行登记(LIS记录),包括标本的姓名、科室、标本的类别、检验项目及时间等。1.9.2 拒收标本通知临床医生或护士。1.9.3 如果特殊情况下,接收了不合格标本,检验报告单中必须注明标本不合格的原因,在结果解释时,必须考虑其对结果的
25、影响。1.10 已接受标本的检验根据各标本的检验目的分配到各专业组进行检验1.11 因分析失败而需再检标本处理标本分析失败导致检验结果不能发布或分析结果与临床诊断明显不符合时,应及时对原始样品做重复检验。如果复检结果仍不能发布的,应及时与临床联系,告诉其情况,共同分析原因。1.12 检测后标本存放检验科在一定时间内保存已检验过的样品(加盖),以备复查和必要时核查。临检室:血常规标本28c保存2天胸腹水、CSF标本28c保存2天尿液、粪便及其它体液标本不保存血凝标本28c保存2天免疫室:-20C保存1月28C保存3天28C保存3天28c保存3天28C保存3天不保存HIV检测标本其它标本生化室:微
26、生物:ICU病房及新生儿室的痰标本脑脊液、胸腹水等无菌体液其它标本1.13 追加检测项目及时间限制1.13.1 在标本量足够和被分析物稳定的情况下,检验科提供临时追加检测项目服务。临床医生首先将追加项目电话通知检验科。1.13.2 若标本量足够且在追加时限内,医生开出医嘱,电话将条码通知到检验科。1.13.3 若标本量不足或已超过追加时限,需重新采集标本。特殊情况下必须使用原标本时,检验科将在报告单备注中注明对结果的影响。1.13.4 追加项目的时间限制如下(以下时间均从标本送达检验科开始计算):1) 微生物室微生物学检测强烈建议采集新鲜标本。仅在特殊情况下(如标本难以获取时)可以追加项目。标
27、本送达实验室未超过1小时,按临床要求追加。超过1小时,则只能增加涂片染色、真菌培养以及抗原检测等项目。2) 免疫室免疫检验项目在3天内可追加,但其滴度或者效价有所改变,因此结果仅供参考,并在备注中注明。3) 生化室若标本分离效果好(分离胶将血清和血块分隔开了),24小时内可追加所有项目。若标本分离效果不好(分离胶没将血清和血块分隔开),血糖和血钾在4小时内可以追加,其他检测项目在12小时内可追加。4) 临检室网织红细胞和疟原虫在4小时内可追加。其他检测项目不能追加,必须重新采集标本。5) 血栓与止血凝血常规和DIC相关检查在4小时内可追加。凝血因子及抗凝、纤溶系统建议采集新鲜标本。1.13.5
28、 追加附加检测项目方式1.13.5.1 临床医护电话通知检验科相关专业组/室,双方确认后对该标本进行附加检测;1.13.5.2 临床医师尽快开电子医嘱,打印条形码并送达检验科相关专业组/室;1.13.5.3 专业组/室收到条形码后立即核对“电话通知”内容,准确无误后方可发送检验报告。1.13.6 检验科追加标本采集的需求1.13.6.1 在不可预知的条件下,可能会有部分标本因分析失败而需重新进行检验,或对同一原始样本进一步检验造成标本量不足。1.13.6.2 此时对于住院病人,实验室应通知相关医生,详细说明情况,要求重新采集标本。1.13.6.3 对于门诊病人,则应尽快与病人取得联系,说明情况
29、后重新采集。1.13.6.4 若已错过采集时机(如已用药),则由医生决定是否有继续采集标本的必要。1.14 已测标本处理检验过的标本和标本污染的各种废物,放入指定医疗垃圾桶,由医院环卫人员统一收集后,统一处理。1.15 报告发布1.15.1 检验科所有报告均以发布后的最终报告为惟一报告。1.15.2 普通检验结果收到标本后按附录2中“报告时间”栏中规定的时间内发布报告。1.15.3 如遇设备故障、维修,标本检测适当后延,并及时通知临床医生。1.15.4 检验申请单及检验结果记录至少保存一年。1.16 服务承诺1.16.1 工作认真、负责、谦虚、热情、耐心,对临床或患者提出的意见和建议及时整改、
30、反馈、解释。1.16.2 特殊检查项目或批量的体检须提前与检验科预约,以便进行人员和设备的准备。1.16.3 紧急情况,检验科可先接收标本进行检测,在2小时内申请医生补录医嘱或电话申请及条形码。声明:未经检验科登记、允许,检验科对所有外送检验标本的运送、保存、取回、报告单发放、结果解释、数据复检及录入电脑等不负任何责任。2 标本采集、保存、送检的基本要求标本采集是直接关系检验结果的基本要素,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备、高水平的检验人员也难以弥补采集标本时引入的误差、甚至错误。标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种外界因素的影响,可能使检验结果受或大或小的误差
31、,因此必须正确掌握标本保存和运送。2.4 血液标本采血管分普通管、抗凝管和促凝分离胶管三类。常用抗凝剂有枸檬酸钠、EDTA-K2等。根据不同的检验项目,选用合适的抗凝剂十分重要。2.4.1 选择抗凝剂注意事项:2.4.1.1 含有K+、Na+的抗凝剂不能用于测定K+、Na+的标本。2.4.1.2 EDTA抗凝剂不能用于测定Ca2+的标本,因为Ca2+可与它们形成不溶性物质。2.4.1.3 使用抗凝剂要注意血与抗凝剂的比例,如血沉取109mmol/L的枸檬酸钠0.4ml,抽1.6ml血;凝血机制取0.2ml,抽1.8ml血;血常规用EDTA抗凝管抽2.0ml血等。2.4.2 标本采集注意事项2.
32、4.2.1 血常规(全血细胞分析)检验标本:应按抗凝管刻度准确采血至2mL,采血后立即上下颠倒混匀,5-8次,不可用力震荡,采血后应尽快送检(需显微镜观察细胞形态的标本采血后应及时推片固定,因为超过2小时WBC形态发生改变。)2.4.2.2 末梢采血时,务必清洁消毒,待干燥后穿刺,用1次性采血器。婴儿可取自脚后跟两侧处,一般不取手指,采血中不可用力挤压,以免组织液混入血液,使血液易于凝固和稀释,出现误差。2.4.2.3 凝血检测(PT、APTT、TT、F旧、DD)标本,空腹采静脉血(餐后脂血影响检测结果,使因子即活化,导致PT缩短),采血时患者应保持平静状态30min以上(剧烈活动可使因子Vf
33、fl活化,APTT明显缩短)。必须准确采血至刻度线2.0mL。采血后应立即轻轻上下颠倒混匀5-8次,不可有凝块,采血后应尽快送检(必须2h内检测)。2.4.2.4 红细胞沉降率(ESR)检验标本:准确采血至2.0mL刻度线,采血后立即轻轻上下颠倒混合5-8次,应尽快送检。2.4.2.5 如果要求检查疟原虫,静脉血标本应在采集后1小时内制备血液涂片。如果超过一小时,应提示处理时间。问日疟及三日疟应在发作后2小时至10小时左右米血,恶性疟应在发作后20小时米血。2.4.2.6 血清(生化、免疫等)标本,采血后:a)普通管(红帽)采血后标本不需颠倒混合,22-25C(室温)15-30min后可自行(
34、自发)完全凝固,冷藏标本凝集较慢。b)促凝剂管(黄帽)者采血后需立即轻轻上下颠倒混合5-8次使凝集加快。c)应避免溶血,并及时分离血清,如需隔日检验,应密封后冰箱冷藏储存。2.4.2.7 静脉采血时止血带结扎过久,可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加5%,胆红素增加8%。2.4.2.8 采血用针头过细会使血K+升高。2.4.2.9 特别注意采血不能在输液的同侧进行,更应杜绝在输液管内采血,因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高,如输K+、Glu时,可使所测K+、Glu明显增高),或使血液稀释检测结果偏低。2.4.2.10 标本采集
35、前,必须在试管或容器上贴上电子医嘱内容一致的条形码,保证申请单与标本的唯一性识别。2.4.3 多个组合检测项目同时采血时应按下列顺序采血:先采无菌血培养管再采无添加物试管(红帽管、黄帽管)然后采有添加物/抗凝试管,并按以下顺序:先采枸檬酸盐(蓝帽管)再采EDTA乙二胺四乙酸盐(淡紫色帽管)最后枸檬酸盐(黑帽管)当该患者不需采血培养管和血清管(红帽管、黄帽管)标本时,应先采其它抗凝管(淡紫色帽管、黑帽管),再采蓝色管2.4.4 标本保存、运输2.4.4.1 采样后必须立即送检的常规项目:血沉、各种细菌培养,特别是厌氧菌培养。2.4.4.2 采样后0.5h内必须送检的常规项目:血糖、电解质、血液细
36、胞学、体液细胞学等。2.4.4.3 采样后12h内必须送检的常规项目:各种蛋白质类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。2.4.4.4 采样后2h以上才能送检者,则常对标本采取必要的保存手段。对血糖可直接分离血清后冷冻保存;K+必须分离血清后密封28c存放;对其他一般项目,可加盖密封后直接28c存放,但血沉和细胞学检查不能采用此方法。2.4.4.5 标本保存1个月:一般对检测物分离后,-20C存放。2.4.4.6 标本需长期保存(3个月以上者):对检测物分离后(包括菌种)-70C保存,还应避免反复冻融。2.5 尿液标本2.5.1 尿液的收集,根据检验目的,常用如下尿标本:2.5.1.1 首次晨尿:即
37、留取清晨第一次尿,因较浓缩、条件恒定,便于对比,适合住院病人,能真实地反映肾脏病理情况。2.5.1.2 随机尿:不为条件所限,适于门诊、急诊病人,但受多种因素的影响,有形成分的浓度较低。2.5.1.3 午后尿:午餐后2h尿中尿胆原和糖含量高,适于这两种成分的检验,可提高阳性检出率。2.5.1.4 12h尿:头晚8时排空膀胱并弃去此次尿液,再收集至翌晨8时前的全部尿液,适用于Addis尿沉渣计数。2.5.1.5 3h尿:收集清晨58时尿标本,用于1小时尿沉渣计数。2.5.1.6 24h尿:适于代谢产物24h定量测定,如尿蛋白、糖、钠、钾、氯、钙、尿酸等。应准确的收集24h尿液并测尿量,从混匀尿液
38、中采集100200ml送检。收集24h尿液应根据检验目的加入适当防腐剂。2.5.1.7 清洁尿(中段尿、导尿、膀胱穿刺尿等):适于细菌培养,应注意无菌操作。2.5.2 尿液采集方法2.5.2.1 尿液检验最好留取新鲜标本2小时内检查完毕,否则尿液生长细菌、细胞溶解或被污染等,使其中的化学成分发生变化。新鲜晨尿最佳,以清晨第一次尿为宜,较浓缩,条件恒定,便于对比。2.5.2.2 门、急诊患者亦可随机留尿。2.5.2.3 在留取24h或12h尿液时,尿液标本最好至4c冰箱保存,也可根据检测目的加入防腐剂。2.5.2.4 尿中某些化学物质及有形成分不稳定,一经排出后易发生物理、化学变化;而尿中原有或
39、污染的细菌生长也可导致成分改变,如葡萄糖被分解。因此,采集的尿应加盖后立即送检。在采集2h内完成有关检查。2.5.2.5 如不能及时送检或收集较长时段尿样,可采取化学防腐(不能用于微生物检查)、4c冷藏等保存措施;尿样标本冰箱可保存6-8h,但最长不超过8h,因细胞等有型成分会有破坏,会有结晶析出。尿标本不能冷冻,否则会影响某些成分的检测。2.5.2.6 根据不同检测目的选择不同的防腐剂,临床最多用的尿样防腐剂为:甲苯(toluene):常用于尿糖和尿蛋白等化学成分的定性或定量检查,5-20mL/L尿液。2.5.2.7 尿沉渣检查:清晨空腹第一次尿,应在2h内送检。标本置于干燥、洁净的容器尿杯
40、或带胶盖的塑料离心管中,至少10mL。一般情况下,由患者自己采集中段尿。女性患者应清洗外阴部后留取。2.5.2.8 除特殊试验外,晨尿或随机尿要留取中段尿送检。2.5.2.9 女性在经期不宜做尿液检查。2.5.3 尿液采集注意事项2.5.3.1 应用密闭、清洁、干燥一次性容器,防止日照与污染。2.5.3.2 采集尿液量:尿常规与一般定性检查留取尿液约10ml。2.5.3.3 新鲜尿液留取后立即送检。放置4h以上尿中成分可发生变化,如红细胞、白细胞溶解等。2.5.3.4 尿标本要防止月经血、白带、精液、前列腺液、粪便等异物的混入。为此应避免月经期验尿。女性患者先要清洁外阴部,用0.1%高钮酸钾溶
41、液浸过的棉球擦洗外阴部并消毒尿道口。一般检查留取晨起第一次清洁中段尿,作细菌培养者应先用0.1%高钮酸钾溶液坐浴10-15分钟,做尿道口消毒处理并注意无菌操作。2.5.3.5 尿胆原等化学物质因光分解或氧化,需要避光。2.5.4 尿标本的保存尿液排出体外后,逐渐发生物理和化学变化。因此,尿标本收集后应立即检查,不能及时检查或需留取大量标本时,应适当防腐。常用方法有:2.2.4.1冷藏:尿标本放4c冰箱可保存68h,高浓度无定形磷酸盐即使在冷藏情况下也可析出结晶。2.2.4.2化学防腐法:甲苯:用于尿酸、蛋白、钠、钾、氯、钙、磷等防腐,按5ml/L尿加入。2.6 粪便标本2.6.1 通常采集自然
42、排出的粪便。2.6.2 各种检查用的粪便标本中不得混有尿液、消毒剂及其他污染物。2.6.3 采集待检粪便时,应取粘液、脓血等病理部分。2.6.4 留作隐血试验的标本,检查前3日禁食肉类及动物血并禁服铁剂及维生素Co2.7 痰液标本2.7.1 痰液是气管、支气管及肺泡的分泌物,主要是由呼吸道的粘液腺和杯状细胞所分泌的粘液并混有呼吸道的一些脱落物和上呼吸道细菌等组成。检查痰液有助于呼吸系统疾病的诊断和鉴别诊断。2.7.2 留取痰液标本的方法有自然咯痰法、气管穿刺吸取法、经支气管镜抽吸法等。根据检查目的不同采集要求:2.7.2.1 一般检查:以清晨用清水漱口后咯出气管深处的第一口痰为宜;2.7.2.
43、2 作细菌培养,应先用灭菌水漱口,咳痰后置无菌容器及时送检,以免细菌和细胞自溶;2.7.2.3 作漂浮或浓集结核杆菌检查时,需留1224h痰液;对于小儿,可用消毒棉拭刺激喉部引起咳嗽反射,用棉拭子刮取标本送检;2.7.2.4 作24h痰量和分层检查时应咯痰于无色广口瓶中,可加少许石炭酸以防腐;2.7.2.5 作细胞学检查时,嘱病人用力将喉内的头两口痰咳出弃去,然后咳出至少56口痰(总量约5ml左右)送检。2.8 阴道分泌物标本2.8.1 阴道分泌物为女性生殖系统分泌的液体,俗称白带”。妇科医生为患者做妇科检查时,用消毒棉签取少许白带置于试管中送检。2.8.2 取阴道分泌物之前应避免性生活、阴道
44、冲洗和上药。取材后,应立即送检。湿涂片检查阴道毛滴虫时标本应注意保温。2.9 关节腔积液标本在无菌条件下由医生行关节腔穿刺术采集标本,立即送检。标本可分为三份,分别置于:透明玻璃管:观察一般性状和凝固性等常规检查。抗凝管内:进行显微镜检查和化学检查。无菌管内:进行微生物学检查。2.10 唾液标本采集唾液时,应先嘱受试者用温水漱口,漱毕后510min采集。采集时,可以直接使用导管自各腺体的开口处吸取,或将自然流出的唾液收集在干净试管内,离心分离,吸取上清液供分析。如果病人不易自然流出唾液,可将少量消毒脱脂棉放入受者舌下数分钟,取出挤压棉球得到唾液。2.11 细菌培养标本2.11.1 血液及骨髓标
45、本的采集应在病人发热初期或发热高峰时采集。一般情况下,要选择在抗菌药物治疗之前,对已用药物而不能中止的病人,也应在下次用药之前采集。以无菌方法取病人静脉血8-10ml,立即注入培养基中(约50ml),轻摇混匀。骨髓采集应在严格消毒后抽取骨髓13ml。采血量一般为培养基的1/10,婴幼儿采血13ml;对已用药的病人,可使血:培养基为1:20或更高;亚急性感染性心内膜炎及布鲁杆菌病,要多次采血和增加采血量,并主张此种病人应从肘动脉或股动脉采血。诊断成人不明原因发热、血流细菌感染时宜在不同部位抽血2套,每套2瓶。2.11.2 尿液标本的采集2.11.2.1 中段尿采集法:是临床上最多采用的方法,女性
46、病人先以肥皂水或1:1000高钮酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口;男性病人应翻转包皮,用肥皂水或1:1000苯扎澳钱冲洗或消毒尿道口,再用灭菌纱布擦干,让病人排尿,弃去前段尿,收集中段尿1020ml,盛于无菌容器内立即加盖送检。2.11.2.2 导尿法:采取导尿管导尿法,是一种较好的无菌采集法。取得1015ml尿液盛于无菌容器中送检。2.11.2.3 肾盂尿采集法:确定菌尿是否来自肾脏。可用尿管采集肾盂尿,首先充分冲洗膀胱,以最后一次冲洗尿作对照,后用导尿管插入输尿管,分别标记左右侧,各收集三次尿;如果输尿管菌数比对照尿菌数多或第三次尿中菌数比第一次多,该菌尿可能来自肾脏;反之,如果第一次尿菌数多
47、于第三次尿菌,则可能来自膀胱。肾盂尿采集法一般应该请泌尿科医师协作进行,并确实做了标记,以防左右侧搞错。2.11.2.4 膀胱穿刺尿采集法:将病人耻骨上皮肤经碘酒、酒精消毒后,以无菌针筒作膀胱穿刺。此法主要用于尿液中厌氧菌的培养,故在取得尿液后,针头插于橡皮塞上送检。当儿童或婴儿采集中段尿困难或培养结果于患者病情有矛盾时,可考虑用此法采集尿液。2.11.2.5 注意事项a)尿液标本的采集和培养中的问题是污染杂菌,故应严格进行无菌操作。b)尿液标本采集后要立即送检或存放于4c冰箱,因搁置时间稍长,尿中病原菌可在室温中增殖,而影响细菌计数的正确性。c)通常应取晨起第一次尿送检。d)由于治疗所用药物
48、多数均通过尿液排泄,因此无论用何种方法采集尿液都宜在用药前进行。e)尿液标本中除特殊情况下不得加防腐剂,否则会影响检出的阳性率。2.11.3 粪便标本的采集标本采集:粪便多采集自然排出之粪便,亦可用直肠拭子法采集。2.11.3.1 自然排便采集法:自然排便后,可挑取有脓血、粘液部分的粪便23g。液体粪便取絮状物,盛于便盒中,或置于保存液或增菌液中送检。2.11.3.2 直肠拭子法:如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿,可采用直肠拭子法采便。其方法是将拭子前端用甘油湿润。然后插入肛门约45cm(幼儿约23cm)处,轻轻在直肠内旋转,擦取直肠表面粘液后取出,盛入无菌试管或保存液中送检。2.11.
49、3.3 注意事项a)粪便标本中含有很多杂菌,粪便标本的采集须注意防止外界脏物污染。b)为提高阳性检出率,要采集新鲜标本,立即送检,若能进行床边接种可提高检出率。c)腹泻病人应尽量在急性期(3天)内采集标本,以提高检出率。d)标本最好在用药前采集。e)用于厌氧菌培养的标本,应尽量避免接触空气,最好立即培养。在不得已时,可将粪便置于无菌容器内于4c保存,但不能超过24h,不能采用低温冷冻(-20C-80C)保存。2.11.4 脑脊液标本的采集2.11.4.1 标本采集由临床医师以无菌操作采集脑脊液35ml,盛于无菌试管或血培养瓶中送检。2.11.4.2 注意事项流感嗜血杆菌及肺炎链球菌也易死亡,a
50、)由于脑膜炎奈瑟菌离体后极易自溶,故检查这类细菌时无论是作涂片镜检,还是进行培养检查,均须立即送检。b)由于某些细菌如脑膜炎奈瑟菌对外界环境抵抗力很低,对寒冷和干燥均敏感,故标本应注意保温(2527C)、防止干燥和避免日光直射。c)最好在应用抗生素治疗前采集标本。d)穿刺过程中要严格无菌操作,切实防止污染。2.11.5 胆汁标本的采集胆汁采取的方法有三种:十二指肠引流法、胆囊穿刺法及手术采取法。2.11.5.1 十二指肠引流法:本法较常用。即在无菌操作下用导管作十二指肠引流采取胆汁。所采取的胆汁分A、B、C三部分,A液来自总胆管,为橙黄色或金黄色;B液来自胆囊,为棕黄色;C液来自胆道,为柠檬色
51、。因采取时通过口腔,常易混入口腔内的正常菌群,一般认为B液作细菌培养意义较大。2.11.5.2 胆囊穿刺法:行胆囊造影术时,可同时采取胆汁。本法所采之胆汁不易污染,适宜作细菌培养。2.11.5.3 手术采取法:在进行胆囊及胆管手术时可由总胆管、胆囊直接穿刺采取胆汁。本法所采集之胆汁也不易污染,适于作细菌学检验。以上采集之标本应立即送检,否则应保存于4C冰箱中。2.11.6 生殖系统标本的采集标本采集:生殖器感染病变种类繁多,需根据不同病变特征及检测目的收集不同标本。2.11.6.1 分泌物标本:尿道及尿道口标本,先用生理盐水局部清洗,用无菌棉拭子插入尿道口12cm,停留10余秒钟,轻轻旋转采集
52、标本;外阴部糜烂、溃疡,先用生理盐水清洗,然后用无菌棉拭子擦取边缘的分泌物;阴道及宫颈口分泌物则在窥阴器下操作,用长的无菌棉签采集分泌物;前列腺则需进行前列腺按摩获取。2.11.6.2 穿刺液标本:生殖器疱疹应先用碘酒、乙醇消毒后应用无菌皮试注射器刺入采取疱疹液;女性盆腔脓月中则在阴道局部消毒后,由直肠、子宫凹陷处进针抽取;子宫内分泌物用无菌导管抽取,导管外套一层保护膜插入子宫后再刺穿保护膜抽取分泌物。2.11.6.3 组织标本:尖锐湿疣或假性湿疣,可切取组织块进行组织印片或制备病理切片。2.11.6.4 注意事项a)生殖器官是开放性器官,采集标本时应严格遵循无菌操作以减少杂菌污染。b)阴道内
53、有许多正常菌群,采集标本应尽可能不触及阴道壁。c)衣原体和病毒均为细胞内寄生微生物,采集标本时应在取材部位(移行上皮处稍内)停留几十秒钟,并擦取内壁细胞。d)生殖道感染厌氧菌也较多见,采标本时注意避免与氧气接触和正常菌群污染。e)淋病奈瑟菌抵抗力低,故采集标本后要尽快送检。2.12 骨髓细胞学标本2.12.1 标本采集2.12.1.1 骨髓细胞学检查标本的采集由临床医生完成。2.12.1.2 骨髓检查的适应症患者多次检查外周血异常,出现原因不明的肝、脾、淋巴结增大。不明原因的发热、骨痛和恶病质。诊断一些造血系统疾病,如各种类型的白血病、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤、巨幼细胞性贫血、恶性组织病等
54、具有肯定诊断意义,也可通过复查骨髓象来评价疗效和判断预后。用于提高某些疾病的诊断率:如疟原虫检查等。2.12.1.3 骨髓穿刺禁忌症某些出血性疾病如血友病。晚期妊娠的孕妇做骨髓穿刺术应慎重。局部皮肤有弥散性化脓性病变或局部骨髓炎。2.12.2 取材2.12.2.1 骼骨后上棘穿刺技术病人侧卧,幼儿则俯卧(腹下放一枕头),侧卧时上面的腿向胸部弯曲,下面的腿伸直,使腰箭部向后突出,骼后上棘一般明显突出臀部之上,可用手指在箭椎两侧摸知,此处骨髓腔大,骨皮质薄,骨面平而大,容易刺入,多被选用。待骨髓涂片干燥后用铅笔在血膜上做标记,盒装后统一由护工送到检验科。局部用碘酒、乙醇消毒,盖上已消毒的孔巾。麻醉
55、局部皮肤、皮下组织及骨膜,按摩注射处至药液扩散为止。左手固定局部皮肤,右手持穿刺针与骨面垂直转刺而入,达骨髓时有阻力消失感(或落空感),深度约针尖达骨膜后再刺入lcm左右。取出针芯,用5ml干燥注射器,轻轻抽取,待红色骨髓液标本出现于针管底部即止。抽取骨髓量一般不超过0.2ml,过多则容易混血稀释。立即取下注射器,制作骨髓液涂片。因骨髓液容易凝固,动作应快。拔下穿刺针,敷以消毒纱布,压迫数分钟使其止血,然后贴上胶布,3d内禁止洗澡。同时取末梢血制作血涂片。特点:该部位骨质较薄,刺针容易,骨髓液丰富;很少被血液所稀释,抽出量较多,可利用做细菌培养及查找LE细胞,其次对再障有重要早期诊断价值。2.
56、12.2.2 骼前上棘穿刺技术病人仰卧,穿刺点在骼前上棘顶端后约lcm,常规消毒。穿刺时左手固定骼前上棘,右手持针与骨面垂直转刺而入,凭落空感探知骨髓腔;然后再用注射器抽取骨髓,方法同前。特点:该部位较安全,但此部位骨骼较硬,不如骼后易穿,但对早期再障诊断价值较大。2.12.2.3 胸骨穿刺技术病人仰卧,并将胸部稍垫高,取胸骨中线,相当第2肋间水平,胸骨体上端为穿刺点。用碘酒、乙醇常规消毒。局部麻醉,然后用手按摩使药液扩散。左手固定穿刺点两旁胸骨缘,右手将针头斜面向上,针向头部75度斜方向徐徐转动刺入,达骨髓腔时有落空感,此时轻摇穿刺针不倒,穿刺时注意用左手固定胸腔,勿过猛用力,以免不慎刺入胸腔。特点:该部位骨髓细胞增生旺盛,尤其对早期白血病诊断价值极大。但风险
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